Abstract in English:
Enzootic bovine leukosis (EBL) is an infectious disease caused by bovine leukemia virus (BLV) that affects cattle worldwide. Agar gel immunodiffusion (AGID) was the reference test for EBL diagnosis for many years, but enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed higher sensitivity, was faster to perform, and resulted in an objective reading. However, the importation of ELISA kits is lengthy and expensive, and currently, no AGID kits are available in Brazil. The aim of this work was to standardize an indirect ELISA (iELISA) for EBL diagnosis using BLV antigens produced in Tadarida brasiliensis lung (Tb1Lu) cells, which are Bovine viral diarrhea virus (BVDV) free, unlike fetal lamb kidney (FLK) cells, currently used for this purpose. Following standardization, iELISA results were compared with those obtained by AGID and the commercial Chekit Leucose-Serum ELISA. Compared to AGID, iELISA had 94,44% sensitivity, 75.68% specificity, 79.10% positive predictive value (PPV) and 93.30% negative predictive value (NPV), with 84% concordance and a Kappa index of 0.699. Compared to the Chekit Leucose-Serum ELISA, iELISA showed 92.60% sensitivity, 87.09% specificity, 90.27% PPV and 90,00% NPV, with 90.27% concordance and a Kappa index of 0.801. Taking into account the high agreement with the traditional tests and the absence of non-specific reactions with BVDV, the developed assay could be used as diagnostic method to control EBL in Brazil.
Abstract in Portuguese:
A leucose enzoótica bovina (LEB) é uma doença infecciosa natural dos bovinos com distribuição mundial causada pelo “bovine leukemia virus” (BLV). A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi considerada por muitos anos o teste de eleição, porém ensaios imunoenzimáticos (ELISA) apresentam sensibilidade mais elevada e leitura mais rápida e objetiva. No entanto, a importação de kits de ELISA é um processo dispendioso e demorado, e atualmente não há kits de IDGA comercialmente disponíveis no Brasil. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi padronizar um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da LEB utilizando antígenos produzidos a partir do cultivo do BLV em linhagem celular Tadarida brasiliensis “lung” (Tb1Lu) livre de “bovine viral diarrhea virus” (BVDV), diferentemente do que acontece com as linhagens “fetal lamb kidney” (FLK) atualmente utilizadas na produção desses antígenos para uso em ensaios sorológicos. Após a padronização do iELISA, os resultados foram comparados com aqueles obtidos por IDGA e pelo ELISA comercial “Chekit Leucose-Serum”. Comparado ao IDGA, o iELISA apresentou 94,44% de sensibilidade, 75,68% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) de 79,1% e valor preditivo negativo (VPN) de 93,3%, com concordância entre os testes de 84% e o índice Kappa 0,699. Quando comparado ao ELISA “Chekit Leucose-Serum”, o iELISA apresentou sensibilidade de 92,6%, especificidade de 87,09%, VPP de 90,27% e VPN de 90%, com concordância de 90,27% e o índice Kappa 0,801. Portanto, devido à alta concordância com os testes tradicionais e ausência da ocorrência de reações inespecíficas com BVDV, o ensaio desenvolvido pode ser utilizado como ferramenta diagnóstica para o controle da LEB no Brasil.
Abstract in English:
Canine melanoma is a frequently-occuring neoplasm in dogs and presents as malignant and highly metastatic in this context, studies that contribute to the understanding of the tumor microenvironment in melanoma include the role of galectins. Galectins are proteins of the family of animal lectins that display carbohydrate recognition domains. Galectin-1 and galectin-3 are associated with neoplastic transformation, neoplastic cell survival, angiogenesis, immune system evasion, and metastasis. The goal of this study was to establish a correlation between expression patterns of galectin-1 and galectin-3 and the different degrees of aggressiveness of canine melanoma, as well as to determine serum concentration of galectin-3 in dogs with melanoma. Galectin-1 and galectin-3 expression was analyzed by immunohistochemistry in 30 canine melanomas, six melanocytomas and nine metastatic lymph nodes from patients whose primary tumors were also processed and analyzed. Serum samples from 30 dogs were collected and galectin-3 concentration was determined by ELISA and compared to the samples of 10 healthy dogs. Canine melanoma samples expressed galectin-1 in the cytoplasm and presented a variable pattern of galectin-3 staining depending on melanoma aggressiveness. We observed a decrease in the percentage of cells with cytoplasmic galectin-3 immunolabeling simultaneous to the increased nuclear staining intensity, while there was also a decrease in the percent frequency of nuclear galectin-3 immunolabeled cells according to progression of melanoma, comparing the least to the most aggressive cases. Dogs with melanoma had increased serum levels of galectin-3 when compared to healthy animals, suggesting its potential biomarker of patients with melanoma.
