Resultado da pesquisa (140)

Termo utilizado na pesquisa p.m.

#131 - Development and standardization of an indirect ELISA. for the serological diagnosis of classical swine fever, 19(3/4):123-127

Abstract in English:

ABSTRACT.- Paredes J.C.M., Oliveira L.G., Braga A.C., Trevisol I.M. & Roehe P.M. 1999. Development and standardization of an indirect ELISA for the serological diagnosis of classical swine fever. [Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica.] Pesquisa Veterinária Brasileira, 19(3/4):123-127. Equipe de Virologia, FEPAGRO- Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. An indirect enzyme linked immunoassay (ELISA-I) was developed and standardized for the serological diagnosis of classical swine fever (CSF). For the comparison, nine hundred and thirty-seven swine serum samples were tested by serum neutralization followed by immunoperoxidase staining (NPLA), considered ·as the standard. Of these, 223 were positive and 714 negative for neutralizing antibodies to classical swine fever virus (CSFV). In relation to the NPLA, the ELISA-I presented a 98.2% sensitivity; 92.86% specificity, 81.11% positive predictive value, 99.4% negative predictive value and a 94.1% precision. Statistical analysis showed a very strong correlation (r=0,94) between both tests. When compared to a commercially available ELISA kit, the performance of both, in relation to the NPLA, was simila1: It was concluded that the ELISA-I is suitable for large scale screening of antibodies to classical swine fever virus, although it does not distinguish antibodies to classical swine fever vírus from those induced by other pestiviruses.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Paredes J.C.M., Oliveira L.G., Braga A.C., Trevisol I.M. & Roehe P.M. 1999. Development and standardization of an indirect ELISA for the serological diagnosis of classical swine fever. [Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica.] Pesquisa Veterinária Brasileira, 19(3/4):123-127. Equipe de Virologia, FEPAGRO- Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. Um ensaio imunoenzimático do tipo ELISA indireto (ELISA-I) foi desenvolvido e padronizado para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica. Na comparação foram utilizadas novecentas e trinta e sete amostras de soros suínos, as quais foram testadas pelo teste de soroneutralização seguido de revelação por imunoperoxidase (NPLA), tomado como padrão, resultando em 223 amostras positivas e 714 negativas. Em relação ao NPLA, o ELISA-I apresentou sensibilidade de 98,21%, especificidade de 92,86%, valor preditivo positivo de 81, 11%, valor preditivo negativo de 99,4% e precisão de 94, 1 %. A análise estatística dos resultados revelou uma correlação muito forte (r=0,94) entre os dois testes. Quando comparado com um "kit" de ELISA disponível comercialmente, a performance de ambos em relação ao NPLA foi similar. Concluiu-se que o ELISA-I é um teste apropriado para triagem em larga escala de soros para a detecção de anticorpos contra o Vírus da Peste Suína Clássica (VPSC), embora não seja capaz de diferenciar entre anticorpos induzidos pelo VPSC ou outros pestivírus.


#132 - Acute and Iatent infection in sheep inoculated with bovine herpesvirus type-5 (BHV-5), 18(3/4):99-106

Abstract in English:

ABSTRACT.- Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Botton S.A., lrigoyen L.F., Roehe P.M., Brum M.C.S. & Canto M.C. 1998. [Acute and Iatent infection in sheep inoculated with bovine herpesvirus type-5 (BHV-5).] Infecção aguda e latente em ovinos inoculados com o herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5). Pesquisa Veterinária Brasileira 18(3/4):99-106. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97015-900 Santa Maria, RS, Brazil. Experimental inoculation of lambs with bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) reproduced several aspects of the BHV-5 infection in cattle. lntranasal inoculation was followed by eficiente viral replication and shedding, establishment and reactivation of latency, and even the development of meningoencephalitis in one animal. Lambs inoculated with the brazilian is o late EVl-88 showed transient hipertermia, nasal hiperemia and discharge ranging from serous to muco purulent. The animals shed virus in nasal secretions in titers up to 107,11 TCID50/ml during up to 16 days. One lamb showed clinical signs of encephalitis on day 10 post inoculation (pi), being euthanized in extremis on day 13. lnfectious vírus was recovered from severa) áreas of the brain of this lamb, including anterior and posterior cerebrum, dorso- and ventro-lateral hemisphere, cerebellum, pons, midbrain and olfactory bulb. Histological changes were observed in severa) regions of the brain, most consistently in the anterior cerebrum, ventrolateral cortex and midbrain, and consisted mainly of meningitis, perivascular mononuclear cuffing, focal gliosis, neuronal necrosis and intranuclear inclusions. Four lambs used as sentinels acquired the infection and shed virus starting at the 2nd day pi during up to 7 days. Lambs inoculated with the argentinian isolate A663 showed only mild respiratory signs, although they shed virus for up to 15 days. Administration of dexamethazone to the animals starting at day 50 pi was followed by reactivation of the latent infection and viral shedding during up to 11 days by 76.9% (10/13) of the inoculated lambs and 100% (3/3) of the sentinels. These results demonstrate that sheep are susceptible to BHV-5 acute and latent infection and suggest that natural infections by this virus in sheep may potentially occur. ln this sense, a possible role of this species in the epidemiology of BHV-5 infections awaits further investigation.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Botton S.A., lrigoyen L.F., Roehe P.M., Brum M.C.S. & Canto M.C. 1998. [Acute and Iatent infection in sheep inoculated with bovine herpesvirus type-5 (BHV-5).] Infecção aguda e latente em ovinos inoculados com o herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5). Pesquisa Veterinária Brasileira 18(3/4):99-106. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97015-900 Santa Maria, RS, Brazil. Infecção experimental de ovinos com o herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) reproduziu vários aspectos da infecção pelo BHV-5 em bovinos. Inoculação intranasal foi seguida de extensiva replicação virai na cavidade nasal, excreção e transmissão do vírus a outros. animais, estabelecimento e reativação de latência, e o desenvolvimento de meningoencefalite clínica em um animal. Ovinos inoculados com a amostra brasi- leira EVl-88 apresentaram hipertermia transitória, hiperemia da mucosa nasal e corrimento nasal de seroso a muco-purulento. Os animais eliminaram vírus em secreções nasais em títulos de até 107,11 DICC50/ml por até 16 dias. Um cordeiro apresentou sinais clínicos de encefalite no dia 10 pósinoculação, sendo sacrificado in extremis no início do dia 13. Infectividade foi detectada em várias regiões do encéfalo des: se animal, incluindo os hemisférios anterior e posterior, córtex orso- e ventro-lateral, ponte, pedúnculo cerebral, cerebelo e bulbo olfatório. Alterações histológicas foram observadas em várias regiões do encéfalo, principalmente no hemisfério anterior, córtex ventro-lateral e pedúnculos cerebrais, e consistiram de meningite mononuclear, manguitos perivasculares, gliose focal, necrose e inclusões intranucleares em neurônios. Quatro ovinos mantidos como sentinelas adquiriram a infecção e eliminaram vírus a partir do final do segundo dia, até 7 dias. Ovinos inoculados com a amostra argentina A663 apresentaram apenas hiperemia e umidecimento da mucosa nasal, embora eliminassem vírus nas secreções nasais por até 15 dias. Tratamento dos animais com dexametasona a partir do dia 50 pós-inoculação provocou reativação da infecção latente e eliminação viral durante até 11 dias por 76,9% (10/13) dos animais inoculados e por 100% (3/3) dos animais sentinela. Esses resultados·demonstram que ovinos são susceptíveis à infecção aguda e latente pelo BHV-5 e sugerem que infecções naturais de ovinos por este vírus podem potencialmente ocorrer. Ness sentido, uma possível participação da espécie ovina como reservatório natural desse vírus deve ser melhor investigada.


