PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Motta R.G., Motta I.G., Martinez A.C., Da Silva A.V., Paes A.C., Martins L.S.A., Da Silva R.C. & Ribeiro M.G. 2016. Unusual caudal vena cava thrombosis in a cow, secondary to Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes infection. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):587-590. Departamento de Higiene Veterinária e Saúde Pública, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: farturavetufpr@hotmail.com The caudal vena cava thrombosis, or pulmonary thromboembolism, in cattle is correlated with lactic acidosis, caused by diets rich in grains and highly fermentable, associated or not to septic situations, used in feedlots of beef or high-producing dairy cattle. This paper reports an unusual caudal vena cava thrombosis in a cow, secondary to Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes infection, resulting in reduced milk production, anorexia, pale mucous membranes, ruminal atony, sternal decubitus and autoauscultation position. The heart was enlarged at necropsy, presence of clots distributed along the thoracic cavity, adherence between lung and pleura, abscesses, emphysema, petechiae, suffusions and ecchymosis in lungs, thickening of the caudal vena cava wall, hepatomegaly with chronic passive congestion (“nutmeg” aspect), and rumenitis. In lab, the actinomycete Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes was isolated from liver and lung samples, probably resulting through dissemination of the bacteria of the rumen content, what reaffirms the opportunistic behavior of this actinomycete.

• Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes acidosis thromboembolism acidose tromboembolismo

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Motta R.G., Motta I.G., Martinez A.C., Da Silva A.V., Paes A.C., Martins L.S.A., Da Silva R.C. & Ribeiro M.G. 2016. Unusual caudal vena cava thrombosis in a cow, secondary to Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes infection. [Rara trombose da veia cava caudal em bovino, secundária à infecção por Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):587-590. Departamento de Higiene Veterinária e Saúde Pública, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: farturavetufpr@hotmail.com A síndrome da veia cava caudal ou tromboembolismo pulmonar bovino está relacionada à acidose láctica causada por dietas ricas em grãos e altamente fermentáveis, associados ou não a quadros sépticos, usadas em confinamentos de bovinos de corte ou para vacas leiteiras de alta produção. O presente artigo reporta caso raro de trombose da veia cava caudal em uma vaca, secundária a infecção por Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes, apresentando reduzida produção de leite, anorexia, palidez de mucosas, atonia ruminal, decúbito esternal e posição de autoauscultação. À necrópsia observou-se coração aumentado de tamanho, coágulos distribuídos por toda cavidade torácica, aderência entre os pulmões e pleura, abscessos, enfisema, petéquias, sufusões, equimoses nos pulmões, espessamento da parede da veia cava caudal com trombo, hepatomegalia com congestão passiva crônica (aspecto de “noz moscada”), e ruminite. Em laboratório isolou-se o actinomiceto Trueperella (Arcanobacterium) pyogenes a partir de amostras de fígado e pulmão, provavelmente resultando da disseminação da bactéria proveniente do conteúdo ruminal, e reafirma o comportamento oportunista deste actinomiceto.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Barbosa J.D., Silva J.B., Lima D.H.S., Araújo L.H.V., Santos L.L., Belo Reis A.S., Salvarani F.M. & Brito M.F. 2016. [Detection and treatment of otitis by Rhabditis blumi in cattle of northern Brazil.] Detecção e tratamento de otite por Rhabditis blumi em bovinos da região Norte do Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):605-610. Instituto de Medicina Veterinária, Campus de Castanhal, Universidade Federal do Pará, Rodovia BR-316 Km 61, Castanhal, PA 68741-740, Brazil. E-mail: diomedes@ufpa.com This study aimed to describe the occurrence of parasitic otitis caused by Rhabditis blumi in dairy cattle of the Gir race from a farm in northern Brazil. Forty-two samples were collected from cattle by swab washed from the external auditory canal (EAC). On clinical examination, in 71.4% (30/42) of the cattle the parasite was found in the cerumen of the ear canal, along with alopecia of head and hump caused by discomfort and itching of the auricular region. At microscopic analysis of material from the conjunctival sac the parasite was found in 90% (9/10) of the evaluated cattle. In addition, 9.5% (4/42) of the cattle showed nervous symptoms, such as mild to moderate rotation of the head, apathy, flaccid lips and unilateral ptosis, change in chewing and food accumulation in the oral cavity. Thirty cattle positive for Rhabditis spp. were randomly divided into three groups of 10 animals each: (G1) Cattle Control, (G2) Cattle treated with ivermectin 1% pour-on, and (G3) Cattle undergoing wash of the external auditory canal (EAC). Each treatment was repeated three times with intervals of seven days. In G1, 10 cattle remained infected throughout the study. In G2, 20% of the cattle were negative after the first two treatments, however were positive at the third evaluation. In G3, all cattle remained positive, but with decrease in parasite load. Identification by molecular analysis of amplified fragments through the expansion D2/D3 28S rDNA confirmed the presence of only Rhabditis blumi. Based on clinical, morphologic and molecular examination, it appears to be the first report of the occurrence of R. blumi infection in Gir cattle in the State of Pará, due to the purchase of cattle from areas where parasitic otitis has been diagnosed, as from Minas Gerais, to produce crossbred animals (Gir x Holstein). This emphasizes the importance of prior clinical examination by the veterinary service in order to transfer only healthy animals to other properties or regions. This appears also to be the first report on R. blumi infection of the conjunctival sac in cattle. Treatment with ivermectin in G2 did not produce clinical improvement.