Abstract in Portuguese:
O melanoma canino é uma neoplasia frequente em cães que apresenta um potencial maligno e metastático. Neste contexto, investigar o microambiente tumoral é fundamental para compreender os mecanismos intercelulares e intracelulares envolvidos no desenvolvimento e progressão da doença. Neste estudo, destacamos as galectinas, proteínas da família das lectinas animais que exibem domínios de reconhecimento à carboidratos; a galectina-1 e a galectina-3 estão associadas a transformação neoplásica, sobrevivência de células neoplásicas, angiogênese, evasão do sistema immune e desenvolvimento de metástases. O objetivo deste estudo foi determinar os padrões de expressão de galectina-1 e galectina-3 em diferentes graus de agressividade do melanoma canino, bem como dosar a concentração sérica de galectina-3 em cães com melanoma e comparar com cães saudáveis. A expressão de galectina-1 e galectina-3 foi analisada em 30 melanomas caninos, seis melanocitomas e nove linfonodos metastáticos. A galectina-3 sérica foi mensurada em 30 cães com melanoma e comparada a 10 cães saudáveis. No melanoma canino a expressão de galectina-1 foi citoplasmática e a expressão de galectina-3 foi variável de acordo com o grau de agressividade. Notou-se uma redução na porcentagem de células com imunomarcação de galectina-3 citoplasmática e um aumento simultâneo da intensidade de imunomarcação nuclear, enquanto houve também uma diminuição na frequência percentual de células com imunomarcação nuclear de acordo com a progressão do melanoma comparando-se os casos menos com os mais agressivos. Cães com melanoma apresentaram níveis séricos aumentados de galectina-3 quando comparados a animais saudáveis, mostrando seu uso potencial como biomarcador em pacientes com melanoma.
Abstract in English:
The present study aimed to evaluate the effects of mesenchymal stem cells derived from canine adipose tissue in the healing process of full-thickness mesh skin grafts in rabbits. The stem cells were collected from young dogs; and, after characterization, remained in cryopreservation, in independent doses containing 2 x 106 cells. The mesh distal limb graft technique was performed in 60 rabbits, divided into three groups, CG (Control Group), GT1 (Intralesional Stem Cell Treated Group), and GT2 (Intravenous Stem Cell Treated Group), containing 20 animals each. After grafting, each group was randomly divided into four subgroups according to euthanasia time 3, 7, 14, and 30 days, containing five animals in each group. Animals of GT1_14, GT1_30, and GT2_14, GT2_30 subgroups received a second dose of xenogeneic cells on the seventh day. Meanwhile, animals from GT1_30 and GT2_30 received the third dose of xenogeneic cells on day 14. The groups treated with xenogeneic stem cells positively affected type III collagen re-epithelialization and deposition, and possibly GT1 had a controlled inflammatory response. However, no effect on angiogenesis. Thus, it was possible to demonstrate tolerance and therapeutic action of mesenchymal stem cells from canine adipose tissue in skin grafts in rabbits.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo teve como principal objetivo avaliar os efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães no processo de cicatrização de autoenxertos de pele de espessura total em malha em coelhos. As células-tronco foram coletadas de cães jovens, após a caracterização estas permaneceram em criopreservação, em doses individuais contendo 2 x 106 células. A técnica de enxerto em malha na região distal do membro foi realizada em 60 coelhos, divididos em três grupos, GC (Grupo Controle), GT1 (Grupo tratado com células-tronco intralesional) e GT2 (Grupo tratado com células-tronco via endovenosa), contendo 20 animais cada. Imediatamente após a enxertia, cada grupo foi dividido aleatoriamente em quatro subgrupos, de acordo com o tempo de eutanásia 3, 7, 14 e 30 dias contendo cinco animais cada. Animais dos subgrupos GT1_14, GT1_30 e GT2_14, GT2_30 receberam uma segunda dose de células xenógenas no sétimo dia. Ademais, animais do GT1_30 e do GT2_30 receberam a terceira dose de células xenógenas no dia 14. Os grupos tratados com células-tronco xenógenas tiveram um efeito positivo na reepitelização e deposição de colágeno tipo III, e possivelmente, o GT1 teve uma resposta inflamatória controlada, entretanto o efeito na angiogênese não foi observado. Dessa forma, foi possível demonstrar que houve tolerância e ação terapêutica das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães em enxertos de pele em coelhos.
