PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Canine leptospirosis is definitely diagnosed by demonstrating seroconversion in paired serum samples from the acute and convalescent period by the microagglutination test (MAT). However, the application of a polymerase chain reaction (PCR) assay can provide earlier confirmation of suspected cases. The objective of this study was to evaluate two PCR assays used in diagnosis of human leptospirosis (lipL32 real-time PCR and rrs conventional PCR) in cultured microorganisms and experimentally contaminated samples (whole blood, serum, urine), and investigate their applicability in clinical samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis by using the MAT as a reference. The analytical sensitivity of the lipL32 real-time PCR was 1 genome equivalent per reaction, whereas that for the rrs conventional PCR was 10 genome equivalents per reaction. Both assays amplified the pathogenic strains but were negative when evaluating the DNA of other microorganisms that may be present in clinical samples. The lipL32 real-time PCR detected 100 bacteria/mL in whole blood samples, 1000 bacteria/mL in serum samples and 10 bacteria/mL in urine samples, whereas the rrs conventional PCR detected 1000 bacteria/mL in whole blood and serum samples and 100 bacteria/mL in urine samples. Seven out of the 51 samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis were considered as confirmed cases. The lipL32 real-time PCR detected positive results in six of the seven confirmed cases, whereas the rrs conventional PCR detected four. The PCR assays evaluated proved to be useful diagnostic tools in the confirmation of canine leptospirosis when used together with the MAT.

• Canine leptospirosis PCR microagglutination test diagnosis leptospirosis dogs bacterioses

Abstract in Portuguese:

O diagnóstico definitivo da leptospirose canina é geralmente realizado demonstrando a seroconversão em amostras do paciente no período agudo e de convalescença por serologia. No entanto, a aplicação de técnicas de PCR pode contribuir para a confirmação de casos suspeitos num período de tempo mais curto. O objetivo deste estudo foi avaliar dois ensaios de PCR publicados em humanos (PCR lipL32 em tempo real e PCR-rrs convencional) em culturas puras e em amostras de sangue com anticoagulante, soro e urina experimentalmente contaminados. Posteriormente, investigamos a utilidade de ambos os ensaios de PCR em amostras clínicas de cães com suspeita de leptospirose tomando a técnica de microaglutinação (MAT) como referência. A sensibilidade analítica foi de 1 e 10 genoma equivalente por reação para PCR-lipL32 em tempo real e para PCR-rrs convencional, respectivamente. Ambos os ensaios amplificaram corretamente as 14 estirpes patogênicas, mas foram negativos para avaliar o ADN de outros microrganismos que poderiam estar presentes em amostras clinicas. Em nas amostras experimentalmente contaminadas PCR-LipL32 em tempo real detectou 100 bactérias/mL em sangue total, 1000 bactérias/mL em soro e 10 bactérias/mL em urina. Enquanto o PCR-rrs convencional detectou 1000 bactérias/mL em sangue total e soro e 100 bactérias/mL na urina. Dos 51 cães suspeitos, sete foram considerados casos confirmados pela MAT. O PCR-lipL 32 em tempo real detectou seis dos sete casos confirmados, enquanto o PCR-rrs convencional foi positivo em quatro deles. As técnicas de PCR avaliadas provaram ser uma ferramenta de diagnóstico útil na confirmação de casos clínicos caninos quando utilizados em conjunto com a técnica MAT.

• Leptospirose canina PCR teste de microaglutinação caninos diagnóstico reação em cadeia da polimerase bacterioses

Abstract in English:

Dissociative anesthesia results in stressful and long recovery periods in monkeys and use of injectable anesthetics in medical research has to be refined. Propofol has promoted more pleasure wake up from anesthesia. The objectives of this study were to investigate the use of intravenous anesthetic propofol, establishing the required infusion rate to maintain surgical anesthetic level and comparing it to tiletamine-zolazepam anesthesia in Sapajus apella. Eight healthy capuchin monkeys, premedicated with midazolam and meperidine, were anesthetized with propofol (PRO) or tiletamine-zolazepam (TZ) during 60 minutes. Propofol was infused continually and rate was titrated to effect and tiletamine-zolazepam was given at 5mg/kg IV bolus initially and repeated at 2.5mg/kg IV bolus as required. Cardiopulmonary parameters, arterial blood gases, cortisol, lactate and quality and times to recovery were determined. Recovery quality was superior in PRO. Ventral recumbency (PRO = 43.0±21.4 vs TZ = 219.3±139.7 min) and normal ambulation (PRO = 93±27.1 vs TZ = 493.7±47.8 min) were faster in PRO (p<0.05). Cardiopulmonary effects did not have marked differences between groups. Median for induction doses of propofol was 5.9mg/kg, varying from 4.7 to 6.7mg/kg, Mean infusion rate was 0.37±0.11mg/kg/min, varying during the one-hour period. In TZ, two animals required three and five extra doses. Compared to tiletamine-zolazepam, minor post-anesthetic adverse events should be expected with propofol anesthesia due to the faster and superior anesthetic recovery.

