PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Blanco R.D., Fidelis C.F., Araujo L.S., Henao A.M., Cardona J.A., Guimarães J.D., Vargas M.I. & Patarroyo J.H. 2014. [Development and standardization of Dot-ELISA using recombinant peptides for serological diagnosis of Neospora caninum.] Desenvolvimento e padronização do Dot-ELISA usando peptídeos recombinantes para o diagnóstico sorológico de Neospora caninum. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):723-727. Laboratório de Biologia e Controle de Hematozoários e Vetores, Universidade Federal de Viçosa, Avenida Ph Rolfs, Campus Universitário, Viçosa, MG 36570-000, Brazil. E-mail: rdblama@gmail.com Neosporosis is recognized as a major cause of abortion and neonatal loss in cattle worldwide, both for dairy cattle and beef cattle. In recent years this disease has attracted the interest of researchers and studying the epidemiology and effective methods of diagnosis of this disease. The present study aimed to develop and standardize on a Dot-ELISA for the serological diagnosis of Neospora caninum by using recombinant peptide as antigen for the development of a diagnostic kit used on the field. The recombinant antigen (rNcGRA1) was designed based on the method of reverse genetics derived antigenic epitopes of dense granules protein of N. caninum and synthesized by GenScript (USA). It was produced by the fermentation in yeasts Pichiapastoris KM71. The serological technique was used for the Dot-ELISA detection of IgG specific for N. caninum in which 0.22μm nitrocellulose membranes were sensitized with 1μL of antigen and subsequently the plasmas were diluted in a washing solution and incubated for 1 hour. The results will revealed by the addition of Protein G labeled with peroxidasse for 30 minutes, followed by the developing solution based on 3,3’-Diaminobenzidine (DAB). Soon after standardization tested 44 bovine plasmas were diagnosed by indirect immunofluorescence assay (IFA), agreeing with the results on a 95.5% and a sensitivity and specificity of 100% and 92% respectively. In regard to the diagnostic kit for the Technology Platform Rapid Flow-Through Miriad®, the peptide presented rNcGRA1 visible markings to react with positive plasma, and showed no markings using the negative plasma. This study is the first to use recombinant peptides and prove to be efficient for the serological diagnosis of cattle naturally infected.

• Neosporosis Neospora caninum neosporose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Blanco R.D., Fidelis C.F., Araujo L.S., Henao A.M., Cardona J.A., Guimarães J.D., Vargas M.I. & Patarroyo J.H. 2014. [Development and standardization of Dot-ELISA using recombinant peptides for serological diagnosis of Neospora caninum.] Desenvolvimento e padronização do Dot-ELISA usando peptídeos recombinantes para o diagnóstico sorológico de Neospora caninum. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):723-727. Laboratório de Biologia e Controle de Hematozoários e Vetores, Universidade Federal de Viçosa, Avenida Ph Rolfs, Campus Universitário, Viçosa, MG 36570-000, Brazil. E-mail: rdblama@gmail.com A neosporose é reconhecida como uma das maiores causas de aborto e perdas neonatais em bovinos de leite e corte em todo o mundo. Nos últimos anos esta doença tem atraído o interesse de pesquisadores com foco na epidemiologia e métodos eficazes de diagnóstico desta doença. No presente estudo objetivou-se desenvolver e padronizar um teste Dot-ELISA para o diagnóstico sorológico de Neospora caninum com um peptídeo recombinate como antígeno, visando o desenvolvimento de um kit para diagnóstico a campo. O peptídeo recombinante (rNcGRA1) foi desenhado com base na metodologia de genética reversa de epítopos antigênicos originados de uma proteína de grânulos densos de N. caninum, e sintetizado pela GenScript (USA). Produzido mediante o processo fermentativo em leveduras Pichia pastoris KM71. Para a padronização do Dot-ELISA, membranas de nitrocelulose de 0.22µm foram sensibilizadas com 1µL do antígeno e posteriormente os soros foram diluídos em solução de lavagem e incubados durante 1 hora. A revelação foi feita mediante a adição de Proteína G marcada com peroxidase por 30 minutos, seguido da solução reveladora a base de 3,3’-Diaminobenzidine (DAB). Logo após a padronização foram testados 44 soros bovinos diagnosticados por imunofluorescência indireta (RIFI), obtendo-se uma concordância nos resultados do teste de 95,5% e uma sensibilidade e especificidade de 100% e 92% respectivamente. Quanto ao Kit para diagnóstico a campo na Plataforma Tecnológica RapidFlow-Through Miriad®, o peptídeo rNcGRA1 apresentou marcações visíveis ao reagir com os soros positivos, e não apresentou marcações usando os soros negativos. Este estudo é o primeiro a utilizar peptídeos recombinantes e mostrar-se eficiente para o diagnóstico sorológico de bovinos naturalmente infetados por N. caninum.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Brito R.L.L., Inácio S.V., Oliveira D.A.S., Sousa M.M., Meireles M.V., Lobo R.N.B., Vieira L.S. & Bresciani K.D.S. 2014. [Occurrence of infection by Cryptosporidium spp. in goat kids (Capra hircus).] Ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cabritos (Capra hircus). Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):728-732. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária, Universidade Estadual Paulista, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14884-900, Brazil. E-mail: rolomonte@gmail.com The present study aimed to determine the occurrence of infection by Cryptosporidium spp. in goat kids from Quixadá, Ceará, Brazil. The study included 400 goat kids of both sexes, 3 to 360 days old, with or without defined breed, originating from 25 farms distributed in three circuits. Feces were registered in accordance with the appearance and color, distributed into tubes Eppendorf tubes and frozen in natura at-20°C until the moment of extraction of genomic DNA from the parasite with the aid of a commercial kit. For amplification of fragments of the 18S subunit of ribosomal RNA (rRNA) was used to Nested PCR. The occurrence of Cryptosporidium spp. in goats kids of the Quixadá was 7.50% (30/400). The frequency in the dry period and rainy was 9.55% (19/199) and 5.47% (11/201) respectively (χ2=2.39 and P>0.05). Positive samples were identified in 64.00% (16/25) of the studied farms, and from these samples 50.00% (15/30) and 70.00% (21/30) had feces with normal appearance and color respectively, suggesting that the asymptomatic goats were eliminating oocysts. No positivity for Cryptosporidium spp. was observed in 301 to 360-day-old goats, demonstrating that older animals have less chance to become infected with the parasite.