Abstract in English:
The central nervous system is vulnerable to complications caused by diabetes. These complications lead to increased oxidative stress in the brain, resulting in damage to the cerebral cortex, among other regions. Insulin and hypoglycemic agents are still the most widely used treatments. However, current research with an experimental model of diabetes suggests the use of antioxidants, such as melatonin. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin may decrease or prevent the effects of diabetes in the frontal cortex of the rat brain. Fifty albino rats were allocated into five groups: GC = rats without diabetes induction, GD = diabetic rats induced by streptozotocin, GDM = streptozotocin-induced and melatonin-treated diabetic rats, GDI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with insulin, GDMI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with melatonin and insulin simultaneously. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg/kg). Insulin (5U/day) was administered subcutaneously and melatonin (10mg/kg) by drinking water; both treatments last days after. We analyzed animals’ weight, the cytokines IL-6 and TNF-α, apoptosis, glycogen, and did morphometry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed that the cerebral cortex of the diabetic animals presented axonal degeneration, reduced number of neurons in the cortex, reduced glycogen, increased IL-6 and TNF-α expression, high apoptotic index, and reduced animal weight and the brain. Treatment with melatonin associated or not with insulin prevented such effects. Thus, we conclude that melatonin associated with insulin may be an alternative for avoiding the impact of diabetes in the brain’s frontal cortex.
Abstract in Portuguese:
O sistema nervoso central é vulnerável a complicações originadas pelo diabetes estresse oxidativo no cérebro e resultando em lesões no córtex cerebral, dentre outras regiões. A insulina e hipoglicemiantes ainda são os tratamentos mais utilizados, entretanto, pesquisas atuais com modelo experimental do diabetes sugerem a utilização de antioxidantes como, por exemplo, a melatonina. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro de ratos. Foram utilizados 50 ratos albinos, divididos em 5 grupos: GC = ratos sem indução ao diabetes, GD = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina, GDM = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina, GDI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com insulina, GDMI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina e insulina simultaneamente. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg). A insulina (5U/dia) foi administrada por via subcutânea e a melatonina (10mg/kg) pela água de beber. Ambos tratamentos foram realizados durante 30 dias após a indução. Foram analisados o peso dos animais, do cerebro, as citocinas IL-6 e TNF-α, apoptose, glicogênio, além da morfometria e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram que o córtex cerebral dos animais diabéticos apresentou degeneração axonal, redução do número de neurônios no córtex, redução do glicogênio, aumento da expressão do IL-6 e TNF-α, elevação do índice apoptótico, além da redução do peso dos animais e do cérebro. O tratamento com melatonina associada ou não a insulina preveniu tais efeitos. Assim, concluímos que a melatonina associada ou não a insulina pode ser uma alternativa na prevenção dos efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro.