#133 - Meningoencephalitis in cattle caused by bovine herpesvirus-5 in Mato Grosso do Sul and São Paulo, 18(2):76-83

Abstract in English:

ABSTRACT.- Salvador S.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. [Meningoencephalitis in cattle caused by bovine herpesvirus-5 in Mato Grosso do Sul and São Paulo.] Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):76-83. Depto Medicina Veterinária, Universidade Federal do Mato Grosso do Sul, Cx. Postal 649, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. Fifteen outbreaks of bovine herpesvirus-type 5 (BHV-5) infection were diagnosed from August 1993 to December 1996. Fourteen outbreaks occurred in the State of Mato Grosso do Sul and one in the State of São Paulo. Cattle 6 to 60 months old were affected. Morbidity reached 0.05% to 5% and case fatality rate was nearly 100%. The disease occurred in diferente municipalities and at different times of the yea1: Clinical signs were exclusively nervous, and the clinical course varied from 1 to 15 days. The main histologic lesions were meningitis, diffuse encephalitis and necrosis of the cerebral cortex with intranuclear inclusion bodies in astrocytes and neurons. BHV-5 was isolated from 11 out of 12 brains of infected animals inoculated in calf testis cells and MDBK cells. The vírus was identified by immunoperoxidase stainingwith use of monoclonal specific antibodies. Outbreaks of infection by BHV-5 represent 5% of the total number of bovine cases submitted for diagnosis to the Clinical Hospital of the University of Mato Grosso do Sul. These results indicate the importance of the disease in Mato Grosso do Sul and the need for its differentiation from other diseases which affect the nervous system.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Salvador S.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. [Meningoencephalitis in cattle caused by bovine herpesvirus-5 in Mato Grosso do Sul and São Paulo.] Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):76-83. Depto Medicina Veterinária, Universidade Federal do Mato Grosso do Sul, Cx. Postal 649, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. Quinze focos de meningoencefalite por herpesvírus bovino-5 (BHV-5) foram diagnosticados entre agosto de 1993 e dezembro de 1996, sendo 14 provenientes do estado do Mato Grosso do Sul e um do estado de São Paulo. A doença ocorreu em diversos municípios e em diferentes épocas do ano. Foram afetados bovinos de 6 a 60 meses de idade, com uma morbidade de 0,05% a 5% e letalidade próxima a 100%. Os sinais clínicos foram exclusivamente nervosos e o curso da enfermidade variou de 1 a 15 dias. As principais lesões histológicas detectadas foram meningite e encefalite difusa com malacia do córtex cerebral e presença de corpúsculos de inclusão intranucleares em astrócitos e neurônios. O vírus foi isolado do cérebro de 11 de um total de 12 animais, e sua identidade confirmada por imunoperoxidase, utilizando-se anticorpos monoclonais específicos. Os surtos de encefalite por BHV-5 representam 5% dos diagnósticos realizados em bovinos pelo Hospital Veterinário da Universidade Federal do Mato Grosso do Sul. Os resultados deste trabalho evidenciam a importância da doença no Mato Grosso do Sul e indicam a necessidade de incluir a encefalite por BHV-5 no diagnóstico diferencial de outras doenças do sistema nervoso de bovinos frequentes no Estado.


#134 - Preliminary characterization of Brazilian isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV), 18(2):84-92

Abstract in English:

ABSTRACT.- Botton S.A., Gil L.H.V.G., Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Pituco E.M., Roehe P.M., Moojen V. & Wendelstein, A.C. 1998. [Preliminary characterization of Brazilian isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV).] Caracterização preliminar de amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2)84-92. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Microbiologia e Parasitologia, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS 97015-900, Brazil. This article reports the preliminary characterization of 19 Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) isolates, regarding the biological, antigenic and molecular properties. Eleven viruses were isolated from bovine fetuses, six were obtained from blood of animals from herds with reproductive problems, and two were isolated from clinical cases of gastroenteric disease. The clinical cases atfected young animals and were characterized by diarrhea, oronasal and digestive erosions and ulceration, and occasional digestive bleeding and vulvar petechial hemorrhage. Sixteen isolates (84.2%), including those obtained from fetuses and clinical cases, were of the non-cytopathic (ncp) biotype. Replication ofthree isolates (15.8%) in tissue culture was characterized by appearance of cellular vacuolation and progressive destruction of the monolayers. Analysis of these isolates after cloning revealed a mixed population of cytopathic (cp) and non-cytopathic viruses. Analysis of viral polypeptides by SDS-PAGE followed by "Western immunoblot" revealed the production of the non-structural protein NS3/p80 in cells infected with the cp viruses. In contrast, generation of NS3/p80 was not observed in cells infected with the ncp isolates, which only expressed the precursor polypeptide NS23/p125. Analysis of reactivity with a panel of 15 monoclonal antibodies (MAbs) revealed a marked antigenic variability among the isolates, mainly in the envelope glycoprotein E2/gp53. Although one MAb to this glycoprotein recognized 18 isolates (94. 7%), the other nine E2/gp53 MAbs recognized zero to 57.9% of the isolates. The marked antigenic diversity observed among the brazilian BVDV isolates may have important implications on diagnosis and immunization strategies.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Botton S.A., Gil L.H.V.G., Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Pituco E.M., Roehe P.M., Moojen V. & Wendelstein, A.C. 1998. [Preliminary characterization of Brazilian isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV).] Caracterização preliminar de amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2)84-92. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Microbiologia e Parasitologia, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS 97015-900, Brazil. O presente artigo relata a caracterização inicial de 19 amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil, com relação a aspectos biológicos, antigênicos e moleculares. Onze amostras foram isoladas de fetos bovinos, seis foram obtidas do sangue de animais clinicamente saudáveis de rebanhos com problemas reprodutivos e duas amostras foram isoladas de casos clínicos de enfermidade gastrentérica. Os casos de doença entérica afetaram animais jovens e cursaram com diarréia, às vezes sanguinolenta, erosões e ulcerações na mucosa oronasal e do trato digestivo, e eventualmente hemorragias digestivas e petéquias na vulva. Dezesseis amostras (84,2%), incluindo aquelas isoladas de fetos e dos casos clínicos, pertencem ao biotipo não-citopático (ncp). A replicação de outras três amostras (15,8%), foi carac terizada pelo aparecimento de vacuolização e destruição progressiva do tapete celular. A análise das amostras que produziram citopatologia, após clonagem, revelou tratar-se de populações mistas composta de vírus citopáticos (cp) e nãocitopáticos. A análise de polipeptídeos virais através de SDSPAGE seguida de "Western-immunoblót" revelou a produção da proteína não-estrutural NS3/p80 em células infectadas com as amostras cp. Em contraste, não se evidenciou a geração da NS3/p80 em células infectadas com as amostras ncp que produziram apenas o polipeptídeo precursor NS23/p125. A subsequente análise de reatividade frente a um painel de 15 anticorpos monoclonais (AcMs) revelou uma diversidade antigénica marcante entre os isolados, sobretudo na glicoproteína E2/gp53. Embora um AcM contra essa glicoproteína reagiu com 18 isolados (94, 7%), outros nove AcMs anti-E2/gp53 reconheceram entre zero e 57,9% das amostras brasileiras. A grande variabilidade antigénica detectada entre as amostras brasileiras do BVDV pode ter importantes implicações para o diagnóstico e estratégias de controle e imunização contra o vírus.


#135 - Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5, 17(1):41-44

Abstract in English:

ABSTRACT.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. Bovine Herpesviruses (BHV) type 1 (BHV-1) and type 5 (BHV-5) were analysed by immunoperoxidase staining with a panei of monoclonal antibodies (Mabs) prepared against BHV antigens. One of the Mabs recognized ali BHV isolates tested. The remainder four mabs recognized only BHV-1 samples, including standard laboratory strains. Ali isolates associated with clinical cases of encephalitis (BHV-5) displayed a pattern of reactivity distinct from that of viruses isolated from syndromes associated with BHV-1 infections. The results obtained indicate that such Mabs allowed the differentiation between BHV-1 and BHV-5, with a perfect correlation between the clinical pictures and the patterns of reactivity in vitro.