• Intravenous anesthesia propofol intermittent bolus tiletamine-zolazepam capuchin monkey Sapajus paella recovery refinement primate TIVA clinics

Abstract in Portuguese:

A anestesia dissociativa em primatas resulta em recuperação anestésica lenta e estressante, e, portanto, o uso de anestesia injetável em pesquisas médicas precisa ser refinado. Por outro lado, o propofol promove recuperação mais suave. Os objetivos desse estudo foram investigar o uso do anestésico intravenoso propofol, estabelecer a taxa de infusão contínua necessária para manter anestesia cirúrgica, e comparar tal técnica com a dissociativa tiletamina-zolazepam em Sapajus apella. Oito macacos-prego saudáveis foram pré-medicados com midazolam e meperidina, e posteriormente anestesiados com propofol (PRO) ou tiletamina-zolazepam (TZ) durante 60 minutos. O propofol foi administrado em infusão contínua, e a taxa foi titulada ao efeito, já a tiletamina-zolazepam foi administrada em 5mg/kg IV como bolus inicial, e repiques de 2,5mg/kg IV conforme necessário. Os parâmetros cardiopulmonares, hemogasometria arterial, cortisol, e lactato, além da qualidade e duração da recuperação anestésica foram determinados. A qualidade da recuperação anestésica foi superior em PRO. O tempo para atingir decúbito ventral (PRO = 43,0±21,4 vs TZ = 219,3±139,7 min) e ambulação normal (PRO = 93±27,1 vs TZ = 493,7±47,8 min) foram mais rápidos em PRO (p<0,05). As variáveis cardiopulmonares não diferiram entre os grupos. A mediana para dose de indução com propofol foi de 5,9mg/kg, variando de 4,7 a 6,7mg/kg. A taxa de infusão contínua média de propofol foi de 0,37±0,11mg/kg/min, variando ao longo dos 60 minutos. Em TZ, dois animais necessitaram de três e cinco repiques. Comparado à tiletamina-zolazepam, menos efeitos adversos pós-anestésicos devem ser esperados com o propofol, devido à recuperação mais suave e rápida.

• Anestesia total intravenosa propofol bolus intermitente tiletamina-zolazepam macaco-prego Sapajus apela recuperação refinamento primata TIVA clínica

Abstract in English:

The importance of the hoof to the horse health is clear, and the current knowledge regarding the cellular aspects of hoof keratinocytes is poor. Studies on equine keratinocyte culture are scarce. Developing keratinocyte cultures in vitro is a condition for studies on molecular biology, cell growth and differentiation. Some methods have already been established, such as those for skin keratinocyte culture. However, few methodologies are found for lamellar keratinocytes. The objective of this study was to standardize the equine hoof keratinocyte isolation and cultivation, and then characterize the cell immunophenotype. For this, the primary culture method used was through explants obtained from three regions of the equine hoof (medial dorsal, dorsal, and lateral dorsal). After the cell isolation and cultivation, the cell culture and its explants were stained with anti-pan cytokeratin (pan-CK) (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4), and Ki-67 (MIB-1) antibodies. Cells were grown to third passage, were positive for pan-CK, p63 and Ki-67, and few cells had vimentin positive expression. As for the explants, the epidermal laminae were not stained for vimentin or Ki-67. However, some cells presented positive pan-CK and p63 expression. This study demonstrated the viability of lamellar explants of equine hooves as a form of isolating keratinocytes in primary cultures, as well as characterized the proliferation ability of such keratinocytes in monolayers.