• Cryptosporidium spp. diarrhea diarreia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Brito R.L.L., Inácio S.V., Oliveira D.A.S., Sousa M.M., Meireles M.V., Lobo R.N.B., Vieira L.S. & Bresciani K.D.S. 2014. [Occurrence of infection by Cryptosporidium spp. in goat kids (Capra hircus).] Ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cabritos (Capra hircus). Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):728-732. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária, Universidade Estadual Paulista, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14884-900, Brazil. E-mail: rolomonte@gmail.com O presente estudo teve como objetivo determinar a ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cabritos de Quixadá, Ceará, Brasil. Participaram do estudo 400 cabritos, com idade entre três e 360 dias, de ambos os sexos, com e sem padrão racial definido, procedentes de 25 estabelecimentos rurais distribuídos em três circuitos. As fezes foram cadastradas de acordo com o aspecto e cor, distribuídas em tubos tipo “eppendorf®” e congeladas in natura a -20°C, até o momento das extrações de DNA genômico do parasito com auxílio de kit comercial. Para amplificação de fragmentos da subunidade 18S do RNA ribossômico (rRNA) foi utilizada a “Nested”-PCR. A ocorrência de Cryptosporidium spp em cabritos de Quixadá foi de 7,50% (30/400). A frequência no período seco e no chuvoso foi de 9,55% (19/199) e 5,47% (11/201), respectivamente (χ2=2,39 e P>0,05). Amostras positivas foram identificadas em 64,00% (16/25) das propriedades estudadas e dessas amostras 50,00% (15/30) e 70,00% (21/30) tinham as fezes com aspecto e cor normais, respectivamente, sugerindo que cabritos assintomáticos estão eliminando oocistos. Não foi observada positividade para Cryptosporidium spp. em animais com 301 a 360 dias, demonstrando que animais mais velhos apresentam menos possibilidade de se infectarem com o parasito.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Vargas Jr S.F., Marcolongo-Pereira C., Adrien M.L., Fiss L., Molarinho K.R., Soares M.P., Schild A.L. & Sallis E.S.V. 2014. [Outbreak of cryptosporidiosis in calves in Southern Brazil.] Surto de criptosporidiose em bezerros no Sul do Rio Grande do Sul. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):749-752. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: esvsallis@yahoo.com.br This paper describes the epidemiology, clinical signs and pathology of an outbreak of cryptosporidiosis in calves in Southern Brazil. Thirty-five out of 400 calves with 30-45 days of age were affected and 16 died. The calves were born weak and just after birth they had yellow diarrhea, weight loss, dehydration, depression, and death between 10 and 15 days after onset of clinical signs. Congestion of the bowel and mesenteric blood vessels were observed at necropsy. Intestinal distension by gas and dilation of lymphatic vessels were also observed. Microscopically, the intestine showed flattening of the villi with necrosis and atrophy. Adhered to the surface of the villus epithelial cells there were round basophilic structures of 2- to 5-μm-diameter compatible with Cryptosporidium spp. Electron microscopy revealed the presence of different stages of the agent adhered to the microvilli of enterocytes. We alert the importance of cryptosporidiosis as a primary agent of diarrhea in calves. Preventive measures to reduce economic losses, environmental contamination, and also decrease of risk for public health are necessary.