Abstract in English:
The present study aimed to evaluate and diagnose pathologies of the reproductive system of slaughtered sheep in slaughterhouses in the state of Bahia since there are few data on the subject as well as it is important to note the diagnosis of these diseases to apply appropriate control and prophylaxis measures. The research was carried out in slaughterhouses in the state of Bahia according to the “Serviço de Inspeção Federal” and “Serviço de Inspeção Estadual” for sheep slaughter. From July 2018 to February 2019, visits and monitoring of 1,072 slaughtered sheep were carried out. The animals came from 22 municipalities in the state of Bahia, aged from six to 18 months. During slaughter, the sheep reproductive systems were sectioned for evisceration and lesion collection. Additionally, epidemiological surveys related to origin, age, and race were obtained. For bacteriological examination, collections were performed with sterile scalpel slides and swabs in Stuart medium sterile tubes and refrigerated in a thermal box. For histopathological analysis, fragments were fixed in 10% formaldehyde and routinely processed for histology, stained with Hematoxylin and Eosin (HE). A study of the sheep’s main pathological changes in slaughterhouses in the state of Bahia was carried out, in which 1.072 genital systems were evaluated, and 211 alterations were identified. The most affected reproductive organs were the ovaries (65.3%), followed by the uterus (29.4%) and uterine tubes (5.3%). In the ovaries, the most frequent lesion was a follicular cyst (34.1%); in the fallopian tubes, the cysts represented 3.3% of the lesions, and in the womb, endometritis was observed in 9% of the animals. Other pathologies identified in the ovaries were: luteinized cyst (2.3%); cystic granulosa cell tumor (0.5%); benign lesion (0.5%); agenesis unilateral (0.5%), in addition to other changes of little clinical significance, such as corpus luteum cysts (11.8%) and paraovarian cysts (15.6%). In the fallopian tubes, hydrosalpinx was observed (1%), as well as adenoma (0.5%), agenesis (0.5%), and cysts (3.3%). Uterine lesions included hydrometra (2.3%); Cystic Endometrial Hyperplasia (CEH), abscess, and pyometra (1.4% each); adenomyosis, womb sera petechiae, and total segmental aplasia (1% each); two pregnant uterus, in early pregnancy, presented pyometra (0.9%), however, no change was observed in the fetuses; and uterine polyp (0.5%). Ectopic pregnancy with fetal maceration (0.5%) was observed; vaginitis occurred in 0.5% of the animals, and endometrial melanosis in 8.5%. The high incidence of follicular cysts and endometritis are characterized as diseases that reduce the reproductive efficiency in herds, causing infertility and economic losses in production.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente trabalho foi avaliar e diagnosticar alterações do sistema reprodutor de ovelhas abatidas em abatedouros frigoríficos no estado da Bahia. A pesquisa foi realizada em abatedouros frigoríficos do estado da Bahia com Serviços de Inspeção Federal e Estadual no abate de ovinos. No período de julho de 2018 a fevereiro de 2019 foram realizadas visitas e acompanhamento do abate de 1.072 ovelhas. Os animais eram provenientes de 22 municípios do estado da Bahia, com idade entre 6 a 18 meses. Durante o abate, na evisceração foram seccionados os sistemas reprodutores das ovelhas para avaliação e coleta das lesões. Adicionalmente foram obtidos inquéritos epidemiológicos relacionados à procedência, idade e raça. Para o exame bacteriológico, as coletas foram realizadas com lâminas de bisturi estéreis e swabs em tubos estéreis com meio Stuart e refrigeradas em caixa térmica. Para análise histopatológica, os fragmentos foram fixados em formol a 10% e processados de forma rotineira para histologia e corados pela hematoxilina e eosina (HE). Entre 1.072 sistemas genitais avaliados, identificou-se 211 alterações. Os órgãos do sistema reprodutor mais acometidos foram os ovários (65,3%), útero (29,4%) e tubas uterinas (5,3%). Nos ovários, a lesão mais frequente foi o cisto folicular (34,1%); no útero a endometrite (9%) e nas tubas uterinas, os cistos representaram (3,3%). Outras lesões identificadas nos ovários foram: cisto luteinizado (2,3%); tumor de células da granulosa (0,5%); adenoma (0,5%); agenesia unilateral (0,5%), além de outras alterações de pouco significado clínico, como cistos paraovarianos (15,6%) e corpo lúteo cístico (11,8%). Nas tubas uterinas observou-se, além dos cistos tubo-ovarianos (3,3%), hidrossalpinge (1%), adenoma (0,5%) e agenesia (0,5%). As lesões uterinas foram endometrite (9%), hidrometra (2,3%); hiperplasia endometrial cística, abscesso e piometra (1,4% cada); adenomiose, petéquias na serosa do útero e aplasia segmentar (1% cada); dois úteros gravídicos, em início de gestação, apresentaram piometra (0,9%), porém os fetos não apresentaram alterações; e pólipo uterino (0,5%). Observou-se uma gestação ectópica com maceração fetal (0,5%); a vaginite ocorreu em 0,5%, e melanose endometrial em 8,5%. Destaca-se a elevada incidência de cistos foliculares e endometrite que são doenças que reduzem a eficiência reprodutiva dos rebanhos, provocando infertilidade e perdas econômicas na produção.
