Abstract in English:
Colonoscopy is a minimally invasive technique used to assess the large intestine through direct inspection of the intestinal mucosa. When associated with histopathological examination of fragments collected from the intestine, the definitive diagnosis can be obtained. This retrospective study evaluated colonoscopy and histopathological exams of the large intestine and ileum of dogs with gastrointestinal disorders admitted at the Veterinary Hospital of the Federal University of Minas Gerais (UFMG) and the Veterinary Hospital São Francisco de Assis to determine the frequency of injuries, their distribution in the intestinal segments, and the relationship of the findings observed in these two analyzes. The colonoscopy and histopathological findings of the case series were described using absolute and relative frequencies, as well as nature and intensity classification of the findings. Cohen’s Kappa coefficient was obtained to assess the concordance of nature and intensity classifications between colonoscopy and histopathology, and its 95% confidence interval constructed. The analyses were performed using the Software SAS University Edition. It was observed a moderate agreement between the classification of the nature of the findings by endoscopy and histopathology (Kappa coefficient = 0.39, CI = 0.20-0.59). This can also be observed when assessing the frequency of similar diagnoses between the methods, since only 39 (72.22%) were consistent, i.e., 15 (22.78%) diagnoses differed depending on the nature of the finding, which could have a great influence on the final diagnosis if histopathology was disregarded. For the intensity of the injuries, little agreement was observed between the methods (Kappa coefficient = 0.1243, C = -0.05-0.30). This was even more evident in the frequency of similar diagnoses in terms of intensity, of which 20 (37.04%) were similar and 34 (62.96%) were different. Inflammatory affections are the most frequently observed alterations in the large intestine and ileum of dogs. The most common finding that reveals inflammatory changes is the lymphoplasmacytic infiltrate. As for the proliferative and neoplastic lesions, adenomatous polyps and lymphoma were common. The most affected sites of the large intestine were the descending colon and the rectum. Findings such as edema and reddening of the mucosa were frequent by macroscopy. Although the changes observed by colonoscopy and histopathology may not be similar, these techniques are complementary, which makes biopsies mandatory for a diagnostic conclusion.
Abstract in Portuguese:
A colonoscopia é uma técnica pouco invasiva utilizada para avaliação do intestino grosso por meio de inspeção direta da mucosa intestinal. Quando associada ao exame histopatológico, com a coleta de fragmentos do intestino, o diagnóstico definitivo pode ser obtido. O objetivo desse estudo retrospectivo foi associar os achados de exames de colonoscopia e histopatologia do intestino grosso e íleo em 54 cães com distúrbios gastrointestinais dos Hospitais Veterinários da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) e São Francisco de Assis. Na colonoscopia, as alterações mais frequentemente observadas foram edema, friabilidade e avermelhamento de mucosa. Quanto à distribuição de lesões por segmento intestinal, houve maior incidência de alterações inflamatórias, das quais foram as mais frequentes, com o infiltrado linfoplasmocitário sendo o mais comum em todos segmentos analisados (i.e. reto, cólon, ceco e íleo). O cólon ascendente e o reto foram os locais de alterações mais frequentes na colonoscopia e na histopatologia. Os pólipos hiperplásicos e o linfoma foram as lesões proliferativas de ocorrência mais comum. Houve baixa concordância entre as classificações por natureza e intensidade dos achados na colonoscopia e histopatologia. Assim, não foi possível associar alterações descritas nos exames histopatológicos quanto à natureza e intensidade das lesões utilizando a colonoscopia, o que leva à conclusão de que é essencial a realização de biópsias em todos os exames para conclusão diagnóstica.