• Cryptosporidiosis Cryptosporidium spp. diarrhea criptosporidiose diarreia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Vargas Jr S.F., Marcolongo-Pereira C., Adrien M.L., Fiss L., Molarinho K.R., Soares M.P., Schild A.L. & Sallis E.S.V. 2014. [Outbreak of cryptosporidiosis in calves in Southern Brazil.] Surto de criptosporidiose em bezerros no Sul do Rio Grande do Sul. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):749-752. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: esvsallis@yahoo.com.br Descrevem-se os aspectos epidemiológicos, sinais clínicos e a patologia de um surto de criptosporidiose em bezerros na região Sul do Rio Grande do Sul. De um lote de 400 bezerros de 30-45 dias de idade, 35 adoeceram e 16 morreram. Os bezerros nasciam fracos e logo após o nascimento apresentavam diarreia amarela, emagrecimento progressivo, desidratação, depressão e morte entre 10 e 15 dias após o início dos sinais clínicos. Na necropsia havia congestão dos vasos sanguíneos intestinais e mesentéricos. Havia distensão intestinal por gás e dilatação de vasos linfáticos. Microscopicamente havia achatamento das vilosidades intestinais, com necrose e atrofia. Aderidas à superfície das células epiteliais das vilosidades, havia estruturas puntiformes basofílicas de 2-5µm de diâmetro compatíveis com Cryptosporidium spp. A microscopia eletrônica revelou a presença de diferentes estágios do agente aderidos às microvilosidades de enterócitos. Alerta-se para a importância da criptosporidiose como agente primário de diarreia em bezerros. São necessárias medidas preventivas no que se refere ao manejo para diminuir as perdas econômicas e a contaminação ambiental, e, ainda, diminuir o risco para a saúde pública.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Tucci E.C., Soares N.M., Faccini J.L.H. & Vilas Boas D. 2014. Additional information about an outbreak by Allopsoroptoides galli (Acari: Psoroptoididae) in commercial laying hens in the state of São Paulo, Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):760-762. Laboratório de Parasitologia, Instituto Biológico, Av. Conselheiro Rodrigues Alves 1252, São Paulo, SP 04014-002, Brazil. E-mail: tucci@biologico.sp.gov.br This paper reports additional information about a mange outbreak by the mite Allopsoroptoides galli in a commercial egg-laying hen facility in the state of São Paulo, Brazil. About half of the 76,000 multi-age birds of the flock were affected. Experimental infestations carried out on naive hens resulted in clinical signs similar to those diagnosed in naturally infested hens, such as generalized scaly dermatitis, presence of mucus-like material and yellowish crusts on the skin and around the calami, feather loss and strong unpleasant odor. About 30% drop of egg production was estimated. The possible source of infestation were wild birds identified on the ground and roofs of the sheds.