• Isolation cultivation immunofluorescence lamellar keratinocytes equine hoof cell migration culture technology skin tissue engineering

Abstract in Portuguese:

É notória a importância do casco na saúde dos equinos, mas o conhecimento em nível celular é pouco entendido. Estudos envolvendo o cultivo de queratinócitos equinos são escassos. Sabe-se que o desenvolvimento de cultivos de queratinócitos in vitro é uma condição para estudos sobre a biologia molecular, crescimento e diferenciação celular. Alguns métodos já estão estabelecidos, como para cultivo de queratinócitos de pele, mas poucas metodologias são encontradas para queratinócitos lamelares. O objetivo desse estudo foi padronizar o cultivo de queratinócitos provenientes de casco equino visando futuramente associar ao estudo da medicina regenerativa para assim estabelecer um modelo experimental in vitro e indicar o uso criterioso de terapias regenerativas para a laminite equina. Desta forma, o cultivo em monocamada e a caracterização de queratinócitos lamelares foram realizados. Para isso, o método de cultura primária utilizado foi através de explantes obtidos de três regiões do casco (dorso-medial, dorsal e dorso-lateral). As células foram caracterizadas para os marcadores anti pan-cytokeratin (AE1/AE3), vimentin (V9), p63 (4A4) e Ki-67 (MIB-1) nos cultivos e nos explantes. As  células foram cultivadas até terceira passagem, tendo marcação positiva para pan-CK, p63 e Ki-67 e fraca marcação para vimentina. Já as lâminas epidermais não tiveram marcação de vimentin e Ki-67, porém marcaram acentuadamente para pan-CK e p63. Este estudo demonstrou a exiquibilidade do uso de explantes lamelares do casco de equinos, como forma de isolamento de queratinócitos em cultivos primários, bem como caracterizou a habilidade de proliferação desses queratinócitos em monocamada.

• Isolamento cultivo imunofluorescência queratinócitos lamelares casco equino migração celular tecnologia de cultivo engenharia tecidual

Abstract in English:

Pasteurella (P.) multocida is the causative agent of pneumonic pasteurellosis in swine, which is commonly associated with the final stages of enzootic pneumonia or porcine respiratory disease complex. Although this syndrome is one of the most common and important diseases of pigs, data on antimicrobial susceptibility of P. multocida isolates are uncommon in Brazil. Therefore, the present study was carried out to determine and to compare antimicrobial susceptibility profile of Brazilian P. multocida isolated from pigs with lesions of pneumonia or pleuritis during two-time periods. Historical isolates (period of 1981 to 1997; n=44) and recent isolates (period of 2011 to 2012; n=50) were used to determine the MIC of amoxicillin, enrofloxacin, florfenicol and tetracycline by microbroth dilution. Florfenicol had the lowest level of resistance for both historical and recent isolates (0% and 6%, respectively), while tetracycline had the highest (20.5% and 34%, respectively). Multi-drug resistance (MDR) to amoxicillin/florfenicol/tetracycline was observed in 6% of recent isolates. There was a significant increase (p˂0.05) in resistance for amoxicillin and enrofloxacin in recent isolates compared with historic isolates (3.8% and 18%, respectively), most likely due to the selective pressure of antimicrobial usage to treat and prevent P. multocida infections. The results of this study showed an increase of isolates resistant to important drugs used in treatment of P. multocida infections in pigs, demonstrating the need for the implementation of rational use of antimicrobials in Brazilian swine industry.

• Antimicrobial susceptibility Brazilian pig Pasteurella multocida minimum inhibitory concentration (MIC) microbroth dilution resistance swine pigs bacterioses

Abstract in Portuguese:

Pasteurella (P.) multocida é o agente da pasteurelose pneumônica em suínos, a qual é comumente associada com o estágio final da pneumonia enzoótica suína ou complexo das doenças respiratórias dos suínos. Apesar de ser uma das doenças mais comuns e importantes na suinocultura, dados sobre suscetibilidade antimicrobiana de isolados de P. multocida são raros no Brasil. Dessa forma, o presente estudo foi realizado para determinar e comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de P. multocida de suínos com lesões de pneumonia ou pleurite no Brasil durante dois períodos. Isolados históricos (período de 1981 a 1997; n=44) e contemporâneos (período de 2011 a 2012; n=50) foram usados para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de amoxicilina, enrofloxacina, florfenicol e tetraciclina através do teste de microdiluição em caldo. Florfenicol apresentou o menor nível de resistência para ambos os isolados históricos e contemporâneos (0% e 6%, respectivamente), enquanto que tetraciclina apresentou o maior nível de resistência (20.5% e 34%, respectivamente). Resistência a múltiplos antimicrobianos (amoxicilina, florfenicol e tetraciclina) foi observada em 6% dos isolados recentes. Foi observado aumento significativo (p˂0.05) na resistência a amoxicilina e enrofloxacina em isolados recentes comparado com isolados históricos (3.8% e 18%, respectivamente), provavelmente devido à pressão de seleção de antimicrobianos usados no tratamento e prevenção de infecções causadas por P. multocida. Os resultados deste trabalho demostraram o aumento de isolados resistentes a importantes drogas utilizadas no tratamento de infecções causadas por P. multocida em suínos, evidenciando a necessidade da implementação do uso racional de antimicrobianos na suinocultura brasileira.