Abstract in English:
Studies on biochemical constituents and hydration of horses in training or competitions are essential for the knowledge of their adaptive physiological and metabolic responses to the type of exercise inherent to the sport. The present research evaluated the effects of exercise on hydric status and physiologic and biochemical profiles in Quarter Horses during a barrel race training session. The design consisted of three evaluation times (T): at rest, before the start of physical activity (T0); immediately after a 10-minute warm-up trot and then running the barrel race courses twice with a 10-minute interval (T1); and after one hour’s rest after the second course (T2). The parameters analyzed were: heart rate (HR), respiratory rate (RR), body temperature (BT) and mucose color; the capillary refill time (CRT), packed cell volume (PCV), total plasma proteins (TPP), serum creatinine (CRE) and blood urea nitrogen (BUN) were evaluated and used to infer water status; plasma osmolarity (Osm) was measured; the electrolytes sodium (Na), potassium (K), chloride (Cl), total calcium (tCa), total magnesium (tMg) and phosphorus (P), plasma glucose (Glu) and lactate (Lac) and the muscle enzymes creattine kinase (CK) and aspartate aminotransferase (AST) completed the evaluated parameters. The data for the variables studied were submitted to ANOVA and the Tukey test at 5% probability. After exercise (in T1), HR, RR, BT, PCV, TPP, Glu, Lac, Cre increased (P<0.05), there was also increase in phosphorus and decrease in K (P<0.05), but there was no hypophosphatemia and hipokalemia, respectively. After rest (in T2), only glucose returned to baseline levels (T0) and, with lower mean values, HR, RR, BT, PCV, K and Lac did not return to baseline levels (T0), while P decreased (P<0.05). Osm, BUN, Na, Cl, tCa, tMg, CK and AST did not change between times (P>0.05). It was concluded that the maximum intensity exercise performed on two barrel race courses caused mild hemoconcentration, did not changed plasma osmolality or concentrations of important electrolytes and muscle enzymes of horses, but caused hyperlactatemia without the plasma lactate concentrations being fully recomposed after resting.
Abstract in Portuguese:
O perfil bioquímico e o status de hidratação de equinos em treinamentos ou competições fornecem dados importantes das suas respostas fisiológicas e metabólicas em relação ao tipo específico de exercício em uma modalidade esportiva. No presente estudo, o status hídrico e o perfil fisiológico-bioquímico de equinos foram avaliados durante treinamento de três tambores, em três tempos (T): em repouso, antes do início da atividade física (T0); imediatamente após 10 minutos de aquecimento ao trote seguido de duas corridas na pista de tambor, intervaladas em 10 minutos (T1); e após uma hora de descanso do segundo percurso (T2). Os parâmetros avaliados foram: frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR), temperatura corporal (BT) e cor da mucosa; o tempo de enchimento capilar (TEC), volume globular ou hematócrito (VG), proteínas plasmáticas totais (TPP), creatinina sérica (Cre) e a ureia (Ure) foram avaliados e utilizados para inferir o estado hídrico dos animais; a osmolaridade plasmática (Osm) também foi mensurada; as concentrações dos eletrólitos sódio (Na), potássio (K), cloreto (Cl), cálcio total (tCa), magnésio total (tMg) e fósforo (P), e das enzimas musculares foram mensurados no soro, e as de glicose (Gli) e lactato (Lac) no plasma. Os dados das variáveis estudadas foram submetidos à ANOVA e ao teste de Tukey a 5% de probabilidade. Após o exercício (T1), a FC, FR, TC, VG, TPP, Gli, Lac, Cre aumentaram. O P também aumentou (P<0,05), mas não alcançou nível de hiperfosfatemia, e o K diminuiu (P<0,05), mas não ao nível de hipocalemia. Embora com médias menores, a FC, FR, TC, VG, K e o Lac não retornaram aos níveis basais (T0) após o repouso (T2), apenas a Gli, enquanto o fósforo diminuiu (P<0,05). A Osm, ureia, Na, Cl, tCa, tMg, CK e AST não variaram entre os tempos (P>0,05). Concluiu-se que, o exercício de intensidade máxima realizado em dois percursos de três tambores causou leve hemoconcentração, não alterou a osmolaridade plasmática nem importantes concentrações de eletrólitos e de enzimas musculares dos equinos, porém, causou hiperlactatemia, sem completa recomposição da concentração do lactato após uma hora de descanso.