Abstract in Portuguese:

SINOPSE.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. Amostras de herpesvírus bovinos (BHV) tipo 1 (Virus da Rinotraqueíte Infecciosa BovinaNulvovaginite Pustular Infecciosa; BHV-1) e tipo 5 (Herpesvírus da Encefalite Bovina; BHV-5) tiveram seu perfil de reatividade analisado em testes de imunoperoxidase frente a um painel composto por cinco anticorpos monoclonais (AcM) produzidos contra antígenos de BHV-1. Um dos AcM reconheceu todas as amostras de BHV examinadas. Os quatro AcM restantes reconheceram somente amostras de BHV-1. Todas as amostras isoladas de casos de encefalites (BHV-5) apresentaram um padrão de reação distinto daquelas isoladas de outros síndromes associados à infecção pelo BHV-1. Os resultados obtidos indicam que os AcM avaliados permitem a diferenciação entre amostras de BHV-1 e BHV-5, havendo perfeita correlação entre os quadros clínicos observados com os perfis de reatividade obtidos in vitro.


#136 - Rotavirus in swine in the southem region of Brazil

Abstract in English:

The occurrence of rotavirus infection was studied in faeces of diarrhoeic swine in 32 farms of 22 municipalities from the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina. From a total number of 231 faecal samples collected from piglets aging 1 to 60 days, 43 (18.6%) were positive by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), and 42 (17.7%) were positive by an enzyme immunoassay (ELISA). With the exception of 1 sample, the electropherotypes observed were consistent with the description of classical group A rotavirus. in 5 samples rotavirus was detected by ELISA and not by PAGE, whereas the inverse occurred in 7 samples. Studies with faecal dilutions of positive faeces demonstrated that the discrepancies probably were not due to differences in virus concentration. The presence of IgG was confirmed in one sample PAGE positive - ELISA negative, suggesting the presence of immune complexes that may have interfered in the results obtained. Bacteriological and parasitological examinations in 75 samples showed the presence of enteropathogenic Escherichia coli in 8 (10.7%) samples and Treponema hyodysenteriae in 6 (8%). in no sample were parasites detected. In only one sample E. coli and rotavirus were detected together, suggesting low incidence of the association bacteria-viruses. However, the severity of the outbreak where association was detected was greater than in the others. The age distribution of rotavirus infection in the piglets showed that 90% occurred in animals between 15 and 30 days old.

Abstract in Portuguese:

A ocorrência de infecção por rotavirus foi estudada em granjas de suínos acometidos de diarréia em 32 propriedades de 22 municípios do Rio Grande do Sul e Santa Catarina. De um total de 231 amostras fecais coletadas de leitões na faixa etária de 1 a 60 dias, 43 (18,6%) foram positivas pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e 42 (17,7%) pelo ensaio imúnoenzimático (ELISA). Com a exceção de um caso, os eletroferotipos observados foram consistentes com a descrição dos rotavirus "clássicos" do grupo A. Em 5 amostras o rotavirus foi detectado por ELISA e não por PAGE, enquanto que a situação inversa ocorreu em 7 casos. Estudos com diluições de fezes positivas demonstraram que as discrepâncias observadas provavelmente não foram devidas a diferenças nas concentrações de vírus. A presença de IgG foi verificada em uma amostra PAGE positiva ELISA negativa, sugerindo a presença de complexos imunes que poderiam ser a causa de discrepâncias entre os métodos de diagnóstico. Exames bacteriológicos e parasitológicos em 75 amostras revelaram a presença de Escherichia coli enteropatogênica em 8 (10, 7%) e Treponema hyodysenteriae em 6 (8%). Em nenhum caso foram detectados parasitos. Em somente um caso E. coli foi encontrada em associação com rotavirus, que clinicamente mostrou maior gravidade do que nos demais. A distribuição da infecção por faixas etárias revelou que 79% dos casos foram verificados em animais de 15 a 30 dias.