• Mange Allopsoroptoides galli Acari dermatitis sarna dermatite

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Tucci E.C., Soares N.M., Faccini J.L.H. & Vilas Boas D. 2014. Additional information about an outbreak by Allopsoroptoides galli (Acari: Psoroptoididae) in commercial laying hens in the state of São Paulo, Brazil. [Informação adicional sobre um surto de sarna causado por Allopsoroptoides galli (Acari: Psoroptoididae) em uma granja de poedeiras no Estado de São Paulo.] Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):760-762. Laboratório de Parasitologia, Instituto Biológico, Av. Conselheiro Rodrigues Alves 1252, São Paulo, SP 04014-002, Brazil. E-mail: tucci@biologico.sp.gov.br Este artigo acrescenta informações adicionais sobre um surto de sarna causado por Allopsoroptoides galli em uma instalação comercial de galinhas de postura no estado de São Paulo, Brasil. Approximadamente metade das 76.000 aves, com várias idades, mantidas em uma granja, foram infestadas. Um total de 12 galinhas sem prévio contato com os ácaros e infestadas experimentalmente apresentaram sinais clínicos semelhantes aos diagnosticados em galinhas naturalmente infestadas, tais como dermatite escamosa generalizada, presença de material mucoso, crostas amareladas na pele e em torno dos câlamos, perda de penas e forte odor desagradável. A perda na produçãode ovos foi estimada em 30%. As possíveis fontes de infestação foram aves silvestres observadas no chão próximo aos galpões e telhados.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Tessele B., Martins T.B., Vielmo A. & Barros C.S.L. 2014. [Granulomatous lesions found in cattle slaughtered for meat production.] Lesões granulomatosas encontradas em bovinos abatidos para consumo. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):763-769. Departamento de Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, Camobi, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: claudioslbarros@uol.com.br In order to help professionals of veterinary medicine in recognizing bovine lesions found during meat inspection at slaughterhouses, three granulomatous conditions of cattle were researched and their morphological similarities and differences were assessed. These three granulomatous conditions were actinobacillosis (caused by Actinobacillus lignieresii), actinomycosis (caused by Actinomyces bovis) and staphylococcal mastitis (caused by Staphylococcus aureus). Out of 505 lesions found in cattle slaughtered for human consumption, 40 were one of the three granulomatous conditions: 24 were actinobacillosis, 10 were actinomycosis and six were staphylococcal mastitis. Overall the gross and histological features of these three diseases are quite similar but their location helps give away the etiology. A. lignieresii affected soft tissues, mainly those of tongue and lymph nodes of the head region; A. bovis affected bone tissue mainly that of the mandible; and S. aureus main targeted tissue was the mammary gland. Histologically the granuloma resulting from the infection with either one of these three causal agents contained centrally located amorphous, eosinophilic, club like structures surrounded by viable and dead neutrophils. These were surrounded by a mantle of epithelioid macrophages and occasional multinucleated giant cells. These macrophage mantles were irregularly infiltrate by lymphocytes and plasma cells which tended to accumulate to the periphery of the lesion which, in turn, was fenced by a fibrous connective capsule. Given the employment of adequate techniques the causative the agent could be seen within or surrounding the clublike structures in each the three types of granulomatous lesions. In the case of staphylococcal mastitis, intralesional cocci were observed both in HE and Gram stained preparations, in the latter as gram-positive cocci. The agent in actinobacillosis (gram-negative bacilli) and actinomycosis (gram-positive bacilli) could only be observed in Gram stained preparations. The differential diagnosis for these lesions is included in the discussion of this paper.

• Granulomas Actinobacillus lignieresii Actinomyces bovis Staphylococcus aureus

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Tessele B., Martins T.B., Vielmo A. & Barros C.S.L. 2014. [Granulomatous lesions found in cattle slaughtered for meat production.] Lesões granulomatosas encontradas em bovinos abatidos para consumo. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):763-769. Departamento de Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, Camobi, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: claudioslbarros@uol.com.br Com o objetivo auxiliar profissionais médico-veterinários no reconhecimento das lesões de bovinos encontradas na linha de inspeção de carnes em matadouros frigoríficos, três condições granulomatosas de bovinos foram pesquisadas e suas semelhanças e diferenças avaliadas. Essas três condições granulomatosas foram actinobacilose (causada por Actinobacillus lignieresii), actinomicose (causada por Actinomyces bovis) e mastite estafilocócica (causada por Staphylococcus aureus). Em 505 lesões encontradas em bovinos abatidos para consumo humano, 40 eram uma dessas três lesões granulomatosas: 24 eram actinobacilose, 10 eram actinomicose e seis eram mastite estafilocócica. De um modo geral, os aspectos macro e microscópicos dessas três lesões eram bastante semelhantes, mas suas localizações ajudavam a presumir sua etiologia. A. lignieresii afetou tecidos moles, principalmente língua e linfonodos da cabeça; A. bovis afetou o tecido ósseo, principalmente o da mandíbula; e S. aureus teve a glândula mamária como o tecido alvo. Histologicamente, os granulomas resultantes da infecção por qualquer um desses três agentes continham uma estrutura amorfa, eosinofílica, com clavas irradiadas, localizada centralmente; essa estrutura era rodeada por neutrófilos íntegros e degenerados, que, por sua vez, eram cercados por um manto de macrófagos epitelioides e ocasionais células gigantes multinucleadas. Esses mantos de macrófagos eram irregularmente infiltrados por linfócitos e plasmócitos que tendiam a se acumular na periferia da lesão, que era cercada por uma cápsula de tecido conjuntivo. Dependendo da aplicação do método de coloração adequado, o agente etiológico podia ser visto em cada um dos três tipos de lesão granulomatosa. No caso da mastite estafilocócica, cocos intralesionais foram observados tanto nas colorações por HE como nas de Gram, nessa última como cocos gram-positivos. O agente da actinobacilose (bacilos gram-negativos) e da actinomicose (bacilos gram-positivos) pôde ser observado somente nas colorações de Gram. Os diagnósticos diferenciais para essas três condições são discutidos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Oliveira J.O., Nascimento I.A., Ribeiro V.O., Cortes L.A., Fernandes R.D., Santos L.C., Moraes W. & Cubas Z.S. 2014. Hematological values for captive harpy eagle (Harpia harpyja) at the wild animal breeding center of Itaipu Binacional. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):805-809. Protected Areas Division, Itaipu Binacional, Av. Tancredo Neves 6731, Foz do Iguaçu, PR 85866-900, Brazil. E-mail: marcosjo@itaipu.gov.br Decreasing of harpy eagle (Harpia harpyja) populations in natural environments, mainly in non-preserved areas, makes captive population management an important contribution to genetic diversity conservation. The aim of this study is to evaluate hematological parameters for captive harpy eagles maintained at the wild animals breeding center of Itaipu Binacional, Paraná State, Brazil. Fourteen blood samples from nine harpy eagles were collected from animals of both sexes, of different ages and with no clinical signs of disease. Significant variations were found in haematological values of hematocrit, hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), leukocyte, a relative number of heterophils, absolute and relative number of lymphocytes, monocytes, eosinophils, basophils and plasma protein between groups of young (less than six months old) and adult birds. Comparing males and females there was variation in the values of erythrocytes, hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) on heterophils, absolute and relative number of lymphocytes, eosinophils and basophils. There was also variation in the values of red blood cells, hematocrit, hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), leukocyte count, absolute number of lymphocytes, eosinophils and basophils among birds that study compared to another reference birds. Due to the limited information available on harpy eagle hematology, this study will be useful to the clinical assessment of birds maintained in captivity.