Abstract in English:
Chronic kidney disease (CKD) is characterized by irreversible morphostructural lesions that can progressively evolve to chronic renal insufficiency and kidney failure. It is known that the heart and kidneys are closely related, and that communication between these organs occurs through a variety of pathways; subtle physiological changes in one of them are compensated by the other. Histopathological cardiac evaluation through routine staining presents a limitation to identify specific or discreet lesions in the cardiomyocytes. This study aimed to evaluate serum troponin levels in cats with CKD, associated with clinical and pathological findings, as well as to correlate the morphostructural cardiac lesions to determine their distribution through macroscopic and histological assessments and anti-cardiac troponin C (cTnC) immunohistochemistry (IHC). To this end, 20 cats (18 diagnosed with CKD and two controls) were selected. Anti-human cTnC IHC was conducted after necropsy and separation in eight regions of each collected heart. Heart fragments from two cats without CKD were used as controls. The anti-human cTnC antibody is useful in detecting cardiac lesions and has shown decreased expression in cardiomyocytes of cats with CKD. Serum troponin was above the reference values in 11/18 (61.11%) animals and decreased expression for the cTnC antibody was observed in individual cardiomyocytes in 9/18 (50%) animals. It was verified that the number of regions with decreased expression for the cTnC antibody in cardiomyocytes is significantly correlated with serum troponin. The anti-human cTnC antibody has been found effective in detecting cardiac lesions and has shown decreased expression in the cardiomyocytes of cats with CKD. Correlation was observed between increased serum cTnI and loss of immunoreactivity at anti-cTnC antibody IHC in cats with CKD, which proves damage to cardiomyocytes secondary to kidney disease.
Abstract in Portuguese:
A doença renal crônica (DRC) é caracterizada por lesões morfoestruturais irreversíveis, que podem evoluir progressivamente para insuficiência renal crônica e falência renal. Sabe-se que o coração e os rins mantêm estreita relação e a comunicação entre esses órgãos ocorre por uma variedade de vias; alterações fisiológicas sutis em um desses órgãos são compensadas pelo outro. A avaliação histopatológica cardíaca mediante a colorações rotineiras são limitadas para identificar lesões específicas ou discretas em cardiomiócitos. O presente trabalho teve como objetivos avaliar os níveis séricos de troponina em gatos com DRC, associados aos achados clínico-patológicos, bem como correlacionar as lesões cardíacas morfoestruturais, a fim de determinar a distribuição destas, por meio da avaliação macroscópica, histológica e imuno-histoquímica com anti-cTnC. Neste estudo foram selecionados 20 gatos (18 diagnosticados com DRC e 2 animais controle). Para a aplicação da técnica de imuno-histoquímica anti-troponina C humana, necropsias foram realizadas e cada coração coletado separadamente em 8 regiões. Fragmentos do coração de 2 gatos sem lesão cardíaca foram utilizados como controle. O anticorpo anti-TnC humano é útil na detecção de lesões cardíacas e apresentou expressão diminuída em cardiomiócitos de gatos com DRC. Em 11/18 animais (61,11%) a troponina sérica encontrava-se acima dos valores de referência e foram observadas diminuição da expressão para anticorpo-cTnC em cardiomiócitos individuais em 9/18 (50%). Notou-se que o número de regiões com diminuição da expressão para anticorpo-cTnC em cardiomiócitos está significativamente correlacionado com a troponina sérica. O anticorpo anti-TnC humano se mostrou eficaz para detectar lesões cardíacas e demonstrou diminuição da expressão nos cardiomiócitos de gatos com DRC. Houve correlação entre o aumento da CTnI sérica e perda da imunorretividade na avaliação imuno-histoquímica com anticorpo anti-TnC em gatos com DRC o que comprova danos em cardiomiócitos secundários a doença renal.