Abstract in English:
The aim of this study was the ultrasonographic evaluation of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of healthy snakes in the Boidae family. For such, 15 adult snakes from five species were evaluated: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi and Epicrates crassus. The animals were physically restrained for examination. After the application of acoustic gel over the scales the transducer was positioned in the frontal plane of the coelomic cavity. Microconvex and linear transducers at 10MHz were used. The ultrasound examination was conducted in the craniocaudal direction, with longitudinal and transversal sections to assess syntropy, echogenicity and echotexture of the organs. The liver was bilobulated, hyperechoic, homogeneous echotexture, hyperechoic capsule, with a hepatic lobe measuring 1.15±0.64cm wide, and the presence of a central hepatic vein, measuring 0.44±0.21cm in diameter. The gallbladder was characterized as an anechoic structure with echogenic walls and dimensions of 2.91±1.18cm x 1.38±0.84cm (length x width). The stomach showed a pleated and linear texture, echogenic, with hypoechoic walls measuring 0.3±0.07cm wide. The splenopancreas was a circular and echogenic structure, homogeneous echotexture and measuring 1.18±0.62cm in width and 1.56±0.88cm in length. The kidneys were characterized by elongated, lobulated, hypoechoic structures, an echogenic capsule and an echogenic central line, measuring 1.05±0.7cm in width. The testis were characterized by fusiform, hypoechoic structures, homogeneous echotexture, measuring 2.31±0.79cm in length and 0.6±0.23cm in width. Ovarian follicles were seen in different stages, 0.67±0.39cm wide and 0.73±0.38cm long. No differences were found between species of syntropy, echogenicity and echotexture of the organs of the coelomic cavity. The ultrasound examination proved to be a safe, non-invasive and efficient technique for characterizing the organs of the coelomic cavity of snakes.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do estudo foi realizar a avaliação ultrassonográfica de órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes hígidas da família Boidae. Para isto, foram avaliadas 15 serpentes adultas de cinco espécies: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi e Epicrates crassus. Os animais foram contidos fisicamente para a realização do exame. Após aplicação de gel acústico sobre as escamas, o transdutor foi posicionado no plano frontal da cavidade celomática. Foram utilizados transdutores microconvexo e linear em 10MHz. O exame ultrassonográfico foi conduzido no sentido craniocaudal, com cortes longitudinais e transversais para avaliar sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. O fígado se apresentou bilobulado, hiperecoico, ecotextura homogênea, cápsula hiperecoica, com lobo hepático medindo 1,15±0,64cm de largura, e presença de uma veia central hepática, medindo 0,44±0,21cm de diâmetro. A vesícula biliar foi caracterizada como uma estrutura anecoica de paredes ecogênicas e dimensões de 2,91±1,18cm x 1,38±0,84cm(comprimento x largura). O estômago apresentou-se com o aspecto pregueado e linear, ecogênico, com paredes hipoecoicas medindo 0,3±0,07cm de largura. O esplenopâncreasse apresentou como uma estrutura circular e ecogênica, ecotextura homogênea e medindo de 1,18±0,62cm de largura e 1,56±0,88cm de comprimento. Os rins se caracterizaram por estruturas alongadas, lobuladas, hipoecoicas, cápsula ecogênica e uma linha central ecogênica, medindo 1,05±0,7cm de largura. Os testículos foram caracterizados por estruturas fusiformes, hipoecoicas, ecotextura homogênea, medindo 2,31±0,79cm de comprimento e 0,6±0,23cm de largura. Foram visualizados folículos ovarianos em diferentes estágios, de 0,67±0,39cm de largura e 0,73±0,38cm de comprimento. Não foram encontradas diferenças entre espécies de sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos da cavidade celomática. O exame ultrassonográfico demonstrou-se uma técnica segura, não invasiva e eficiente para caracterização dos órgãos da cavidade celomática de serpentes.
Abstract in English:
Acute hepatotoxicity caused by plants poisoning is responsible for economic losses in farm animals in Brazil. Reports of Cestrum intermedium natural poisoning in cattle are not commonly described in Rio Grande do Sul (RS). This study aimed to document an outbreak of spontaneous C. intermedium poisoning in dairy cattle in the Central-Eastern Mesoregion of RS. Three nine-month-old Holstein and Jersey heifers were affected after they were placed in a small paddock with shortage forage. In this area, specimens of C. intermedium Sendtn with signs of consumption were observed. Morbidity and lethality rates were 100% and clinical courses ranged from 9 to 12 hours. At post mortem examination of the three heifers, there was predominance of acute liver lesions. The liver was moderately enlarged and on the cut surface there was a marked accentuation of the lobular pattern and hemorrhage. Inside the rumen, partially digested C. intermedium Sendtn leaves were observed. The histological aspects of the liver were mostly centrilobular coagulative necrosis and hemorrhage, frequently extended to the midzonal region. The immunohistochemistry technique was performed, in which the polyclonal antibody caspase 3 was used in liver fragments. Moderate to marked immunolabeling was observed in the cytoplasm and nucleus of hepatocytes, predominantly on the periphery of areas of hepatic necrosis indicating cell apoptosis. The diagnosis of C. intermedium Sendtn poisoning in dairy cattle in this study was based on epidemiological, clinical and anatomopathological findings. Since the C. intermedium poisoning is uncommon in dairy cattle, we are describing it for the first time in the Central-Eastern Mesoregion of RS, and represents a differential diagnosis of other acute toxic liver diseases in cattle.