• Hematology harpy eagle Harpia harpyja hematologia águia harpia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Oliveira J.O., Nascimento I.A., Ribeiro V.O., Cortes L.A., Fernandes R.D., Santos L.C., Moraes W. & Cubas Z.S. 2014. Hematological values for captive harpy eagle (Harpia harpyja) at the wild animal breeding center of Itaipu Binacional. [Valores hematológicos para águia hapia (Harpia harpyja) em cativeiro.] Pesquisa Veterinária Brasileira 34(8):805-809. Protected Areas Division, Itaipu Binacional, Av. Tancredo Neves 6731, Foz do Iguaçu, PR 85866-900, Brazil. E-mail: marcosjo@itaipu.gov.br A diminuição de populações de harpia (Harpia harpyja) em ambientes naturais, principalmente em áreas não preservadas, torna a gestão população cativa uma contribuição importante para a conservação da diversidade genética. O objetivo deste estudo é avaliar os parâmetros hematológicos de harpias em cativeiro mantidas para os animais selvagens de reprodução centro da Itaipu Binacional, Paraná, Brasil. Quatorze amostras de sangue de nove harpias foram coletadas de animais de ambos os sexos, de diferentes idades e sem sinais clínicos da doença. Variações significativas foram encontradas nos valores hematológicos de hematócrito, hemoglobina, hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), de leucócitos, um número relativo de heterófilos, absoluta e número relativo de linfócitos, monócitos, eosinófilos, basófilos e proteínas plasmáticas entre grupos de jovens (menos de seis meses de idade) e adultos aves. Comparando homens e mulheres houve variação nos valores de eritrócitos, hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) em heterófilos, o número absoluto e relativo de linfócitos, eosinófilos e basófilos. Houve também variação nos valores de células vermelhas do sangue, hematócrito, hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), contagem de leucócitos, número absoluto de linfócitos, eosinófilos e basófilos entre aves que estudam em comparação com outras aves de referência. Devido à pouca informação disponível sobre hematologia harpia, este estudo será útil para a avaliação clínica das aves mantidas em cativeiro.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Brandão L.N.S., Pitchenin L.C., Maruyama F.H., Chitarra C.S., Silva G.F.R., Klein C., Nakazato L. & Dutra V. 2014. [Standardization of unmodified gold nanoparticle (AuNPs) for detection of Actinobacillus pleuropneumoniae in swine lungs.] Padronização da técnica de nanopartícula de ouro não modificada (AuNPs) para detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae em pulmões de suínos. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):621-625. Laboratório de Microbiologia e Biologia Molecular, Universidade Federal do Mato Grosso, Av. Fernando Corrêa da Costa2367, Bairro Boa Esperança, Cuiabá, MT 78060-900, Brazil. E-mail: valdutra@ufmt.br Based on diagnostic tests for the detection of nucleic acids without amplification through the use of gold nanoparticles (AuNPs) have been described for various diseases. This study aimed to develop a technique of unmodified AuNPs to detect Actinobacillus pleuropneumoniae (App). We used 70 lung samples from pigs, 17 with and 53 without characteristic lesions of pneumonia, to detect App. The primer used was based on ApxIV gene. The AuNPs test had a sensitivity of 93.8% and specificity of 84.6% when compared with PCR detection. The results showed good agreement between AuNPs and PCR testing, and the technique can be used as an alternative to conventional tests, since it is quick and easy, and does not require implementation infrastructure and skilled labor.