• Antimicrobianos Pasteurella multocida concentração inibitória mínima (CIM) microdiluição em caldo resistência suínos bacterioses

Abstract in English:

Adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) are an attractive source of mesenchymal stem cells (MSCs) for use in tissue engineering and clinical applications. This paper focuses on the characterization of ADSCs used as immunosuppressive agent in rabbits undergoing partial allograft for urine bladder restorage. For this study highlighted the characterization of the ADSCs used as immunosuppressive agents in rabbits submitted to partial allograft for restoration of the urinary vesicle, using 25 animals, six months old, New Zealand. ADSCs at the third peal were characterized by the MSC-specific CD105, CD73 and CD90 expression and by the absence of the hematopoietic marker CD45, as revealed by flow cytometry analysis. Moreover, ADSCs were efficient in preventing allograft rejection from the urinary bladder, as judged by biochemical, clinical and ultrasonography analysis. Together, these results compose characterization of protein expression profiles and immunosuppressive functionality of ADSCs in rabbits, which had undergone partial allografts of the urinary bladder, foreseeing future applications in clinical practice.

• Expression patterns mesenchymal stem cell proteins adipose tissue derived cells immunosuppressing agent partial allograft restoration urinary bladder rabbits ADSC cellular therapy flow cytometry clinics

Abstract in Portuguese:

As células mesenquimais derivadas de tecido adiposo (ADSCs) são uma fonte atraente de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso na engenharia de tecidos e suas aplicações clínicas. Este trabalho destacou a caracterização das ADSCs utilizadas como agentes imunossupressores em coelhos submetidos a aloenxerto parcial para restauração da vesícula urinária, sendo utilizados 25 animais, de seis meses de idade, Nova Zelândia. As ADSCs, após o terceiro repique, foram caracterizadas pela expressão específica de MSC CD105, CD73 e CD90 e pela ausência do marcador hematopoiético CD45, tal como revelado por análise de citometria de fluxo. Além disso, os ADSCs foram eficientes na prevenção da rejeição de aloenxertos da vesícula urinária, conforme avaliado por análises clínica, bioquímica e ultrassonográfica. Juntos, esses resultados compõem a caracterização dos perfis de expressão proteica e a funcionalidade imunossupressora de ADSCs em coelhos, que sofreram aloenxertos parciais da bexiga, prevendo futuras aplicações na prática clínica.

• Padrão de expressão proteínas específicas células-tronco mesenquimais tecido adiposo agente imunossupressor aloenxerto parcial restauração vesícula urinária coelhos terapia celular citometria de fluxo clínica

Abstract in English:

Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) is an important bovine pathogen that is responsible for causing respiratory diseases and reproductive failures. The presence of BoHV-1 in an in vitro embryo production system affects fertilization, maturation, and embryonic development. The objective of this study was to evaluate the developmental capacity of oocytes from naturally infected cows with no reproductive history. Moreover, this study investigated the presence of viral DNA in cumulus oophorus complexes (COCs). Experimental groups were differentiated by titrating the antibodies detected through seroneutralization assays, establishing three groups: seronegative animals (titer lower than 2), low titer (2 to 8), and animals with a titer above or equal to 16. COCs were obtained from 15 donors during 22 sessions of ultrasound-guided follicular aspiration. DNA was extracted from a pool of COCs obtained from all aspirations from the same donor as well as from whole blood and nested PCR reactions were performed. Only COCs with a compact layer of cumulus cells, an intact zona pellucida, and homogeneous cytoplasm were selected for in vitro culture and evaluation of nuclear maturation rate. After culturing for 24 hours, the oocytes were fixed and stained to evaluate the meiotic cell cycle stage. Oocytes that showed a chromosomal configuration in metaphase II were considered to have reached nuclear maturation. Compared with the other groups, the oocyte nuclear maturation rate in animals with a titer greater than or equal to 16 (50%) was compromised (P< 0.05). However, the viral titer did not influence the maturation rate of bovine oocytes in animals exhibiting low titration (62.2%) when compared with the control group (76.7%). Viral DNA was not observed in the blood samples but was detected in the COC pool from three seropositive donors. In view of the results obtained, we conclude that natural infections by the BoHV-1 virus can compromise the nuclear maturation rate in cows, depending on the titration levels of antibodies against the virus. Moreover, viral DNA could be present in COCs, contradicting the hypothesis that seropositive animals with no history of clinical symptomatology pose a negligible risk of transmitting BoHV-1 by COCs.