• 28S gene ivermectin Rhabditis blumi gene 28S Ivermectina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Barbosa J.D., Silva J.B., Lima D.H.S., Araújo L.H.V., Santos L.L., Belo Reis A.S., Salvarani F.M. & Brito M.F. 2016. [Detection and treatment of otitis by Rhabditis blumi in cattle of northern Brazil.] Detecção e tratamento de otite por Rhabditis blumi em bovinos da região Norte do Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):605-610. Instituto de Medicina Veterinária, Campus de Castanhal, Universidade Federal do Pará, Rodovia BR-316 Km 61, Castanhal, PA 68741-740, Brazil. E-mail: diomedes@ufpa.com O presente estudo teve como objetivo descrever a ocorrência de otite parasitária causada por Rhabditis blumi em bovinos leiteiros de raça Gir de uma fazenda da região Norte do Brasil. Foram coletadas amostras de 42 bovinos por swab e lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Ao exame clínico, 9,5% (4/42) dos bovinos apresentavam sintomatologia nervosa, como leve a moderada rotação da cabeça, apatia, flacidez dos lábios e ptose palpebral unilateral, alopecia das regiões da cabeça e cupim, causados pelo desconforto e prurido da região auricular, alteração na mastigação e acúmulo de alimento na cavidade oral. Adicionalmente, 71,4% (30/42) dos abovinos mostraram a presença do parasita no cerúmen dos condutos auditivos. À análise microscópica do material do saco conjuntival foi observado presença do parasita em 90% (9/10) dos bovinos avaliados. Os 30 bovinos positivos para Rhabditis spp. foram distribuídos aleatoriamente em três grupos de 10 animais: (G1) Bovinos controle, (G2) Bovinos tratados com ivermectina 1% pour on e (G3) Bovinos submetidos a lavado dos condutos auditivos externos (CAE). Cada tratamento foi repetido três vezes com intervalo de sete dias. No G1 os 10 bovinos mantiveram-se infectados durante todo o estudo. No G2 20% dos bovinos foram negativos após os dois primeiros tratamentos, porém, mostraram-se positivos na terceira avaliação. No G3 todos os bovinos mantiveram-se positivos, sendo observada apenas diminuição da carga parasitária. A identificação por análise molecular por meio de fragmentos amplificados da expansão D2/D3 do 28S rDNA confirmou a presença apenas da espécie Rhabditis blumi nos animais. Baseado nas observações clínicas, morfológicas e moleculares pode-se relatar o primeiro caso de R. blumi em bovinos da raça Gir no Estado do Pará, através da compra de animais oriundos de áreas onde a otite parasitária tem sido diagnosticada, principalmente de Minas Gerais, para formar animais mestiços (Gir x Holandês). Desta forma ressalta-se a importância do exame clínico prévio dos animais a serem transferidos para outras propriedades ou regiões. Este relato também parece ser o primeiro sobre a presença de R. blumi no saco conjuntival de bovinos. O tratamento com ivermectina no G2 não surtiu melhora clínica dos bovinos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Argolo Neto N.M., Del Carlo R.J., Monteiro B.S., Nardi N.B., Chagastelles P.C., Brito A.F.S., Reis A.M.S. & Silva L.M.C. 2016. Role of the autologous mesenchymal stem cells compared with platelet rich plasma on cicatrization of cutaneous wounds in diabetic mice. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):617-624. Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinária, Universidade Federal do Piauí, Campus Socopo, Teresina, PI 64049-550, Brazil. E-mail: argolo_napoleao@ufpi.edu.br Chronic cutaneous lesions affect 15% of diabetic human patients and represent a risk 15 to 46 times larger of limb amputations compared to people with normal glycemia. It is assumed that half of these amputations could be prevented by early treatment of wounds, for example, with proper cell therapy. Objectives: In this study, the action of the autologous transplant of mesenchymal stem-cells (MSC) was evaluated compared to the treatment with autologous platelet rich plasma (PRP) in the cicatrization of cutaneous lesions induced in diabetic mice. These animals were previously treated with streptozootocin to induce diabetes mellitus and round wounds of 1.5cm in diameter were created in the posterior region. Diameters of the wounds and healing time were evaluated during 30 days and the results were submitted to variance analysis and Tukey’s test average. It was noticed that the animals treated with MSC presented a more accelerated cicatrization of the cutaneous lesion than the animals treated with PRP. However, the treatment with PRP presented better results than just the daily asepsis of the lesions with saline or covering them with semi-permeable bandage. Besides, the use of semi-permeable bandage kept the cutaneous lesions of diabetic mice did not interfere negatively with cicatrization, proved to be harmless to use, but kept the cutaneous lesions more hydrated than the ones exposed to the environment.