• Pneumonia gold nanoparticle Actinobacillus pleuropneumoniae pneumonia suína nanopartícula de ouro

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Brandão L.N.S., Pitchenin L.C., Maruyama F.H., Chitarra C.S., Silva G.F.R., Klein C., Nakazato L. & Dutra V. 2014. [Standardization of unmodified gold nanoparticle (AuNPs) for detection of Actinobacillus pleuropneumoniae in swine lungs.] Padronização da técnica de nanopartícula de ouro não modificada (AuNPs) para detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae em pulmões de suínos. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):621-625. Laboratório de Microbiologia e Biologia Molecular, Universidade Federal do Mato Grosso, Av. Fernando Corrêa da Costa2367, Bairro Boa Esperança, Cuiabá, MT 78060-900, Brazil. E-mail: valdutra@ufmt.br Testes diagnósticos baseados na detecção de ácidos nucleicos sem amplificação prévia através da utilização de nanopartículas de ouro (AuNPs) têm sido descritos para várias enfermidades. Este trabalho teve como objetivo desenvolver uma técnica de AuNPs não modificada para detecção de Actinobacillus pleuropneumoniae (App). Utilizaram-se 70 amostras de pulmão de suínos, 17 sem lesão e 53 com lesões características de pneumonia, objetivando a detecção de App. O oligonucleotídeo utilizado foi baseado no gene ApxIV. O teste de AuNPs apresentou sensibilidade de 93,8% e especificidade de 84,6% quando comparado com a detecção pela PCR. Os resultados mostraram boa concordância entre os testes de AuNPs e a PCR, sendo que a técnica pode ser utilizada como alternativa aos testes convencionais, já que é de fácil e rápida execução e não exige infraestrutura e mão de obra especializada.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Santos B.L., Marcolongo-Pereira C., Stigger A.L., Coelho A.C.B., Soares M.P., Sallis E.S.V., Barreto F. & Schild A.L. 2014. [Misuse of organophosphate: potential risk to cattle in Southern Brazil.] Uso inadequado de organofosforados: uma prática de risco para bovinos no Sul do Rio Grande do Sul. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):655-658. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brasil. E-mail: alschild@terra.com.br In order to determine the cause of the sudden increase in the number of outbreaks of organophosphate poisoning, nine outbreaks diagnosed in cattle were analyzed at the Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas (LRD/UFPel) between November 2013 and February 2014. In all outbreaks the animals were treated with concentration from two to 151 times higher than the concentration recommended of diazinon for tick treatment. The incorrect route of application, and the intense heat recorded at the time of the outbreaks also contributed to the large number of poisoning.

• Organophosphate diazinon poisoning organofosforados diazinon intoxicação

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Santos B.L., Marcolongo-Pereira C., Stigger A.L., Coelho A.C.B., Soares M.P., Sallis E.S.V., Barreto F. & Schild A.L. 2014. [Misuse of organophosphate: potential risk to cattle in Southern Brazil.] Uso inadequado de organofosforados: uma prática de risco para bovinos no Sul do Rio Grande do Sul. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):655-658. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brasil. E-mail: alschild@terra.com.br Com o objetivo de determinar as causas para o súbito aumento no número de surtos de intoxicação por organofosforados foram analisados nove surtos da intoxicação diagnosticados em bovinos no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD/UFPel) entre novembro de 2013 e fevereiro de 2014. Em todos os surtos os animais foram tratados com concentrações entre duas e 151 vezes maiores que a concentração recomendada de diazinon para banho carrapaticida utilizado nas diferentes propriedades. Contribuíram, ainda, para o grande número de casos de intoxicação a via de adminstração pour on não recomendada para os produtos utilizados e o intenso calor registrado na época de ocorrência dos surtos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Alves D.M., Marcolongo-Pereira C., Tavares L.A., Molarinho K.R., Raffi M.B., Schild A.L. & Sallis E.S.V. 2014. [Cattle in silvipasture system with eucalyptus: a risk for Ramaria flavo-brunnescens poisoning.] Criação de bovinos em sistema silvipastoril com eucalipto: um risco para intoxicação por Ramaria flavo-brunnescens. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):659-662. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: esvsallis@yahoo.com.br The aim of this study was to describe and discuss the epidemiological aspects of spontaneous outbreaks of poisoning by Ramaria flavo-brunnescens in cattle maintained in silvipasture system in Southern Brazil. Three outbreaks of the disease between 2011 and 2013 were diagnosed. In two outbreaks morbidity was 35% and 37.4%, and the mortality rate was 36.12% and 16%, respectively. The fatality rate in these outbreaks was 45.71% and 96.55%. The diagnosis was confirmed by the epidemiology and the presence of the mushroom in the areas where the cattle grazed, in addition to the clinical signs, gross and histological lesions. The climatic data of temperature, humidity and rainfall were statistically analyzed and no significant differences were observed between the years 2007-2013. It was not possible to confirm that the presence of R. flavo-brunnescens in eucalyptus groves is associated with rainy autumns and warm dry summers. It is likely that other factors are associated with the presence of the mushroom in the woods and its toxicity. The soil and type of forest planted may also determine the presence of the mushroom in the area. It is possible that the species of eucalyptus is also a determining factor for the occurrence of the mushroom, since in many eucalyptus forests R. flavo-brunnescens does not occur. The recognition of the mushroom by workers and farmers and the time for its development in the eucalyptus woods is essential to minimize economic losses caused by the poisoning.