• Nuclear maturation rate oocytes bovine herpesvirus 1 BoHV-1 IBR maturation cattle pathology

Abstract in Portuguese:

Herpesvírus bovino 1 (BoHV 1) é um importante patógeno bovino, responsável por causar doenças respiratórias e falhas reprodutivas. A presença do BoHV-1 em sistema de produção in vitro de embriões afeta a fertilização, a maturação e o desenvolvimento embrionário. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de desenvolvimento de ovócitos oriundos de vacas infectadas naturalmente sem histórico reprodutivo. Além disso, este estudo investigou a presença do DNA viral em Complexos Cumulus Ooforus (COCs). Os tratamentos foram definidos a partir do título de anticorpos detectados pelos ensaios de soroneutralização, sendo estabelecidos três grupos: animais soronegativos (título menor do que 2), título baixo (2 a 8) e animais com título maior ou igual a 16. Os COCs foram obtidos de 15 doadoras durante 22 sessões de aspiração folicular guiada por ultrassom. A extração do DNA foi realizada em um pool de COCs de todas as aspirações de uma mesma doadora e no sangue total para a realização das reações de Nested-PCR. Para avaliação da taxa de maturação nuclear, foram selecionados para o cultivo in vitro somente os COCs com camada compacta de células do cumulus, zona pelúcida íntegra e citoplasma homogêneo. Após 24 horas de cultivo, os ovócitos foram fixados e corados em lâmina para a avaliação do estádio do ciclo celular meiótico. Os ovócitos que apresentaram configuração cromossômica em metáfase II foram considerados como tendo alcançado a maturação nuclear. Verificou-se comprometimento na taxa de maturação nuclear ovocitária (P<0.05) nos animais de título maior ou igual a 16 (50%). No entanto, não houve influência do título viral na taxa de maturação de ovócitos bovinos em animais que apresentaram titulação baixa (62,2%) quando comparados com o grupo controle (76,7%). O DNA viral não foi identificado nas amostras de sangue, mas foi detectado no pool de COCs de três doadoras soropositivas. Diante dos resultados encontrados conclui-se que vacas infectadas naturalmente pelo vírus BoHV-1 apresentam comprometimento na taxa de maturação nuclear, dependendo do grau de titulação de anticorpos contra o vírus. Ademais, o DNA viral pode estar presente em COCs contrariando a hipótese de que animais sorologicamente positivos e sem histórico de sintomatologia clínica oferecem risco negligível de transmissão do BoHV-1 por COCs.

• Taxa de maturação nuclear ovócitos vacas herpesvírus bovino 1 BoHV-1 IBR maturação bovinos patologia

Abstract in English:

ABSTRACT.- Salomão R.L., Crivellenti L.Z., Simões A.P.R., Brito M.B.S., Silva P.E.S., Costa P.B., Tinucci-Costa M., Santana A.E. & Borin-Crivellenti S. 2018. Evaluation of serum concentrations of cortisol and thyroxine in bitches with early-stage mammary carcinoma. [Concentrações séricas de cortisol e tiroxina em cadelas com carcinoma mamário em estádio inicial.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1949-1954. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Avenida Pará 1720, bloco 2T, Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: sofiabcrivellenti@ufu.br In view of the fact that cancer is considered a chronic disease that can interfere with hormonal homeostasis by means of cytokines, we hypothesized that, even at early stages, mammary carcinoma is able to alter the balance of the hypothalamic-pituitary-thyroid and hypothalamic-pituitary-adrenal axes. To test this hypothesis, the serum concentrations of basal cortisol, thyroxine (T4), free thyroxine (fT4), and thyroid-stimulating hormone (TSH) were evaluated in 20 unspayed bitches that had a histopathological diagnosis of grade 1 mammary carcinoma at clinical stage I according to the World Health Organization (WHO) classification (T1N0M0). The control animals comprised 10 unspayed bitches in perfect health conditions that were matched with those with mammary carcinoma by age. No significant differences regarding the concentrations of basal cortisol, TSH, t4, and fT4 were found between the bitches carrying early stage mammary carcinoma when compared to the control group. This suggests that, even if malignant, early-stage mammary carcinomas do not exhibit the ability to alter the concentrations of hormones produced by the hypothalamic-pituitary-adrenal or hypothalamic-pituitary-thyroid axes.