#137 - Neutralizing antibody levels in cattle vaccinated against rabies

Abstract in English:

Three modified live virus vaccines and one inactivated vaccine against rabies were purchased in the market and applied into cattle, aiming the determination of neutralizing antibody levels induced. Each vaccine was injected as a single dose into groups of 10 animals/vaccine, according to manufacturer's recommendations, plus 10 uninoculated controls. Cattle serum samples were collected on days 0, 30 and 60 post-vaccination. The samples were tested against the strain CVS in the mouse neutralization test, and against CVS and ERA strains in the cell culture virus-neutralization test. All the four vaccines were shown not to be good rabies neutralizing antibody inducers. The results obtained with the two tests, despite the low titers observed in both, were not comparable, probably because of the differences in the amount of virus. used for challenge.

Abstract in Portuguese:

Três vacinas antirábicas com vírus modificado e uma vacina inativada foram adquiridas no comércio e aplicadas em bovinos, visando a determinação dos níveis de anticorpos neutralizantes induzidos. Cada vacina foi injetada em dose única em grupos de 10 animais/vacina, de acordo com as recomendações dos fabricantes, além de 10 controles não inoculados. Amostras de soro foram coletadas nos dias 0, 30 e 60 pós-vacinação. As amostras foram testadas contra a cepa CVS no teste de vírus-neutralização em camundongos, e contra as cepas CVS e ERA no teste de vírus-neutralização em cultivos celulares. Todas as quatro vacinas demonstraram não ser boas indutoras de anticorpos neutralizantes. Os resultados obtidos com os dois testes, apesar dos baixos títulos observados em ambos, não foram comparáveis, provavelmente devido à diferença na quantidade de vírus utilizada no desafio.


#138 - Comparison of immunoelectrosmophoresis, serum neutralization and immunodiffusion in the serological diagnosis of Aujeszky's disease

Abstract in English:

In an attempt to determine the most suitable screening test for the identification of antibodies to Aujeszky's disease vírus in large scale, immunoelectrosmophoresis (IEOP), serum neutralization in microtitre plates (SN) and agar gel immunodiffusion (MID) were adapted to our working conditions and compared. For the comparison between IEOP and SN, 575 field sera of swine from the states of Paraná, Santa Catarina and Rio Grande do Sul were used. The IEOP detected 358 (100%) positive sera, whereas SN detected 293 (81,84%) positives and 35 (9,78%) negatives. In 30 (8,38%) samples no results could be obtained with SN due to contamination or cell culture toxicity. In 217 (100%) samples negative by IEOP, 199 (91,7%) were negative by SN. The remainder 18 (8,29%) allowed no SN result. MID was included in the comparison by testing 386 sera by the three methods. From 285 (100%) IEOP positive sera, SN detected 226 (79,3%) positives, 31 (10,9%) negatives and 28 (9,8%) without result. MID detected 193 (67,7%) positives, 84 (29,5%) negatives and 8 (2,8%) allowed no conclusive result. In 101 (100%) IEOP negative sera, a11 were also negative by MID; 95 (94,05%) were negative by SN and 6 (5,94%) gave no result. Considering the SN results as standard, the IEOP has shown to be a useful technique for screening particularly for laboratories where cell culture facilities are not available. The positive sera heve, however, to be retested either by SN or ELISA, in order to be sure of its positivity, since about 10% of samples were false positives. The MID, despite simpler than IEOP, showed 15,79% false negatives, what might compromise its use as a preliminary test for massive serology.

Abstract in Portuguese:

Com o objetivo de determinar o teste de triagem mais eficaz para a identificação de anticorpos contra o vírus da Doença de Aujeszky em larga escala, imunoeletrosmoforese (IEOF), soroneutralização em microtécnica (SN) e imunodifusão em gel de agar foran1 adaptados às nossas condições de trabalho e comparados. Para a comparação entre IEOF e SN, 575 soros de campo de suínos dos Estados de Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul foram utilizados. A IEOF detectou 358 (100%) soros positivos, enquanto a SN detectou 293 (81,84%) positivos e 35 (9,78%) negativos. Em 30 (8,38%) amostras, nenhum resultado pôde ser obtido com a SN devido a contaminação ou toxicidade aos cultivas celulares. Em 217 (100%) amostras negativas por IEOF, 199 (91,7%) foram negativas por SN. As 18 (8,29%) restantes não permitiram resultado por SN. MIO foi incluída na comparação através da testagem comparativa de 386 soros pelos três métodos. De 285 (100%) soros IEOF positivos, a SN detectou 226 (79,3%) positivos, 31 (10,9%) negativos e em 28 (9,8%) não foi obtido resultado. A MIO detectou 193 (67,7%) positivos, 84 (29,5%) negativos e 8 (2,8%) soros não permitiram um resultado conclusivo. Em 101 (100%) soros IEOF negativos, todos foram também negativos por MID; 95 (94,05%) foram negativos por SN e 6 (5,94%) não permitiram resultado. Considerando os resultados da SN como padrão, a IEOF mostrou ser uma técnica útil para triagem, particularmente em laboratórios onde não são trabalhadas técnicas de cultivo celular. Os soros positivos necessitam, no entanto, ser retestados por SN ou ELISA, a fim de serem confirmados resultados positivos, uma vez que em torno de 10% das amostras foram falsos positivos, A MID, apesar de se constituir em uma técnica mais simples que a IEOF, mostrou 15,79% de falsos negativos, o que pode comprometer seu uso como um teste preliminar para sorologia em larga escala.


#139 - Atypical mycobacteria isolated from intestinal lesions of Bovine Oesophagostomosis

Abstract in English:

It was found that 90% of 1 to 9 year old cattle from southwestem Brazil had nodular intestinal lesions of Oesophagostomosis in the final portion of the ileum and in the cecum. The number of nodules varied from 1 to 53 and their diameter from l to 19 mm. The cut surface of the larger nodules showed a dry yellowish caseous material, and some times fragments of Oesophagostomum radiatum larvae could be observed. Bacteriological examination of 400 samples taken from the intestinal wall with and without lesions resulted in isolation of 42 (5,2%) cultures of atypical mycobateria. Thirty cultures originated (71,4%) from nodular material and 12 (28,6%) from the portion without lesion. Twenty three (54,8%) cultures belonged to the Runyon group IV and 19 (45,2%) to group II and III. There were 4 cultures of Mycobacterium scrofulaceum, 1 of the M. terrae-complex and 8 of M. intracellulare. Fifteen (78,9%) of these cultures were isolated from the nodular lesions and only 4 (21,0%) from the part without nodules. The present results suggest that the nodular lesion caused by Oesophagostomun radiatum larvae is a predisposing factor for the penetration and multiplication of atypical mycobateria in the intestinal wall. Consequently inespecific allergic reactions to tuberculinization may develop.

Abstract in Portuguese:

Na região sudeste do Brasil foram encontrados nódulos de esofagostomose na mucosa intestinal da porção final do íleo e do ceco em 90% dos bovinos, variando a faixa etária de 1 a 9 anos de idade. O número de nódulos variou de 1 a 53, e o tamanho destes de 1 a 19 mm de diâmetro, tendo a maioria de 2 a 3 mm. Ao corte, os nódulos maiores continham massa caseosa, ressecada de coloração branco-amarelada, às vezes esverdeada. Em alguns foi observada a presença de larva de Oesophagostomum radiatum. A cultura de 400 materiais com nódulos e outros 400 sem, permitiram o isolamento de 42 (5,2%) culturas de micobactérias, sendo 30 (71,4%) oriundas de materiais com nódulos e 12 (28,6%) dos materiais sem nódulos. A identificação das culturas revelou que 23 (54,8%) pertenciam ao grupo IV de Runyon, consideradas saprófitas e 19 (45,2%) se enquadraram nos grupos II e III, consideradas facultativamente patogênicos, sendo 4 culturas Mycobacterium scrofulaceum, 1 do complexo M. terrae e 8 de M. intracellulare. Destas 19 culturas, 15 (78,9%) foram isoladas da porção da mucosa com nódulos e apenas 4 (21,0%) da mucosa sem nódulo. O presente resultado sugere que as larvas de O. radiatum predispõem a penetração e multiplicação de micobactérias atípicas nos nódulos da esofagostomose e, consequentemente, estas provocam sensibilização alérgica inespecífica observada na tuberculização.