Abstract in Portuguese:
Intoxicações por plantas que causam hepatotoxicidade aguda são responsáveis por prejuízos econômicos em animais de produção no Brasil. Relatos de intoxicações naturais por Cestrum intermedium em bovinos não são comumente descritos no Rio Grande do Sul (RS). Este trabalho teve como objetivo documentar um surto de intoxicação espontânea por C. intermedium em bovinos leiteiros ocorrido na região Centro-Oriental do RS. Três bovinos com nove meses de idade, das raças Holandês e Jersey, foram acometidos depois de serem introduzidos em um pequeno piquete com escassez de forragem. Nessa área foram observados exemplares de Cestrum intermedium Sendtn com sinais de consumo. As taxas de morbidade e letalidade foram de 100% e os cursos clínicos variaram de 9 a 12 horas. Na necropsia dos três bovinos, observou-se predomínio de lesões hepáticas agudas. O fígado dos animais acometidos estava moderadamente aumentado de tamanho e na superfície de corte havia marcada acentuação do padrão lobular e hemorragia. Na abertura do rúmen, foram observadas folhas de Cestrum intermedium Sendtn parcialmente digeridas. Histologicamente, o fígado apresentava necrose coagulativa centrolobular e hemorragia. Frequentemente, essas alterações se estendiam para a região mediozonal. Foi realizada a técnica de imuno-histoquímica, na qual utilizou-se o anticorpo policlonal caspase 3 em fragmentos de fígado. Notou-se marcação moderada a acentuada em citoplasma e núcleo de hepatócitos, predominantemente na periferia das áreas de necrose hepática indicando apoptose celular. O diagnóstico de intoxicação por Cestrum intermedium Sendtn nos bovinos leiteiros desse estudo, foi realizado com base nos achados epidemiológicos, clínicos e anatomopatológicos. A intoxicação por C. intermedium é incomum em bovinos leiteiros, sendo descrita pela primeira vez na região centro oriental do RS e representa um diagnóstico diferencial de outras hepatopatias tóxicas agudas.
Abstract in English:
The shape is one of the key features of a lesion and a pathologist must be able to identify and interpret these forms in the context of any gross and microscopic changes. One of the principles of adult learning is to engage the learner with previously understood information. If, when presenting material that is new, a connection with something the student already has familiarity with, the learning process is accelerated. As the learners are already familiar with shapes they have encountered throughout their pre-pathology learning, these can be used to hasten the incorporation and understanding of lesions. This paper describes various shapes that are used in describing lesions in veterinary pathology.
Abstract in Portuguese:
A forma é uma das principais características de uma lesão. Um patologista deve ser capaz de identificar e interpretar essas formas no contexto de quaisquer alterações macroscópicas ou microscópicas. Um dos princípios da aprendizagem de adultos é envolver o aluno com informações previamente compreendidas. Se, ao apresentar um material novo, se estabelece uma conexão com algo que o aluno já conhece, o processo de aprendizagem torna-se mais rápido e eficiente. Como os alunos já estão familiarizados com as formas que encontraram ao longo de sua aprendizagem pré-patologia, elas podem ser usadas para acelerar a incorporação e a compreensão das lesões. Este artigo descreve várias formas que são usadas na descrição de lesões em patologia veterinária.
