PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

This study aims to describe the molecular detection of Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii, and Neospora caninum in brain samples obtained from bovine fetuses at a slaughterhouse in South Brazil. Brain samples from 35 fetuses of asymptomatic pregnant beef cows underwent nested polymerase chain reaction (PCR) to amplify a fragment of the 18S rRNA gene specific to S. neurona, T. gondii, and N. caninum. The amplicons were subjected to a two-step digestion process: first, with the restriction enzyme DdeI, which differentiates N. caninum from T. gondii and S. neurona; and subsequently, with the HpaII enzyme, to distinguish S. neurona from T. gondii and N. caninum. Of the 35 brain samples tested, 26 yielded positive PCR results for the 18S rRNA gene. Of these, 23 were digested with restriction enzymes, yielding 17 positive samples for S. neurona, five for N. caninum, and one for T. gondii. Specific primers for S. neurona, N. caninum, and T. gondii were employed to confirm the restriction fragment length polymorphism results. DNA sequencing and phylogenetic analysis, based on the ITS-1 region, were conducted on a positive sample for S. neurona, confirming our surprising findings. The sequence from fetus 75 exhibited a high nucleotide identity (97.79%) and clustered with S. neurona sequences available in GenBank. Molecular analyses confirmed the unprecedented detection of S. neurona, a protozoan not previously reported in cattle, in bovine fetal brain samples, thereby underscoring the necessity for further research on Apicomplexa protozoan infections in cattle.

• Sarcocystis neurona transplacental bovine fetal brain reproductive losses

Abstract in Portuguese:

Este estudo tem como objetivo descrever a detecção molecular de Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii e Neospora caninum em amostras de cérebro obtidas de fetos bovinos em um matadouro no Sul do Brasil. Amostras de cérebro de 35 fetos de vacas gestantes assintomáticas foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) aninhada para amplificar um fragmento do gene 18S rRNA específico para S. neurona, T. gondii e N. caninum. Os amplicons foram submetidos a um processo de digestão em duas etapas: primeiro, com a enzima de restrição DdeI, que diferencia N. caninum de T. gondii e S. neurona; e posteriormente, com a enzima HpaII, para distinguir S. neurona de T. gondii e N. caninum. Das 35 amostras de cérebro testadas, 26 apresentaram resultados positivos na PCR para o gene 18S rRNA. Destas, 23 foram digeridas com enzimas de restrição, resultando em 17 amostras positivas para S. neurona, cinco para N. caninum e uma para T. gondii. Primers específicos para S. neurona, N. caninum e T. gondii foram empregados para confirmar os resultados do polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição. Sequenciamento de DNA e análise filogenética, baseada na região ITS-1, foram realizados em uma amostra positiva para S. neurona, confirmando nossos resultados surpreendentes. A sequência do feto 75 apresentou uma alta identidade de nucleotídeos (97,79%) e se agrupou com sequências de S. neurona disponíveis no GenBank. As análises moleculares confirmaram a detecção inédita de S. neurona, um protozoário não anteriormente relatado em bovinos, em amostras de cérebro fetal bovino, destacando assim a necessidade de mais pesquisas sobre infecções por protozoários do filo Apicomplexa em bovinos.

• Sarcocystis neurona transplacentária bovino encéfalo fetal perdas reprodutivas

Abstract in English:

Determining if reproductive failures in ewes at the semiarid region in the state of Bahia are related to the consumption of the species Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, and this study was developed using pregnant ewes divided into six groups: G1, G2, G3, G4 with six animals each, G5 and G6 with ten animals. Each group received fence leaves in the proportion of 1%, 2%, 0.5%, and 0.25% of live weight (LW) respectively; G5 and G6, with ten animals each, receiving 0.25% and 0.5% of the LW, respectively, and the Control Group, comprising 16 ewes, were grass feeding (Cynodon dactylon). Ewes from G1 to G4 were the same, except for two, and started ingestion of the plant four days after ending of natural mating on the 80th day of gestation, while those regarding from G5 to G6 groups started ingestion on the 26th day of gestation ending on the 98 day. The ultrasonographic test was performed weekly. In G1 ewes (1%), there was an embryonic loss on the 32nd and 39th days of gestation and abortion on the 46th day. In G2 (2%), the embryo loss was earlier (on the 26th day of gestation), and abortion on the 46th day of gestation. In G3 group (0.5%), there was an embryonic loss around the 40th day of gestation. In G4 group (0.25%), it was observed the occurrence of one death lamb with bone malformations. In G6 (0.5%), abortion occurred later (108 days), followed by retained placenta. This was also verified in G5 group (0.25%). The presence of fetal malformation was found in death lambs born in G4 group, born alive from G5 and G6 groups, and one aborted from G6. In G5 and G6 groups, there were also genetic alterations on surviving lambs. In addition to these results, recurrent estrus was observed without gestation in G1, G2, G3, and G4 ewes. From the Control Group, 13 normal lambs were born without genetic alterations; furthermore, concerning a quadruple birth, three lambs were born dead. The results infer that species of C. pyramidale in low doses causes reproductive losses in pregnant ewes, therefore it is not recommended for sheep diet over the first 60 days of gestation.