• Poisonous plants Ramaria flavo-brunnescens Clavariaceae plant poisoning mycotoxicosis plantas tóxicas intoxicação por plantas micotoxicose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Alves D.M., Marcolongo-Pereira C., Tavares L.A., Molarinho K.R., Raffi M.B., Schild A.L. & Sallis E.S.V. 2014. [Cattle in silvipasture system with eucalyptus: a risk for Ramaria flavo-brunnescens poisoning.] Criação de bovinos em sistema silvipastoril com eucalipto: um risco para intoxicação por Ramaria flavo-brunnescens. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):659-662. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: esvsallis@yahoo.com.br O objetivo deste trabalho foi descrever e discutir os aspectos epidemiológicos de surtos de intoxicação espontânea por Ramaria flavo-brunnescens em bovinos criados em sistema silvippastoril na região sul do Rio Grande do Sul. Foram diagnosticados três surtos da enfermidade entre 2011 e 2013. Em dois surtos a morbidade foi de 35% e 37,4% e a mortalidade foi de 36,12% e 16%, respectivamente. A letalidade nos surtos foi de 45,71% e 96,55%. O diagnóstico foi confirmado pela epidemiologia e presença do cogumelo nas áreas onde os bovinos estavam, além dos sinais clínicos e lesões macroscópicas e histológicas características. Os dados climáticos de temperatura, umidade e precipitação pluviométrica foram analisados estatisticamente; não se observou diferenças de 2007 a 2013. Não foi possível confirmar se a presença de R. flavo-brunnescens nos bosques de eucaliptos está associada a outonos chuvosos e quentes após verões secos. É provável que outros fatores estejam associados à presença do cogumelo nos bosques e à sua toxicidade. A influência do solo e a finalidade da mata plantada podem também, determinar a presença ou não do cogumelo na área. É provável que a espécie de eucalipto seja também um fator determinante para a ocorrência do cogumelo, já que em muitas matas deste gênero o vegetal R. flavo-brunnecens não ocorre. O reconhecimento do cogumelo por trabalhadores e produtores rurais e a época em que o mesmo se desenvolve nos bosques de eucalipto é fundamental para minimizar as perdas econômicas causadas pela intoxicação.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Campagnol D., Lemos F.R., Silva E.L.F., Rossi Júnior J.L. & Borlini T.C. 2014. [Comparison of pharmacological restraint with ketamine and xylazine, administered intramuscularly in the forelimb or hindlimb, in broad-snouted caiman juveniles.] Comparação da contenção farmacológica com cetamina e xilazina, administradas pela via intramuscular no membro torácico ou pélvico, em jacarés-do-papo-amarelo juvenis. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):675-681. Programa de Mestrado em Ciência Animal, Universidade Vila Velha, Av. Comissário José Dantas de Melo 21, Boa Vista, Vila Velha, ES 29102-920, Brazil. E-mail: daniela.campagnol@uvv.br Reptiles possess a renal portal system which can divert part of the blood from the caudal portions of the body to the kidney before it reaches the systemic circulation. In view of this, it has been recommended the administration of injectable medications in the forelimbs, in order to avoid immediate glomerular filtration, which might result in a reduction of the expected effect. The aim of this study was to compare qualitative and quantitative aspects of the pharmacological restraint provided by the combination of ketamine (30mg/kg) and xylazine (1mg/kg), injected into the forelimb or hindlimb, in broad-snouted caiman juveniles (Caiman latirostris). Eight male animals, with a mean weight (±SD) of 1.3 (±0.3) kg, and aged about 2 years old, were anesthetized on two separate occasions with an interval of 7 days. On each occasion, the animals were randomly assigned to receive the anesthetic combination intramuscularly into the forelimb (FL treatment) or hindlimb (HL treatment). The time intervals between administration of treatment and loss of the righting reflex (induction time), between the loss and return of this reflex (duration of important clinical effect), and between the return of the righting reflex and first movements of ambulation (duration of residual effect) were measured as well as heart and respiratory rates and cloacal and environmental temperatures. Sedation/anesthesia scores were evaluated using a scale ranging from 0 (alert/conscious) to 10 (deep anesthesia/overdose). In the HL treatment, loss of righting reflex was not observed in two animals. Considering only those animals whose loss of righting reflex was observed, the induction time (21±9 and 17±5 minutes), the duration of important clinical effect (35±19 and 43±21 minutes), and the duration of residual effect (28±31 and 12±11 minutes) were similar between the FL and HL treatments, respectively (mean±SD). Sedation/anesthesia scores were significantly higher than at baseline from 20 to 50 minutes in both treatments and, at 30 minutes (peak sedative effect), the median score (interquartile range) was 3.5(2.3-4.0) in the FL treatment and 3.0(2.0-4.0) in the HL treatment. Differences between treatments in physiological variables were not observed. In both treatments, withdrawal reflex in response to digital clamping was not absent at any timepoint. The administration of xylazine-ketamine combination in the forelimb or hindlimb of broad-snouted caiman juveniles provides similar effects, suggesting that the influence of the renal portal system is not clinically relevant. At the doses used, such combination does not induce surgical anesthesia and the immobility/pharmacological restraint is unpredictable and of short duration.