Abstract in English:
This study aimed to assess liver damage and interferon-stimulated gene 15 (ISG15) blood expression as a consequence of embryonic signaling on maternal recognition of pregnancy in beef cattle presenting natural ingestion of Senecio spp. Epidemiological aspects, as the presence of the plant, associated to gamma glutamyl transferase (GGT) activity can be used as Senecio spp. poisoning diagnosis. Maternal recognition of pregnancy period occurs when the embryo secretes interferon tau (IFNT) to signal its presence to the mother and eventually extend corpus luteum (CL) lifespan. In our study, liver damage was determined by concentration serum GGT, cytological and histopathological examinations. Reproductive status was evaluated by concentration of progesterone, CL diameter and ISG15 mRNA expression on Day 19 following fixed-time artificial insemination (FTAI). Cows were categorized into two groups based on concentration of GGT: Group 1 (GGT<30U/L) and 2 (GGT>31U/L). No difference on body condition scores was observed. All the cows presented liver damage based on cytology and histopathological exams. Cows from the Group 1 had higher pregnancy rate, presenting larger CL diameter and greater concentration of progesterone. Interestingly, ISG15 mRNA expression had no difference between Groups 1 and 2, even presenting difference in pregnancy status. These findings suggest embryonic loss beyond Day 19. It suggests late embryonic mortality may be associated to liver insufficiency. In conclusion, liver injury and/or concentration of GGT does not alter ISG15 expression on blood neutrophils, however cows presenting lower concentration of GGT (<30U/L) had increased pregnancy status. Therefore, the concentration of GGT allow us to screen liver status and foresee a successful pregnancy in beef cattle.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste estudo foi avaliar a lesão hepática e a expressão sanguínea do gene estimulado por interferon 15 (ISG15) durante a sinalização embrionária, no reconhecimento materno da gestação, em bovinos de corte apresentando ingestão natural de Senecio spp. Fatores epidemiológicos, como a presença da planta, associados à atividade da gama glutamil transferase (GGT) podem ser utilizados como diagnóstico da intoxicação por Senecio spp. O reconhecimento materno da gestação ocorre quando o embrião secreta interferon tau (IFNT) para sinalizar sua presença à mãe. Em nosso estudo, a lesão hepática foi determinada pela concentração sérica de GGT, pelos exames citológicos e histopatológicos. O estado reprodutivo foi avaliado pela concentração de progesterona, diâmetro de corpo lúteo (CL) e expressão de mRNA ISG15 no Dia 19 após a inseminação artificial em tempo fixo (IATF). As vacas foram separadas em dois grupos com base na concentração de GGT sanguíneo: Grupo 1 (GGT<30U/L) e Grupo 2 (GGT>31U/L). Não foi observada nenhuma diferença no escore de condição corporal entre os grupos. Na citologia e nos exames histopatológicos todas as vacas apresentaram lesão hepática. As vacas do Grupo 1 apresentaram maior taxa de prenhez, maior diâmetro do CL e maior concentração de progesterona. Diferente do esperado, a expressão do mRNA ISG15 não foi diferente entre os Grupos 1 e 2, mesmo apresentando diferença na taxa de prenhez. Esses achados sugerem perda embrionária após o Ddia 19. Isso demonstra que a mortalidade embrionária tardia pode estar associada à insuficiência hepática. Dessa forma, conclui-se que a lesão hepática e/ou concentração de GGT não altera a expressão de ISG15 nos neutrófilos sanguíneos, porém vacas com menor concentração de GGT (<30U/L) apresentaram maiores taxas de prenhez. Assim, a concentração de GGT nos permite avaliar a saúde hepática e prever uma gestação bem-sucedida em bovinos de corte.
Abstract in English:
This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animal’s clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them. All diagnostic techniques showed positive cases in all groups analyzed. Each case was positive in at least two diagnostic methods. All cases that contained NBs were positive for rabies in the other tests. In this study, it was observed that the variables analyzed (intensity of injury and clinical evolution at the moment of euthanasia) had an influence only on HE and DSS techniques, which are based on NB research to form the diagnosis, but did not interfere with the effectiveness of the diagnosis performed by detecting the viral antigen performed by DFAT and IHC. All isolated RABV samples included in the present study have a genetic lineage characteristic of hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation of qRT-PCR showed that the amount of virus did not interfere in the positivity of the tests. This work shows that IHC and DFAT are safe diagnostic techniques. They are capable of detecting RABV even in euthanized animals in the early stages of clinical evolution with mild intensities of histological lesions.
Abstract in Portuguese:
Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas. Para verificar a influência da evolução clínica da doença foram criados 4 grupos de análise conforme o estado clínico do animal no momento da eutanásia, sendo: M1 = animal eutanasiado em estação, M2 = eutanasiado em decúbito esternal, M3 = eutanasiado em decúbito lateral, M4 = animal com morte natural. Dos 34 encéfalos avaliados a IHQ foi positiva em 100% dos casos, a IFD foi positiva em 97,05%, sendo que na amostra negativa a presença de RABV foi confirmada por IVCC. A histologia com HE, através da visualização das CNs, foi positiva em 88,23 % dos casos, e o teste de EDS, foi positivo em 82,35%. Todas as técnicas de diagnóstico apresentaram casos positivos em todos os grupos analisados. Cada caso foi positivo em, pelo menos, dois métodos de diagnóstico. Todos os casos que continham CN foram positivos para raiva nos demais testes. Nesse estudo observou-se que as variáveis analisadas intensidade de lesão e evolução clínica no momento da eutanásia tiveram influência somente nas técnicas de HE e EDS, que se baseiam na pesquisa do CN para formação do diagnóstico, mas não interferiram na eficácia do diagnóstico realizado através da detecção do antígeno viral realizado por IFD e IHQ. Todas as amostras RABV isoladas incluídas no presente estudo apresentam linhagem genética característica de morcegos hematófagos Desmodus rotundus. A avaliação de qRT-PCR demostrou que a quantidade de vírus não interferiu na positividade dos testes. Esse trabalho mostra que a IHQ e a IFD são técnicas seguras de diagnóstico e que mesmo em animais eutanasiados em estágios iniciais de evolução clínica com intensidades leve de lesões histológicas, são capazes de detectar o RABV.