• Embryonic loss abortion malformation ewes Cenostigma pyramidale hay reproductive losses teratogenic plant sheep catingueira

Abstract in Portuguese:

Para determinar se falhas reprodutivas em ovelhas na região semiárida da Bahia estão relacionadas ao consumo de Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P. Lewis, foi realizado um estudo utilizando-se ovelhas prenhes divididas em seis grupos e dois Grupos Controle. Os grupos G1, G2, G3 e G4 com seis animais cada. Cada grupo recebeu folhas fenadas na proporção de 1%, 2%, 0,5% e 0,25% do peso vivo (PV) respectivamente; G5 e G6, com 10 animais cada, que receberam 0,25% e 0,5% do PV respectivamente. Os Grupos Controle foram alimentados com ração e capim (Cynodon dactylon). Ovelhas dos grupos 1 a 4 iniciaram ingestão da planta quatro dias após monta natural com término aos 80 dias de gestação, enquanto as dos grupos 5 a 6 iniciaram ingestão no 26º dia de gestação com término aos 98 dias. Avaliação ultrassonográfica foi realizada semanalmente. Nos animais do G1 (1%), verificou-se perda embrionária aos 32 e 39 dias de gestação, e aborto aos 46 dias. Nos do G2 (2%) a perda embrionária foi mais precoce (26 dias), e aborto aos 46 dias. No G3 (0,5%), houve perda embrionária em torno dos 40 dias. No G4 (0,25%), verificou-se ocorrência de natimorto com malformações aos 150 dias de gestação. No G6 (0,5%) o aborto ocorreu mais tardiamente (108 dias), seguido de retenção de placenta. Essa ocorrência também foi verificada no G5 (0,25%). A presença de malformação fetal foi encontrada em fetos natimorto do G4, nascidos vivos do G5 e G6, e um abortado do G6. No G5 e G6 também foram observadas alterações de aprumos em cordeiros sobreviventes. Do Grupo Controle nasceram 13 borregos normais, porém uma ovelha apresentou gestação quádrupla com três natimortos. Os resultados inferem que C. pyramidale fenada em baixas doses causa perdas reprodutivas em ovelhas gestantes, não sendo por isso recomendada para a dieta de ovelhas durante os primeiros 60 dias de gestação.

• Perda embrionária aborto malformações ovinos Cenostigma pyramidale feno perdas reprodutivas planta teratogênica ovelhas catingueira

Abstract in English:

ABSTRACT.- Pescador C.A., Oliveira E.C., Pedroso P.M.O., Bandarra P.M., Okuda L.H., Corbellini L.G. & Driemeier D. 2007. [Reproductive losses linked to Toxoplasma gondii infection in goats in southern Brazil.] Perdas reprodutivas associadas com infecção por Toxoplasma gondii em caprinos no sul do Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 27(4):167-171. Departamento de Patologia Clínica Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: davetpat@ufrgs.br Toxoplasma gondii was implicated with reproductive losses in a goat herd in Rio Grande do Sul, Brazil. Gross changes were present in 2 out of 6 fetuses/offsprings submitted for diagnosis and included enlarged, pale mesenteric lymph nodes, and edematous, mottled red and tan lungs. Microscopic changes were observed in most fetuses and were especially characterized by lymphoplasmacytic infiltration in the brain and lungs. Other histological changes included lymphoplasmacytic interstitial nephritis, necrotizing lymphadenitis and periportal lympho-plasmacytic cell infiltrates. While bacteriological and direct immunofluorescent antibody tests for Leptospira sp. were negative in samples from all cases, immunohistochemical and PCR procedures for Toxoplasma gondii reacted positively in most of them. Antibody titles against T. gondii varying from 1:512 to 1:2048 were detected in serum samples from the mother goats of these aborted (1), stillborn (3) or dead newborn (2) kids. This paper describes the clinical, pathological, serological, molecular and immunohistochemical findings of a Toxoplasma gondii-infected goat flock.

• Abortion goat reproductive losses stillborn Toxoplasma gondii

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Pescador C.A., Oliveira E.C., Pedroso P.M.O., Bandarra P.M., Okuda L.H., Corbellini L.G. & Driemeier D. 2007. [Reproductive losses linked to Toxoplasma gondii infection in goats in southern Brazil.] Perdas reprodutivas associadas com infecção por Toxoplasma gondii em caprinos no sul do Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 27(4):167-171. Departamento de Patologia Clínica Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: davetpat@ufrgs.br Toxoplasma gondii was implicated with reproductive losses in a goat herd in Rio Grande do Sul, Brazil. Gross changes were present in 2 out of 6 fetuses/offsprings submitted for diagnosis and included enlarged, pale mesenteric lymph nodes, and edematous, mottled red and tan lungs. Microscopic changes were observed in most fetuses and were especially characterized by lymphoplasmacytic infiltration in the brain and lungs. Other histological changes included lymphoplasmacytic interstitial nephritis, necrotizing lymphadenitis and periportal lympho-plasmacytic cell infiltrates. While bacteriological and direct immunofluorescent antibody tests for Leptospira sp. were negative in samples from all cases, immunohistochemical and PCR procedures for Toxoplasma gondii reacted positively in most of them. Antibody titles against T. gondii varying from 1:512 to 1:2048 were detected in serum samples from the mother goats of these aborted (1), stillborn (3) or dead newborn (2) kids. This paper describes the clinical, pathological, serological, molecular and immunohistochemical findings of a Toxoplasma gondii-infected goat flock.