• Serum concentration cortisol thyroxine bitches mammary carcinoma dogs hormone quantification mammary cancer endocrine tests clinics Concentração sérica tiroxina cadelas carcinoma mamário caninos determinações hormonais neoplasia mamária testes endócrinos clínica.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Salomão R.L., Crivellenti L.Z., Simões A.P.R., Brito M.B.S., Silva P.E.S., Costa P.B., Tinucci-Costa M., Santana A.E. & Borin-Crivellenti S. 2018. Evaluation of serum concentrations of cortisol and thyroxine in bitches with early-stage mammary carcinoma. [Concentrações séricas de cortisol e tiroxina em cadelas com carcinoma mamário em estádio inicial.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1949-1954. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Avenida Pará 1720, bloco 2T, Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: sofiabcrivellenti@ufu.br Em vista do fato de neoplasias serem consideradas doenças crônicas que por meio de citocinas podem interferir na homeostase hormonal, hipotetizou-se que o carcinoma mamário, mesmo nos seus estádios iniciais, fosse capaz de alterar o equilíbrio dos eixos hipotalâmico-hipofisário&#8209;tireóideo e hipotalâmico-hipofisário-adrenal. Para tal, foram avaliadas as concentrações séricas de cortisol basal, tiroxina (T4), tiroxina livre (fT4) e tireotrofina (TSH) de 20 fêmeas caninas, inteiras, com diagnóstico histopatológico de carcinoma mamário grau 1 e estadiamento clínico I segundo a classificação da Organização Mundial da Saúde - OMS (T1N0M0). Os animais controle constituíram-se por 10 fêmeas caninas inteiras, em perfeitas condições de higidez, as quais foram pareadas, por idade, com aquelas portadoras de carcinoma mamário. Não foram encontradas diferenças significativas nas concentrações de cortisol basal, TSH, T4 e fT4 das cadelas portadoras de carcinoma mamário em estádio inicial quando comparadas às controles sugerindo que, mesmo considerados malignos, ainda não apresentam a capacidade de alterar as concentrações dos hormônios produzidos pelos eixos hipotalâmico-hipofisário-adrenal e tireóideo.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ravagnani G.M., Torres M.A., Leal D.F., Martins S.M.M.K., Papa F.O., Dell’Aqua Junior J.A., Alvarenga M.A. & Andrade A.F.C. 2018. Cryopreservation of boar semen in 0.5mL straws at low spermatozoa concentration is better than high concentration to maintain sperm viability. [A manutenção da viabilidade do sêmen suíno criopreservado em palhetas de 0,5mL em baixas concentrações espermáticas é melhor do que em altas concentrações.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1726-1730. Núcleo de Pesquisa em Suínos, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-mail: andrefc@usp.br To date, no studies have been performed evaluating the effect of boar spermatozoa concentration in 0.5mL freezing straws, leading us to examine this question. Each sperm&#8209;rich fraction of the ejaculate (n=25) was diluted at five different sperm concentrations (100, 200, 300, 600 and 800 x 106 spermatozoa/mL), packaged in 0.5mL straws, and subsequently frozen. After thawing, the sperm from all of treatment groups were analyzed to determine motility characteristics using a sperm class analyzer (SCA-CASA), and their plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, sperm membrane lipid peroxidation and fluidity were analyzed by flow cytometry. An increase in spermatozoa concentration above 300x106 spermatozoa/mL in a 0.5mL straw impaired (p<0.05) the total and progressive motility, curvilinear velocity, straight-line velocity, linearity and beat cross frequency. However, the plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation and fluidity were not influenced (p>0.05) by high spermatozoa concentrations at freezing. Therefore, to increase spermatozoa survival and total and progressive motility after thawing, boar spermatozoa should be frozen at concentrations up to 300x106 spermatozoa/mL.

• Cryopreservation boar semen spermatozoa concentration sperm viability cryoinjury cryocapacitation swine Sêmen suíno criopreservão crioinjúria concentração espermática criocapacitação suíno

