Abstract in English:
Although intranasal bovine respiratory disease (BRD) vaccines containing live attenuated virus elicit greater stimulation of local humoral immunity response, they can mimic a viral infection, responsible for reducing innate defense during the establishment of vaccine-induced immunity. Probiotics containing Saccharomyces cerevisiae or Enterococcus faecium reduced the occurrence of BRD in neonatal calves challenged with the bovine respiratory syncytial virus (BRSV). Furthermore, the probiotics potentiated the humoral immune response after vaccination in murine models, raising the question of whether they could have the same effect in calves. This study aimed to verify if the probiotic containing E. faecium and S. cerevisiae attenuates the inflammation caused by the vaccine against BRD in the respiratory tract region in calves. Twenty-four healthy Jersey calves, aged 6 to 7 months old, were divided into the groups: control (C), supplemented (S), vaccinated (V), and supplemented and vaccinated (SV), with six animals in each of them. Supplemented groups (S and SV) received S. cerevisiae and E. faecium once a day on D-15 for 51 days (Probios precise®, Ouro Fino®, 2g/day/animal). Vaccinated groups (V and SV) received a single dose of an intranasal BRD vaccine on day 0 (Inforce®, Zoetis®, 1ml/ nostril). The control group was not supplemented or vaccined. Irritation of the respiratory tract and bronchoalveolar (BA) evaluations: cytology, phagocyte function, and IgA were measured on D-15, D3, D7, and D21. The vaccinated groups showed greater irritation of the nasopharynx and trachea. However, only Group V showed a reduction in BA phagocyte function and an increase in cellularity by a neutrophil influx in the BA region. Regarding IgA BA, SV showed the greatest increase, followed by S and V, concerning C. We conclude that isolated supplementation with E. faecium and S. cerevisiae promoted increased production of BA IgA. In association with the vaccine, the supplementation attenuated the inflammation of the respiratory tract produced by the vaccine itself, avoiding the reduction of phagocyte function BA, besides potentiating the humoral immune response of the vaccine containing live attenuated virus against BRD.
Abstract in Portuguese:
Embora vacinas intranasais contra complexo respiratório bovino (CRB) contendo vírus vivo atenuado provoquem maior estimulação de reposta humoral local, elas podem mimetizar uma infecção viral responsável por reduzir a defesa imune inata durante o estabelecimento da imunidade vacinal. Probióticos contendo Saccharomyces cerevisiae e Enterococcus faecium reduziram a ocorrência de CRB em bezerras neonatas desafiados com vírus respiratório sincicial bovino e potencializaram a resposta humoral após a vacinação em modelos murino, gerando-se a dúvida se poderiam ter o mesmo efeito em bezerros. Este trabalho teve o objetivo de verificar se o probiótico contendo E. faecium e S. cerevisiae atenua a inflamação causada pela vacina na região do trato respiratório de bezerras. Vinte e quatro bezerras da raça Jersey, sadias com idade entre 6 a 7 meses de idade foram divididas nos grupos: controle (C), suplementado (S), vacinado (V) e suplementado e vacinado (SV), com seis animais em cada. Os grupos suplementados (S e SV) receberam S. cerevisiae e E. faecium uma vez ao dia, no dia D-15, durante 51 dias (Probios precise®, Ouro Fino®, 2g/dia/animal). Os grupos vacinados (V e SV) receberam a vacina intranasal contra CRB em dose única no dia 0 (Inforce®, Zoetis®, 1ml/ narina). Mensurou-se a irritação do trato respiratório e os parâmetros broncoalveolares (BA): citologia, função de fagócitos e IgA, nos dias D-15, D3, D7 e D21. Os grupos vacinados apresentaram maior irritação da nasofaringe e traqueia, porém apenas o V apresentou redução da função dos fagócitos BA e aumento da celularidade por influxo neutrofílico. Em relação a IgA BA, o SV apresentou o maior aumento, seguido do S e do V, em relação ao C. Conclui-se que a suplementação com E. faecium e S. cerevisiae isolada promoveu aumento de produção de IgA BA. Em associação com a vacina, atenuou a inflamação do trato respiratório produzida pela mesma, evitando a redução da função de fagócitos BA, além de potencializar a resposta humoral da vacina contendo vírus vivo atenuado contra o CRB.