• Ketamine and xylazine anesthetics Caiman latirostris cetamina e xilazina anstésicos

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Campagnol D., Lemos F.R., Silva E.L.F., Rossi Júnior J.L. & Borlini T.C. 2014. [Comparison of pharmacological restraint with ketamine and xylazine, administered intramuscularly in the forelimb or hindlimb, in broad-snouted caiman juveniles.] Comparação da contenção farmacológica com cetamina e xilazina, administradas pela via intramuscular no membro torácico ou pélvico, em jacarés-do-papo-amarelo juvenis. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):675-681. Programa de Mestrado em Ciência Animal, Universidade Vila Velha, Av. Comissário José Dantas de Melo 21, Boa Vista, Vila Velha, ES 29102-920, Brazil. E-mail: daniela.campagnol@uvv.br Os répteis possuem um sistema porta-renal, o qual pode desviar parte do sangue proveniente das porções caudais do corpo aos rins antes que a mesma atinja a circulação sistêmica. Em vista disto, vem sendo aconselhada a administração de medicamentos injetáveis nos membros torácicos, para que se evite a filtração imediata pelo parênquima renal, causando redução do efeito esperado. O objetivo do presente estudo foi comparar aspectos qualitativos e quantitativos da associação de cetamina (30 mg/kg) e xilazina (1 mg/kg), injetada no membro torácico ou pélvico, em jacarés-do-papo-amarelo (Caiman latirostris) juvenis. Oito animais machos com peso médio (±DP) de 1,3 (±0,3) kg e, aproximadamente, dois anos de idade foram anestesiados em duas ocasiões distintas com intervalo de sete dias. Em cada ocasião, os animais receberam, de forma aleatória, a associação anestésica por via intramuscular em membro torácico (tratamento MT) ou pélvico (tratamento MP). Foram avaliados os intervalos de tempo entre a administração do tratamento e a perda do reflexo de endireitamento (período de indução), entre a perda e o retorno desse reflexo (duração do efeito clínico importante) e entre o retorno do reflexo de endireitamento e os primeiros movimentos de deambulação (duração do efeito residual), as frequências cardíaca e respiratória e as temperaturas ambiental e cloacal. Os escores de sedação/anestesia foram avaliados através de uma escala com variação de 0 (alerta/consciente) a 10 (anestesia profunda/sobredosagem). No tratamento MP, dois animais não apresentaram perda de reflexo de endireitamento. Considerando somente aqueles que apresentaram a perda desse reflexo, o tempo de indução (21±9 e 17±5 minutos) e a duração do efeito clínico importante (35±19 e 43±21 minutos) e residual (28±31 e 12±11 minutos) foram similares entre os tratamentos MT e MP (média±desvio padrão). O escore de sedação foi significativamente maior que o basal de 20 a 50 minutos nos dois tratamentos e, aos 30 minutos (pico de efeito), o escore mediano (interquartil) foi 3,5(2,3-4,0) no tratamento MT e 3,0(2,0-4,0) no tratamento MP. Assim como nos escores de sedação, diferenças entre tratamentos nas variáveis fisiológicas não foram observadas. Em ambos os tratamentos, o reflexo de retirada de membro ao pinçamento digital não foi abolido. A administração da associação de xilazina e cetamina em membro pélvico ou torácico de jacarés-do-papo-amarelo juvenis promove efeitos similares, sugerindo que a influência do sistema porta-renal não é clinicamente relevante. Nas doses empregadas, tal protocolo não promove anestesia cirúrgica e a imobilidade/contenção farmacológica é imprevisível e de curta duração.