#140 - Nonspecific reactions in the diagnosis of bovine tuberculosis with PPD

Abstract in English:

The tuberculin test was performed on 3124 cattle from 24 tuberculosis-free herds from na area between the cities of Rio de Janeiro, São Paulo and Belo Horizonte, using bovine tuberculin PPD containing 5000 IU per dose and avian PPD containing 2500 IU per dose applied intradermically. An incre ase in the thickness of the skin fold equal to or greater than 3mm, independent of local clinical changes were considered positive. The results showed that 305 (9.7%) animals developed non-specific allergic reactions, whose prevalence ranged from 1.1 to 30.4% on all farms tested. The mean increase in the thickness of the skin folds was 4mm, while the mean of the strongest reaction from every farm was 5 .9mm. Tuberculin testing was also performed on 1945 cattle from 13 herds with tuberculosis, revealing 368 (18.9%) reactors and a prevalence range of 6.8 to 89.6%. The mean skin fold increase was 7.5mm, while the mean of the strongest reactions was 19.9mm. Furthermore, it was observed that 79% of the non-specific reactions showed skin fold increases of 34mm, which required the modification of the key for interpreting tuberculin reactions. Increases of up to 1.9mm were considered negative, between 2.0 and 3.9mm suspect, and 4.0mm and above positive, independent of local changes. Increases of 3mm or greater, if accompanied by pain, edema, exudate or local necrosis were considered positive. Simultaneous tuberculin testing is recommended in doubtful cases to rule out or confirm non-specific allergic reactions. When the modified key was applied to the positive reactors from the 24 tuberculosis-free herds, the number was reduced to 64 (2%).

Abstract in Portuguese:

Foram tuberculinizados 24 rebanhos totalizando 3124 bovinos sem tuberculose, nas bacias leiteiras da região entre as cidades do Rio de Janeiro, São Paulo e Belo Horizonte, com tuberculina bovina PPD contendo 5000 UI por dose, aplicada na pele da omoplata. As reações com aumento de espessura da dobra da pele igual ou superior a 3,0 mm, independente de sinais clínicos locais, foram consideradas positivas. O resultado revelou que 305 (9,7%) animais apresentaram reações alérgicas inespecíficas, variando a prevalência de 1,1 a 30,4% por rebanho. O aumento médio da espessura da dobra da pele foi de 4,0 mm e o da média das reações máximas de 5,9 mm. Em 13 rebanhos com tuberculose, o resultado da tuberculinização de 1945 bovinos, revelou 368 (18,9%) animais reagentes com prevalência de 6,8 a 89,6% por rebanho. O aumento médio da espessura da dobra da pele foi de 7 ,5 mm e o da média das reações máximas alcançou 19,9 mm. Em relação às reações inespecíficas, observou-se ainda que 79 ,0% delas apresentavam aumentos entre 3,0 e 4,0 mm, o que levou a alterar a atual chave de interpretação das reações alérgicas da tuberculinização, considerando-se como negativa a reação com aumento até 1,9 mm, suspeita entre 2,0 e 3,9 mm e positiva acima de 4,0 mm, independente de outros sinais clínicos. Reações iguais a 3,0 mm ou maiores, se acompanhadas de dor, edema, exsudato ou necrose local, são consideradas positivas. Em caso de dúvidas, recomenda-se a tuberculinização simultânea para excluir ou confirmar reações alérgicas inespecíficas. Com a aplicação da chave modificada aos animais reagentes dos 24 rebanhos, as reações consideradas positivas ficaram reduzidos a 64 (2%).


Colégio Brasileiro de Patologia Animal SciELO Brasil CAPES CNPQ UNB UFRRJ CFMV