• Cicatrization wound healing mesenchymal stem cells diabetes mellitus cicatrização células-tronco mesenquimais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Argolo Neto N.M., Del Carlo R.J., Monteiro B.S., Nardi N.B., Chagastelles P.C., Brito A.F.S., Reis A.M.S. & Silva L.M.C. 2016. Role of the autologous mesenchymal stem cells compared with platelet rich plasma on cicatrization of cutaneous wounds in diabetic mice. [Papel das células-tronco mesenquimais autólogas em comparação com plasma rico em plaquetas na cicatrização de feridas cutâneas em camundongos diabéticos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(7):617-624. Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinária, Universidade Federal do Piauí, Campus Socopo, Teresina, PI 64049-550, Brazil. E-mail: argolo_napoleao@ufpi.edu.br Lesões cutâneas crônicas afetam 15% dos pacientes diabéticos e humanos representam um risco 15 a 46 vezes maior de amputações de membros em comparação com as pessoas com a glicemia normal. Supõe-se que a metade destas amputações poderia ser evitada por meio do tratamento precoce das feridas cutâneas com, por exemplo, uma adequada terapia celular. Objetivos: Neste estudo, a ação do transplante autólogo de células estaminais mesenquimais (MSC) foi avaliada em comparação com o tratamento com plasma rico em plaquetas autólogo (PRP) na cicatrização de lesões cutâneas induzidas em camundongos diabéticos. Estes animais foram previamente tratados com estreptozotocina para induzir diabetes mellitus e feridas redondas de 1,5 cm de diâmetro foram criadas na região posterior. Os diâmetros dos ferimentos e tempo de cicatrização foram avaliados durante 30 dias e os resultados foram submetidos à análise de variância e média pelo teste de Tukey. Verificou-se que os animais tratados com MSC apresentam uma cicatrização mais acelerada da lesão cutânea que do que os animais tratados com PRP. No entanto, o tratamento com PRP apresentou melhores resultados do que apenas a assepsia das lesões diariamente com solução salina ou cobrindo-os com atadura semi-permeável. Além disso, a utilização de atadura semi-permeável mantidas as lesões cutâneas de camundongos diabéticos não interfere negativamente com a cicatrização, provou ser inofensiva para usar, mas manteve as lesões cutâneas hidratadas mais do que os expostos ao meio ambiente.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Silva R.B.S., Mendes R.S., Santana V.L., Souza H.C., Ramos C.P.S., Souza A.P., Andrade P.P. & Melo M.A. 2016. [Epidemiological aspects of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraiba and analysis of diagnostic techniques.] Aspectos epidemiológicos da leishmaniose visceral canina na zona rural do semiárido paraibano e análise de técnicas de diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira. 36(7):625-629. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal de Campina Grande, Campus de Patos, Av. Universitária s/n, Bairro Santa Cecília, Patos, PB 58708-110, Brazil. E-mail: marcia.melo@pq.cnpq.br Visceral leishmaniasis is caused by Leishmania infantum in Brazil. It is a chronic disease and often a fatal zoonosis and considered as a serious worldwide public health problem and recognized by the World Health Organization as one of seventeen “Neglected Tropical Diseases”. This study was conducted in 2012 in the county of Patos, in Paraíba State semiarid region. The main purposes were to estimate the prevalence and the risk factors of canine visceral leishmaniasis (CVL), and to evaluate the performance of serological tests. Serological prevalence was determined using three techniques (ELISA, IFA and DPP chromatographic immunoassay - Dual Path Platform). ELISA was the golden standard, since it is the confirmatory test for CVL as established by the Brazilian Ministry of Health. In total, 362 blood samples were collected