Abstract in English:
Awareness of the physiological changes that occur when animals are subjected to climatic changes that are considered stressful is essential to maintain animal welfare and to be able to exploit their reproductive potential efficiently and rationally. The present study was carried out to evaluate climatic variables’ influence on physiological parameters, and Murrah buffalo ejaculates reared in a humid tropical climate in the Amazon. The immediate analyzes pertinent to the physical and morphological characteristics of the ejaculates were carried out and corresponded in the rainy season (RS) volume of 3.4±2.0mL; the mass activity of 4.4±0.5; motility of 80.4±5.6%; vigor of 4.4±0.4; concentration of 657,300±237,865.1 x 106sptz/mL; major defects of 9.0±2.6%; minor defects of 11.2±3.9%; total defects 20.2±5.3% and sperm plasma membrane integrity (SPMI) 84.8±5.6%, whereas in the non-rainy season (nRS), the results were 4.0±2.1mL; the mass activity of 3.0±1.0; motility of 56.2±13.4%; vigor of 3.0±1.0; concentration of 586,000±291,925.9 x 106sptz/mL; major defects of 20.8±9.9%; minor defects of 27.5±6.3%; total defects 48.3±9.3% and SPMI of 57.9±12.4%. Furthermore, a statistical difference (P<0.05) was observed for the parameters mass activity, motility, vigor, major defects, minor defects, total defects, and sperm plasma membrane integrity between both periods. The data on heart frequency, superficial temperature (head, back, groin, and scrotal pouch) showed a statistical difference between both periods (P<0.05). To conclude is necessary specific management in the non-rainy season that thermal stress is not a determining factor in reducing the reproductive quality of buffaloes; it is necessary to use means to improve animal welfare; one alternative is to use baths regularly for these animals or provide constant access to areas of rivers or lakes, as well as shading, preventing the buffaloes from being directly exposed to the unfavorable thermal environment.
Abstract in Portuguese:
O conhecimento das alterações fisiológicas que ocorrem quando os animais são submetidos a alterações climatológicas consideradas estressantes é fundamental para manter o bem-estar animal, e poder explorar o seu potencial reprodutivo de forma eficiente e racional. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a influência de variáveis climáticas sobre parâmetros fisiológicos e de ejaculados de búfalos, da raça Murrah, criados em clima tropical úmido da Amazônia. As análises imediatas pertinentes às características físicas e morfológicas dos ejaculados foram realizadas e corresponderam no período chuvoso (PCh) o volume de 3,4±2,0mL, turbilhonamento de 4,4±0,5; motilidade de 80,4±5,6%; vigor de 4,4±0,4; concentração de 657.300±237.865,1 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 9,0±2,6%; defeitos menores de 11,2±3,9%; defeitos totais de 20,2±5,3% e integridade da membrana plasmática (IMP) de 84,8±5,6%, enquanto que no período não chuvoso (PnCh), os resultados foram de 4,0±2,1mL; turbilhonamento de 3,0±1,0; motilidade de 56,2±13,4%; vigor de 3,0±1,0; concentração de 586.000±291.925,9 x 106sptz/mL; defeitos maiores de 20,8±9,9%; defeitos menores de 27,5±6,3%; defeitos totais de 48,3±9,3% e IMP de 57,9±12,4%. Observou-se diferença estatística (P<0,05) para os parâmetros movimento de massa, motilidade, vigor, defeitos maiores, defeitos menores, defeitos totais e integridade da membrana plasmática entre os dois períodos. Dados de frequência cardíaca, temperatura superficial (cabeça, dorso, virilha e bolsa escrotal) diferiram estatisticamente entre os períodos (P<0,05). Conclui-se que se faz necessário usar de um manejo específico no período não chuvoso para que o estresse térmico não seja um fator determinante na redução da qualidade reprodutiva dos búfalos, para isto se faz necessário utilizar de meios para melhorar o bem-estar animal, sendo uma das alternativas fazer uso de banhos regularmente para estes animais, ou disponibilizar acesso constante destes a áreas de rios ou lagos, assim como sombreamentos, evitando que os búfalos fiquem expostos diretamente ao ambiente térmico desfavorável.
Abstract in English:
Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT-Cloning) is a promising technique in many areas and is based on genetically identical individuals. However, its efficiency is low. Studies suggest that the leading cause is inadequate epigenetic reprogramming. This study aimed to characterize the methylation pattern of the exon 10 regions of the IGF2 gene and the Imprinting Control Region (ICR) of the H19 gene in the placenta of cloned calves. For this study, female and male cloned calves presenting different phenotypes were used. Genomic DNA from these animals’ placenta was isolated, then treated with sodium bisulfite and amplified to the ICR/H19 and IGF2 loci. PCR products were cloned into competent bacteria and finally sequenced. A significant difference was found between controls and clones with healthy phenotypes for the ICR/H19 region. In this region, controls showed a hemimethylated pattern, as predicted in the literature due to this region has an imprinted control, while clones were showed less methylated. For the IGF2, no significant differences were found between controls and clones. These results suggest that different genomic regions in the genome may be independently reprogrammed and that failures in reprogramming the DNA methylation patterns of imprinted genes may be one of the causes of the low efficiency of SCNT.