Abstract in English:
Histopathology is an old science that is still currently utilized for disease diagnosis and research. The routinely processed histologic slides stained with hematoxylin and eosin are still used worldwide in most if not every histopathology laboratory. The technique is inexpensive, quick to perform, and allows the diagnosis of a fantastic variety of tissue changes and diseases. Skills in description and interpretation in histopathology are a craft that can be learned by repeatedly and systematically observing simple rules. In this article, we offer a few advices to help trainees in veterinary pathology at the start of their careers. Those advices are drawn from our experience in the diagnostic pathology routine and from the veterinary pathology literature. To enhance the understanding of these important steps in the histopathologic description of tissues, we decided to illustrate most concepts expressed here. We hope that our effort can add a bit to the development of future pathologists. Just like Alice, let us follow the White Rabbit into his burrow for this challenging experience!
Abstract in Portuguese:
A histopatologia é uma ciência antiga, mas ainda usada para diagnosticar e investigar a patogênese de doenças. As lâminas histológicas processadas rotineiramente e coradas por hematoxilina e eosina ainda são utilizadas em virtualmente todos os laboratórios de histopatologia do mundo. A técnica não é cara, é de execução rápida e permite o diagnóstico de uma fantástica variedade de doenças. As habilidades em descrever e interpretar os achados histopatológicos é um ofício que pode ser aprendido pela observação repetida e sistemática de regras simples. Para ajudar os estudantes de patologia no início de suas carreiras, abordamos aqui algumas dessas regras, extraídas tanto de nossa experiência quanto da literatura relacionada à patologia veterinária. Para aumentar a compreensão dos tópicos, decidimos ilustrar praticamente todos os conceitos expressados neste manuscrito. Esperamos que nosso esforço possa contribuir um pouco para o desenvolvimento de aspirantes a patologistas. Assim como Alice no País das Maravilhas, vamos seguir o coelho branco até a sua toca para essa aventura desafiadora.
Abstract in English:
Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.
Abstract in Portuguese:
O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.
Abstract in English:
Bovine tuberculosis (BTB) is a zoonosis caused by the bacterium Mycobacterium bovis, which induces the development of nodular and granulomatous lesions in various animal tissues. The recognition of these suggestive gross lesions during postmortem sanitary inspection in slaughterhouses provides a presumptive diagnosis, which requires the use of complementary tests to confirm the disease. This study aimed to verify the occurrence of BTB in cattle slaughtered in slaughterhouses in the state of Ceará, Brazil, using bacteriological and molecular methods. To this end, suggestive lesions were analyzed on carcasses condemned by the “Serviço de Inspeção Estadual” (SIE). The samples were submitted to microbiological analysis using culture media and specific staining followed by spoligotyping molecular technique for identification and genotyping of the mycobacteria. Occurrence of lesions suggestive of BTB was verified in bovine carcasses (0.071%) from different municipalities of the state. These lesions were located mainly in the lung (95.12%), lymph nodes (58.53%), and liver (36.58%). Microbiological culture showed bacterial isolation (17.94%), with the growth of colonies showing morphological and tannic characteristics belonging to genus Mycobacterium spp. Genetic polymorphism analysis identified M. bovis in all isolates, which were discriminated into six spoligotypes (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870, and SB0852). These profiles have been described in Brazil and several areas of the world, except for profiles SB1064 and SB0852, which were described in the country for the first time. The results show that the association of the diagnostic methods used was the basis for the first study on identification of mycobacteria found in the state, which may provide a database for the epidemiological study of BTB in the state of Ceará.