and were considered positive if positive by two serological assays. Positive samples were tested by PCR and qPCR. An epidemiological questionnaire was applied to the dog owner to identify risk factors associated with CVL. The seroprevalence was 11.33% (41/362). Chromatographic immunoassay - DPP showed a sensitivity of 58% (95%, CI: 0.43 to 0.72) and specificity of 96% (95%, CI: 0.93-0.98) , with a Kappa index of 0.5. The IFA had a sensitivity of 85% (95%, CI: 0.72 to 0.94), specificity of 99% (95%, CI: 0.98 to 1) and Kappa value of 0.8. The risk factor identified in the multivariate analysis was gender (OR=2.15 [1.09 to 4.21]), male dogs having 2.15 times more chance of being infected. The increased likelihood can possibly be explained by the use of male dogs for hunting and as guard dogs, two factors that increase dog contact to infected sandflies. Due to the prevalence rates, it should be recommended control measures against canine visceral leishmaniasis. The results demonstrated that the Chromatographic immunoassay (DPP-Dual Path Platform) is not the best technique for screening positive animals due to its low sensitivity, suggesting its replacement by ELISA.

• Leishmaniasis Kinetoplastidae Leishmania sp. leishmaniose visceral

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Silva R.B.S., Mendes R.S., Santana V.L., Souza H.C., Ramos C.P.S., Souza A.P., Andrade P.P. & Melo M.A. 2016. [Epidemiological aspects of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraiba and analysis of diagnostic techniques.] Aspectos epidemiológicos da leishmaniose visceral canina na zona rural do semiárido paraibano e análise de técnicas de diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira. 36(7):625-629. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal de Campina Grande, Campus de Patos, Av. Universitária s/n, Bairro Santa Cecília, Patos, PB 58708-110, Brazil. E-mail: marcia.melo@pq.cnpq.br No Brasil, a leishmaniose visceral é causada pela Leishmania infantum. É uma zoonose crônica e, frequentemente, fatal, sendo considerada um grave problema de saúde pública no mundo e reconhecida pela Organização Mundial de Saúde como uma das dezessete “Doenças Tropicais Negligenciadas”. O presente estudo foi realizado em 2012, na zona rural do município de Patos, semiárido paraibano, com o objetivo de estimar a prevalência, os fatores de risco da leishmaniose visceral canina (LVC) na região e avaliar os testes de diagnóstico sorológico. Foram coletadas 362 amostras de sangue e a prevalência da infecção foi determinada através de três técnicas sorológicas (ELISA, RIFI e Teste Imunocromatográfico DPP - Dual Path Plataform), sendo consideradas positivas as amostras que apresentaram pelo menos dois testes reagentes. As amostras positivas na sorologia foram testadas na PCR e qPCR. Aplicou-se um questionário epidemiológico aos proprietários para identificação dos possíveis fatores de risco. A taxa de prevalência foi de 11,33% (41/362). Considerou-se o ELISA como padrão ouro, já que é o teste confirmatório para a LVC pelo Ministério da Saúde. O DPP (Dual Path Plataform) apresentou sensibilidade de 58% (95% CI: 0,43-0,72) e especificidade de 96% (95% CI: 0,93-0,98), com índice Kappa de 0,57. A RIFI apresentou sensibilidade de 85% (95% CI: 0,72-0,94), especificidade de 99% (95% CI: 0,98-1) e valor Kappa de 0,88. O fator de risco identificado na análise multivariada por regressão logística múltipla foi o sexo (OR=2,15 [1,09-4,21]) e os cães machos apresentaram 2,15 vezes mais chances de serem infectados, que pode ser justificado por serem mais utilizados para a caça e como cão de guarda, dois fatores que aumentam a exposição do animal ao flebótomo. Em função da taxa de prevalência encontrada, indica-se a aplicação de medidas de controle no município. Os resultados da comparação dos ensaios sorológicos demonstraram que o DPP (Dual Path Plataform) não é a melhor técnica para triagem dos animais positivos em função da baixa sensibilidade do método, sugerindo que o mesmo seja substituído pelo ELISA.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Olinda R.G., Viana G.A., Rodrigues C.M.F., Silva TM.F., Lucena R.B., Bezerra F.S.B. & Batista J.S. 2016. Extramedullary plasmacytoma in a captive collared peccary (Pecari tajacu). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(6):516-519. Departamento de Ciências Animais, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, BR-110 Km 47, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: rgumes@hotmail.com An extramedullary plasmacytoma case in a captive collared peccary (Pecari tajacu) is reported. The animal, a female aging three years old, had a medical history of diffusely distributed skin and mucocutaneous junction lesions, associated with swollen lymph nodes. Clinical examination and complementary exams (complete blood count, biochemical analysis, skin scraping to search mites and fungal culture) were performed. Thirty days after examination, the animal died. At necropsy, multiple consistent nodules, aseptic pustules and swollen lymph nodes were found. On histological exams of the skin and oral mucosa, we observed a large number of round cells forming masses organized in nests, sheets, and cords of cells in a well-vascularized fibrovascular tissue. Neoplastic plasma cells infiltrated between the fibers and the lamina propria of smooth muscle. Spaces among the cell masses were filled with some eosinophil and fluid. Most of the cells were well differentiated, presenting a perinuclear clear zone. In some points, the cells were pleomorphic. The plasma cells presented eccentric, basophilic and spherical nuclei, showing a dense to organized chromatin with distinct nucleoli. Binucleate cells were observed, but multinucleated giant cells were rare. Oral mucosa and lymph nodes tested by immunohistochemical analyses were positive for Mb-1, with a multifocal distribution. In regard to Bcl-2, the neoplastic cells were intermittent weakly positive. So, an extramedullary plasmacytoma was diagnosed in the collared peccary considering the location, the histopathological and immunohistochemical findings.

• Collared peccary Pecari tajacu plasmacytoma cateto plasmocitoma mucocutâneo

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Olinda R.G., Viana G.A., Rodrigues C.M.F., Silva TM.F., Lucena R.B., Bezerra F.S.B. & Batista J.S. 2016. Extramedullary plasmacytoma in a captive collared peccary (Pecari tajacu). [Plasmocitoma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu).] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(6):516-519. Departamento de Ciências Animais, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, BR-110 Km 47, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: rgumes@hotmail.com Um caso de plasmoci- toma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu) está sendo relatado. O animal, uma fêmea com três anos de idade, apresentou um histórico médico de lesões de pele, envolvendo junção mucocutânea e de aumento de linfonodos. Exame clínico e exames complementares (hemograma completo, análise bioquímica, raspado de pele para pesquisa de ácaros e cultura fúngica) foram realizados. Após 30 dias, o animal morreu. Na necropsia, verificou-se a presença de múltiplos nódulos, pústulas assépticas e aumento dos linfonodos. Na pele e mucosa oral, histologicamente as massas consistiam em ninhos, lençóis e cordões de células redondas, e um estroma fibrovascular bem vascularizado. Os plasmócitos foram observados infiltrados entre as fibras e músculo liso da lâmina própria. Espaços contendo eosinófilos, fluido e células livres estavam presentes na massa. A maioria das células estava bem diferenciada, com uma zona perinuclear clara, mas algumas células demonstraram-se pleomórficas. Os plasmócitos apresentavam núcleo excêntrico, redondo, basófilo, e pontilhado, com cromatina variando de densa a grosseiramente organizada e nucléolos distintos. O citoplasma finamente granular de anfifílico para basofílico. As células foram interpretadas como plasmócitos neoplásicos. Células binucleadas foram observadas e células gigantes multinucleadas eram raras. Na imunohistoquímica de tecidos da mucosa oral e de linfonodos observou-se positividade moderada e multifocal para Mb-1. As células tumorais revelaram positividade fraca e intermitente para Bcl-2. Com base na localização, achados histopatológicos e imuno-histoquímicos, um plasmocitoma extramedular foi diagnosticado.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Faita T., Silva V.N., Sattin W.R., Pinheiro A.O. & Ambrósio C.E. 2016. [Amniotic membrane: alternative source of mesenchymal stromal cells in several animals species.] Membrana amniótica: fonte alternativa de células-tronco mesenquimais em diversas espécies animais. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(6):520-525. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade de São Paulo, Rua Duque de Caxias Norte 225, Campus Fernando Costa, USP, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-maol: ceambrosio@usp.br The increasing interest for the use of stem cells in regenerative medicine, is based on their self-renewal capacity, tissue repair and immunomodulation. The therapy with stem cells is a science in formation considered a promising therapeutic alternative for the treatment of various degenerative, hereditary and inflammatory disorders. The search for alternative sources of stem cells of easy obtention and isolation has led to the study of various tissues, includng embryonic attachments such as the amniotic membrane. However for effective therapeutic application are needed studies of the characteristics in vitro and preclinical and clinical trials. Thus, the aim of this study was a literature review regarding the characterization and clinical application of stem cells from the amniotic membrane in several domestic animal species.

• Stem cells amnion mesenchymal cells células-tronco âmnio células mesenquimais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Faita T., Silva V.N., Sattin W.R., Pinheiro A.O. & Ambrósio C.E. 2016. [Amniotic membrane: alternative source of mesenchymal stromal cells in several animals species.] Membrana amniótica: fonte alternativa de células-tronco mesenquimais em diversas espécies animais. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(6):520-525. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade de São Paulo, Rua Duque de Caxias Norte 225, Campus Fernando Costa, USP, Pirassununga, SP 13635-900, Brazil. E-maol: ceambrosio@usp.br O crescente interesse do uso de células-tronco (CTs) na medicina regenerativa, estão baseadas na sua capacidade de autorrenovação, reparação tecidual e imunomodulação. A terapia utilizando células-tronco é uma ciência em formação considerada uma alternativa terapêutica promissora no tratamento de diversas patologias degenerativas, hereditárias e inflamatórias. A busca por fontes alternativas de CTs que possuam características como fácil obtenção e isolamento, tem levado ao estudo dos mais variados tecidos, onde se inclui os anexos embrionários como a membrana amniótica. Porém, para sua efetiva aplicação terapêutica são necessários estudos de suas características “in vitro”, além de testes pré-clínicos e clínicos. Com isso, o objetivo deste trabalho é realizar uma revisão bibliográfica sobre a caracterização e aplicação clínica das células-tronco da membrana amniótica em diversas espécies de animais domésticos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Silva F.C., Sargo R.F., Sousa L.C., Rio-Maior H., Brandão R., Santos N., Álvares F. & Dias I.R. 2016. Treatment of a forelimb fracture and rehabilitation of a free-ranging Iberian Wolf (Canis lupus signatus). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(5):412-416. Departamento de Ciências Veterinárias, Escola de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro, Cx. Postal 1013, Vila Real, 5000-801, Portugal. E-mail: idias@utad.pt The surgical treatment of an exposed compounded comminuted fracture of the right radius and ulna in a free-ranging adult female Iberian Wolf (Canis lupus signatus) with an osteosynthesis plate and screws and subsequent post-operative care are described. The evolution of the fracture healing was very similar to those expected in a dog of the same size. The prompt surgical intervention and a proper housing, feeding and wound management adapted to a free-ranging wolf, in view to reduce manipulation and post-operative complications, allowed the subsequent rehabilitation and release of the animal. After 10th post-operative weeks the wolf was fitted with a Global Positioning System (GPS) for wildlife tracking collar and released in the same area where it has been caught. GPS telemetry data showed that the animal covered increasingly large distances confirming a complete functionality of the right thoracic limb and its successfully return to the wild. This report could constitute the first detailed report of a long bone fracture treatment in a free-ranging wolf and its successfully rehabilitation, release and adaptation to the wild.