Abstract in Portuguese:
A Transferência Nuclear de Células Somáticas (TNCS-Clonagem) é uma técnica promissora em várias áreas, e se baseia na produção de indivíduos geneticamente idênticos. No entanto, sua eficiência é baixa. Estudos sugerem que a principal causa seja uma reprogramação epigenética inadequada. O objetivo desse trabalho é caracterizar o padrão de metilação da região éxon 10 do gene IGF2 e da Região Controladora de Imprinting (ICR) do gene H19 na placenta de bezerros clonados. Para a execução do trabalho foram selecionados clones bovinos fêmeas e machos, apresentando diferentes fenótipos. O DNA da placenta desses animais foi extraído, e em seguida foi tratado com bissulfito de sódio e amplificado para os loci ICR/H19 e IGF2. Os produtos da PCR foram clonados em bactérias competentes e, por fim, sequenciados. Foi encontrada uma diferença significativa entre os controles e os clones com fenótipos saudáveis para a região da ICR/H19. Nesta região, os controles tiveram um padrão hemimetilado, como previsto pela literatura, devido essa região ser imprinted. Enquanto os clones encontravam-se menos metilados. Para a região do éxon 10 do IGF2, não foi encontrada diferença significativa entre controles e clones. Estes resultados sugerem que as diferentes regiões do genoma podem se reprogramar independente umas das outras e que falhas na reprogramação do padrão de metilação do DNA de genes imprinted podem ser uma das causas da baixa eficiência da TNCS.
Abstract in English:
Eimeria infections are common in the sheep industry worldwide. Lambs are more susceptible to coccidiosis, especially in stressful conditions, being infected by different species of the parasite. Eimeria crandallis and Eimeria ovinoidalis are considered the most pathogenic, causing reduced growth, dehydration, anorexia, and death. In this study, the frequency of Eimeria species was evaluated in lambs from the southern region of the Rio Grande do Sul state, Brazil. Fecal samples from 248 lambs, from 19 farms, were tested for the presence of oocysts. The positive samples were re-examined and the sporulated oocysts analyzed morphometrically to identify the presence of Eimeria species. In 100% of the evaluated farms, there were animals positive for the protozoan. The frequency of Eimeria species was: E. ovinoidalis (94.74%), E. crandallis (89.47%), E. granulosa (78.95%), E. parva (68.42%), E. ahsata (63.13%), E. punctata (42.11%), E. bakuensis (36.84%), E. faurei (10.53%), and E. pallida (5.26%). Mixed infection was found in 94.74% of the samples. This research describes, for the first time, the occurrence of E. crandallis and E. ovinoidalis infecting lambs in the study area. The wide distribution of this protozoan and the high frequency of pathogenic species show the importance and potential damage of sheep coccidiosis in herds from Rio Grande do Sul.
Abstract in Portuguese:
As infecções por Eimeria são comuns na ovinocultura mundial. Cordeiros são mais suscetíveis a coccidiose, especialmente em condições estressantes, sendo infectados por diferentes espécies do parasito. Eimeria crandallis e Eimeria ovinoidalis são consideradas as mais patogênicas, causando redução do crescimento, desidratação, anorexia e morte. Neste estudo, a prevalência de Eimeria spp. foi avaliada em cordeiros da região sul do Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Amostras fecais de 248 cordeiros, provenientes de 19 fazendas, foram testadas quanto à presença de oocistos. As amostras positivas foram reexaminadas e os oocistos esporulados analisados morfometricamente para identificação das espécies de Eimeria presentes. Em 100% das fazendas avaliadas houve animais positivos para o protozoário. A frequência das espécies de Eimeria foi: E. ovinoidalis (94.74%), E. crandallis (89.47%), E. granulosa (78.95%), E. parva (68.42%), E. ahsata (63.13%), E. punctata (42.11%), E. bakuensis (36.84%), E. faurei (10.53%) e E. pallida (5.26). Infecção mista foi encontrada em 94.74% das amostras. Este trabalho descreve pela primeira vez a ocorrência de E. crandallis e E. ovinoidalis infectando cordeiros na área de estudo. Este trabalho descreve pela primeira vez a ocorrência de E. crandallis e E. ovinoidalis infectando cordeiros na área de estudo. A ampla distribuição desse protozoário e a alta frequência das espécies patogênicas evidenciam a importância da coccidiose ovina e os danos potenciais nos rebanhos do Rio Grande do Sul.