Abstract in English:
The immune response capacity of the mammary gland plays a major role to determine if mastitis will or not be established. Thus, we hypothesize that a better understanding of polymorphonuclear neutrophil leukocyte (PMN) function will elucidate mechanisms that will improve our knowledge of how we could avoid an inflammatory process by increasing the immune capacity of the cow, and even further, to search for a tool to diagnose mastitis or a possible way to select and identify non-susceptible animals. The present study utilized 112 quarters from 28 Holstein dairy cows that were divided into quarters milk samples with somatic cell count (SCC) <2×105 cells mL-1 (n=72) and SCC >2×105 cells mL-1 (n=40). The percentages of milk PMNs and the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) and the phagocytosis of Staphylococcus aureus by milk neutrophils were evaluated by flow cytometry. Our results showed a higher percentage of neutrophils in quarter milk samples with high SCC (P=0.0003), and this group also had a significantly higher percentage of neutrophils that produced ROS (P=0.008). On the other hand, the phagocytosis intensity of S. aureus by milk neutrophils was higher in quarters with low SCC (P=0.003), suggesting a better mammary gland immunity against invading pathogens. Analyzing the results of the predictive values of the measured PMN functions, they cannot be used isolated as a good diagnosis test since none of them had a satisfactory sensitivity and specificity values, which was also confirmed by the Youden index values being far from one. In conclusion, the assessment of milk bovine neutrophil functions could improve our understanding of the cellular basis of mastitis. Although, the intracellular ROS production and S. aureus phagocytosis by milk neutrophil did not have high predictive values to detect intramammary infections, our results strengthen the idea that that poor bovine mammary gland neutrophil phagocytic ability may be associated with high SCC, and might be considered to identify susceptible dairy cows to mastitis.
Abstract in Portuguese:
A resposta imune da glândula mamária desempenha um papel importante ao determinar o estabelecimento da dos neutrófilos irá nos subsidiar conhecimentos, pelo qual podemos evitar o processo inflamatório pela otimização da resposta imune de bovinos leiteiros, e fornece ferramentas para diagnosticar a mastite ou um possível instrumento para identificar e selecionar animais resistentes à infecção intramamária, aumentando a produtividade do rebanho. O presente estudo utilizou 112 amostras provenientes de quartos mamários de 28 vacas Holandesas que foram divididos em amostras de leite com baixa (n=72; <2×105 células mL-1) ou alta (n=40; 2×105 células mL-1) contagem de células somáticas (CCS). A porcentagem de neutrófilos no leite, a produção intracelular de espécies reativas de oxigênio (ERO) e a fagocitose de Staphylococcus aureus pelos neutrófilos do leite foram avaliadas por citometria de fluxo. Os resultados do presente estudo demonstraram maior percentagem de neutrófilos (CH138+; P=0,0003) e percentagem de neutrófilos que produziram ERO (P=0,008) em amostras de leite com alta CCS. Por outro lado, a intensidade de fagocitose de S. aureus por neutrófilos em amostras de leite com baixa CCS (P=0,003), que demonstra maior atividade funcional destas células neste grupo. As funções neutrofílicas para o diagnóstico da mastite não apresentaram valores de sensibilidade e especificidade altos, que foram confirmados pelo índice Youden. Desta forma, conclui-se que a produção intracelular de ERO e fagocitose de S. aureus pelos neutrófilos do leite não apresentaram valores preditivos altos para detecção de mastite. Além disto, os resultados do presente estudo reforçam a ideia de neutrófilos do leite com menor capacidade fagocítica podem ser associados à alta CCS, e pode ser considerado como uma ferramenta para identificar animais mais susceptíveis à infecções intramamárias.