Abstract in Portuguese:
A tuberculose bovina (TB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, o qual induz ao desenvolvimento de lesões nodulares e granulomatosas em vários tecidos do animal. O reconhecimento dessas lesões macroscópicas sugestivas durante a inspeção sanitária post mortem em matadouros fornece um diagnóstico presuntivo, sendo necessário a utilização de testes complementares para confirmação da doença. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência da TB em animais abatidos em matadouros-frigoríficos no estado do Ceará através da utilização de métodos bacteriológicos e moleculares. Para tanto, foram analisadas lesões sugestivas de TB em carcaças condenadas pelo Serviço de Inspeção Estadual (SIE). As amostras foram submetidas à análise microbiológica, utilizando meios de cultivo e de coloração específicos, seguida pela técnica molecular spoligotyping para identificação e tipificação genética da micobactéria. Verificou-se a ocorrência de lesões sugestivas de TB em carcaças bovinas (0,071%) oriundas de diferentes municípios do estado do Ceará. Essas lesões estavam localizadas principalmente no pulmão (95,12%), linfonodos (58,53%) e fígado (36,58%). O cultivo microbiológico obteve isolamento bacteriano (17,94%), com o crescimento de colônias apresentando características morfológicas e tintoriais pertencentes ao gênero Mycobacterium spp. A análise do polimorfismo genético identificou a presença de M. bovis em todos os isolados, que foram discriminados em seis espoligotipos (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870 e SB0852), descritos no Brasil e em diversas áreas do mundo, exceto os perfis SB1064 e SB0852 que foram descritos pela primeira vez no país. Os resultados obtidos demonstram que a associação dos métodos diagnósticos utilizados foram a base do primeiro estudo de identificação das micobactérias encontradas no estado do Ceará, o que pode contribuir para a criação de um banco de dados para o estudo epidemiológico da TB no estado.
Abstract in English:
This study aimed to analyze the parasites infesting pigs and their producers on family farms in Tanguá, RJ, Brazil, and to conduct extension activities between 2018 and 2019. Fecal samples were collected from 132 pigs, as well as, skin scrapings from the ears of 125 animals. In addition, 36 stool specimens from farmers and their families were analyzed. The collected material was processed by direct examination, sedimentation and flotation techniques. Gastrointestinal parasites were detected in 88.6% of the pigs, especially coccidia (71.8%), Balantioides coli (55%), strongyles (40.2%) and Strongyloides ransomi (31.6%) which showed statistically significance (p<0.05). Ectoparasites were identified in 16% of the pigs, mostly Sarcoptes scabiei var. suis (76.2%). Parasites were detected in 19.4% of the humans, including, Entamoeba coli (19.4%), Ascaris lumbricoides (8.3%) and Trichuris trichiura (5.5%). The frequency of B. coli and S. scabiei var. suis (p<0.05) were statistically significant, when analyzing the age group of the animals, having been more detected in the older years, fatterners phase. The pig farmers participated in these activities extension, which included lecture and “field day”, aimed at imparting information about parasites and their prophylaxis. The situation in Tanguá pig farms reinforces the need to carry out programs that provide technical support to these farmers, whose livelihood depends on pig farming.
Abstract in Portuguese:
Este estudo objetivou analisar os parasitos que infectam suínos e seus produtores em propriedades familiares em Tanguá, RJ, Brasil, realizando atividades extensionistas entre 2018 e 2019. Amostras fecais foram coletadas de 132 suínos, bem como raspados da pele da orelha de 125 animais. Além disso, 36 amostras fecais dos produtores e seus familiares foram analisadas. O material coletado foi processado pelo exame direto e por técnicas de sedimentação e flutuação. Parasitos gastrointestinais foram detectados em 88,6% dos suínos, principalmente coccídios (71,8%), Balantioides coli (55%), estrôngilos (40,2%) e Strongyloides ransomi (31,6%) que apresentaram significância estatística (p<0,05). Ectoparasitos foram identificados em 16% dos suínos, principalmente Sarcoptes scabiei var. suis (76,2%). Parasitos foram detectados em 19,4% das amostras fecais humanas, incluindo Entamoeba coli (19,4%), Ascaris lumbricoides (8,3%) e Trichuris trichiura (5,5%). A frequência de B. coli e S. scabiei var. suis foi estatisticamente significativa (p<0,05), quando se analisou os animais por faixa etária, tendo sido principalmente detectado nos animais mais velhos, como na fase de terminação. Os produtores de suínos participaram ativamente das atividades de extensão, incluído a palestra e a atividade “dia de campo”, que tinham como objetivo mediar informações sobre parasitos e suas medidas profiláticas. A situação nas granjas familiares de Tanguá demonstra a necessidade de realização de programas que apoiem tecnicamente esses produtores, que utilizam a suinocultura como fonte de subsistência.