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ravagnani G.M., Torres M.A., Leal D.F., Martins S.M.M.K., Papa F.O., Dell’Aqua Junior J.A., Alvarenga M.A. & Andrade A.F.C. 2018. Cryopreservation of boar semen in 0.5mL straws at low spermatozoa concentration is better than high concentration to maintain sperm viability. [A manutenção da viabilidade do sêmen suíno criopreservado em palhetas de 0,5mL em baixas concentrações espermáticas é melhor do que em altas concentrações.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1726-1730. Núcleo de Pesquisa em Suínos, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-mail: andrefc@usp.br Até o momento, não foram realizados estudos que avaliassem o efeito da concentração de espermatozoides/mL em palhetas (0,5mL) para a criopreservação, levando-nos a analisar esta questão. Cada fração-rica do ejaculado (n=25) foi diluída em cinco diferentes concentrações de espermatozoides (100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL), envasadas em palhetas de 0,5mL e posteriormente congeladas. Após a descongelação, os espermatozoides de todos os tratamentos foram avaliados a fim de determinar as características de motilidade usando um sistema de análise computadorizada dos espermatozoides (SCA-CASA). A integridade das membranas plasmática e acrosomal, o potencial de membrana mitocondrial, a peroxidação lipídica e a fluidez da membrana foram analisadas por citometria de fluxo. O aumento na concentração de espermatozoides acima de 300x106 espermatozoides/mL diminuiu (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade curvilínea, velocidade linear, linearidade e frequência de batimento. No entanto, a integridade da membrana plasmática e acrosomal, potencial de membrana mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez de membrana não foram influenciados (p>0,05) por altas concentrações de espermatozoides durante a criopreservação. Portanto, a fim de melhorar a sobrevivência dos espermatozoides suínos e a motilidade total e progressiva após a descongelação, os espermatozoides suínos devem ser congelados a concentrações não superiores a 300x106 espermatozoides/mL.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Zani C.C., Marinho P.V.T., Diamante G.A.C., Sueiro F.A.R. & Bahr Arias M.V. 2018. Post mortem evaluation of spinal cord and protruded intervertebral discs in dogs without neurological abnormalities. [Avaliação post mortem da medula espinhal e de discos intervertebrais protrusos em cães sem alterações neurológicas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1793-1799. Departamento de Clínicas Veterinárias, Universidade Estadual de Londrina, Rodovia Celso Garcia Cid Km 380, Londrina, PR 86057-970, Brazil. E-mail: vicky@uel.br The aim of this study was to verify the presence of protrusion of the intervertebral disc (IVD) causing compression of the spinal cord and/or roots of cauda equina in 30 dogs above seven years of age with no evidence of previous neurological abnormalities. After the occurrence of death or euthanasia, a laminectomy was performed from C2 to the sacral vertebra to verify the presence of IVD protrusions. The protruded IVD were macroscopically graded according to the Thompson scale, and the corresponding spinal cord segment was histologically analyzed for nervous tissue compression. Of the 30 dogs, twelve (40%) presented disc protrusion, and of these 12 dogs, seven (58%) presented more than one protruded disc. Disc protrusion was observed in 3.2% (25/780) of all IVD evaluated. Of the six chondrodystrophic dogs, five (83%) presented disc protrusion. Of the 24 nonchondrodystrophic dogs, seven (29%) presented IVD protrusion. The site that showed the highest frequency of protrusion was L4-L5 (6/25) followed by the L6-L7 region (3/25) and C6-C7 (3/25). Only two of the medullary segments evaluated showed histological changes, with presence of focal lymphocytic infiltration and multifocal mild hemorrhage in the gray matter. Under the conditions of this study, 40% of dogs older than seven years old showed IVD protrusions without showing neurological signs, with no abnormality of the nervous tissue in 92% of the evaluated segments. Thus, the protrusion of the IVD in some dogs, can only be a finding of no clinical relevance.

• Post mortem spinal cord intervertebral disc degeneration spinal cord dogs pathology medula espinhal degeneração do disco intervertebral medula espinhal cães patologia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Zani C.C., Marinho P.V.T., Diamante G.A.C., Sueiro F.A.R. & Bahr Arias M.V. 2018. Post mortem evaluation of spinal cord and protruded intervertebral discs in dogs without neurological abnormalities. [Avaliação post mortem da medula espinhal e de discos intervertebrais protrusos em cães sem alterações neurológicas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1793-1799. Departamento de Clínicas Veterinárias, Universidade Estadual de Londrina, Rodovia Celso Garcia Cid Km 380, Londrina, PR 86057-970, Brazil. E-mail: vicky@uel.br O objetivo do presente estudo foi verificar a presença de protrusão do disco intervertebral (DIV) causando compressão da medula espinhal e/ou raízes da cauda equina em cadáveres de cães, sem histórico de alterações neurológicas. Para isso, após a ocorrência de óbito ou realização de eutanásia em 30 cães com mais de sete anos de idade, sem histórico de alterações neurológicas, foi realizada a laminectomia entre C2 até a vértebra sacral para verificar a presença de protrusões do DIV. Os DIV protrusos foram graduados macroscopicamente quanto à degeneração segundo a escala de Thompson, e o segmentos medular correspondente à localização da compressão foi analisado microscopicamente em busca de lesões compressivas ao tecido nervoso. Quarenta por cento dos cães (12/30) apresentaram protrusão do DIV, e destes, 58% (7/12) apresentavam mais de um DIV protruso. A protrusão estava presente em 3,2% (25/780) de todos os DIV avaliados. Cães de raças condrodistróficas apresentaram protrusões em 83% dos casos (5/6) e raças não condrodistróficas em 29% (7/24). O local que apresentou maior frequência de protrusão foi L4-L5 (6/25), seguido da região L6-L7 (3/25) e C6-C7 (3/25). Apenas dois segmentos medulares avaliados na histopatologia apresentaram alterações, com presença de infiltrado linfoplasmocitário focal e hemorragia discreta multifocal na substância cinzenta. Nas condições do presente estudo, 40% dos cães com mais de sete anos de idade apresentaram protrusões do DIV sem que houvesse sinais neurológicos, com normalidade do tecido nervoso em 92% dos segmentos avaliados. Assim, a protrusão do DIV, em alguns cães, pode ser apenas um achado sem relevância clínica.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Kemper B., Brandão C.V.S., Rossetto V.J.V., Gushiken L.F.S., Padovani C.R. & Pellizzon C.H. 2018. Autologous and homologous skin grafts treated with platelet-rich plasma (PRP8): experimental study in rabbits. [Enxertos cutâneos autólogos e homólogos tratados com plasma rico em plaquetas (PRP): estudo experimental em coelhos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1818-1823. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Rua Prof. Dr. Walter Mauricio Correa s/n, Cx. Postal 560, Distrito de Rubião Júnior, Botucatu, SP 18618-681, Brazil. E-mail: valeriasb@fmvz.unesp.br The aim of the present study was to compare tissue repair of skin defects in rabbits submitted to autologous and homologous grafts treated or not with platelet-rich plasma (PRP). We selected nine rabbits and constituted four groups, designated as G1, in which were performed autologous graft treated with PRP; G2, autologous graft only; G3, homologous graft treated with PRP; and G4, homologous graft only. Macroscopic and histomorphometric evaluation was realized. The histomorphometric evaluation was performed by Hematoxylin/Eosin and Masson´s Trichrome staining with quantification of collagen fibers, macrophages, fibroblasts and vessels. The autologous graft treated with PRP showed positive influence on the early stage of the tissue repair process at the macroscopic evaluation, characterized by rosy color and cosmetic appearance. At the histomorphometric evaluation, there was no statistical difference in the number of macrophages and fibroblasts between the treated grafts or not with the PRP, as well as the quantification of vessels and collagen fibers. It can be concluded that PRP promotes a positive influence on the initial phase or “take” of the graft.

• Skin grafts platelet-rich plasma rabbits skin transplantation wound healing tissue repair allografts autografts surgery Enxertos cutâneos enxerto de pele cicatrização de feridas reparação tecidual aloenxertos autoenxertos coelhos cirurgia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Kemper B., Brandão C.V.S., Rossetto V.J.V., Gushiken L.F.S., Padovani C.R. & Pellizzon C.H. 2018. Autologous and homologous skin grafts treated with platelet-rich plasma (PRP8): experimental study in rabbits. [Enxertos cutâneos autólogos e homólogos tratados com plasma rico em plaquetas (PRP): estudo experimental em coelhos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(9):1818-1823. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Rua Prof. Dr. Walter Mauricio Correa s/n, Cx. Postal 560, Distrito de Rubião Júnior, Botucatu, SP 18618-681, Brazil. E-mail: valeriasb@fmvz.unesp.br Objetiva-se com o presente estudo comparar a reparação tecidual de defeitos cutâneos em coelhos, submetidos a enxertos autólogos e homólogos, tratados ou não com plasma rico em plaquetas (PRP). Para isso, foram selecionados nove coelhos e constituídos quatro grupos experimentais, designados como G1, no qual foi realizado enxerto autólogo tratado com PRP; G2, enxerto autólogo; G3, enxerto homólogo tratado com PRP; e G4, enxerto homólogo. Foram realizadas avaliações macroscópica e histomorfométrica, por meio das colorações de Hematoxilina/Eosina e Tricômio de Masson, incluindo quantificação de fibras colágenas, contagem de macrófagos, fibroblastos e vasos. O uso do enxerto autólogo com PRP influenciou positivamente na fase inicial do processo de reparação tecidual à avaliação macroscópica, caracterizada por coloração rósea e de aspecto cosmético. À avaliação histomorfométrica, não houve diferença estatística quanto ao número de macrófagos e fibroblastos entre os enxertos tratados ou não com o PRP, bem como quanto às contagens de vasos e a quantificação das fibras colágenas. Conclui-se que o PRP sob a promoveu influência positiva na fase inicial ou de “pega” do enxerto autólogo.