• Wolf Canis lupus signatus radius ulna fracture osteosynthesis lobo Ibérico rádio ulna fratura osteossíntese

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Silva F.C., Sargo R.F., Sousa L.C., Rio-Maior H., Brandão R., Santos N., Álvares F. & Dias I.R. 2016. Treatment of a forelimb fracture and rehabilitation of a free-ranging Iberian Wolf (Canis lupus signatus). [Osteossíntese de fratura localizada no membro torácico num Lobo Ibérico (Canis lupus signatus) selvagem e sua reabilitação.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(5):412-416. Departamento de Ciências Veterinárias, Escola de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro, Cx. Postal 1013, Vila Real, 5000-801, Portugal. E-mail: idias@utad.pt O objetivo do presente artigo é a descrição da realização da estabilização de uma fratura cominutiva exposta do rádio e ulna do membro torácico direito em Lobo Ibérico selvagem por meio de osteossíntese com placa e parafusos ósseos bem como o manejo pós-operatório. A evolução da cicatrização da fratura óssea foi similar à esperada num canídeo doméstico de porte idêntico. A intervenção cirúrgica realizada rapidamente, bem como o alojamento adequado, alimentação e manejo adaptado a um lobo selvagem, visando minimizar a manipulação e o aparecimento de possíveis complicações pós-operatórias permitiram o sucesso na reabilitação e posterior libertação do animal. Na 10ª semana pós-operatória foi colocado um colar GPS no animal para deteção permanente da sua localização, tendo sido o animal libertado na mesma área onde havia sido capturado. Os dados obtidos por telemetria GPS demostraram que o lobo percorreu distâncias consideráveis, confirmando a completa recuperação do membro torácico direito e o sucesso da sua reintrodução na natureza. Este artigo poderá constituir a primeira descrição pormenorizada sobre a estabilização de fratura de ossos longos em um lobo selvagem com a sua posterior reintrodução na vida selvagem com sucesso.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Agopian R.G., Guimarães K.P., Fernandes R.A., Silva M.V.M., Righetti M.M.S., Prisco C.R.D., Bombonato P.P. & Liberti E.A. 2016. [Morphometric study on the kidneys of domestic cats (Felis catus).] Estudo morfométrico em rins de felinos domésticos (Felis catus). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(4):329-338. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: rafael.agopian@gmail.com Renal health has over the last few years called attention of veterinarians, because the chronic failure of the kidneyu is a major cause of morbidity and mortality in cats. This paper proposes biometric characterization of the kidneys from cats, Felis catus, on the macroscopic aspects (length, height, width, weight and volume), mesoscopic (height of the cortex and medulla, and their inter-relationship) and microscopic (glomerular volume) in order to establish possible differences arising from age, gender and bilateral symmetry. It where used 30 kidneys of animals from specie Felis catus (cat), 15 males and 15 females with ages between 3 months to 15 years, divided into three groups: group 1 (3-9 months), group 2 (3 - 5 years) and group 3 (above 10 years). The kidneys were photographed, weighed, measured and processed for histology. The glomerular volume was obtained by stereology. The macroscopic data allowed to observe a morphometric and morphologic impartiality when compared sides, regardless of group and sex, about the length, height, width, weight and kidney volume. Significant difference was detected between males and females regardless of age for length, height, weight and volume, except for the width. There was a significant difference for all parameters considering the age: length, height, width, weight and volume. Wasnt detected signficant diferences between left and right kdney measurements of cortex, medulla and their inter-relationship, when considered bilateral symmetry. No difference was detected between males and females in mesoscopy in the cortex, medulla and cortex interrelationship cortex/medulla. Regarding age, the measurement of the height of the cortex and the interrelationship cortex/medulla showed a significant difference, but this difference was not established to the medulla of the kidney. Significant differences were found between groups, males and females, compared to the volume occupied by the glomerulus on the parenchyma renal. In all of biometric techniques there wasnt differences between right and left kidneys. The macroscopic measurements showed that males had larger kidney when compared length, height, width, weight and volume than females. The age range is directly related to the size of the kidney, which grows in all dimensions, gets heavier and with higher volume when compared young adults, and shows morphometry stability in relation to adults and senile. The renal parenchyma did not differ between the sexes, but the height of the cortex and the medulla ratio increases with age. The volume of the renal glomerulus is higher in males than in females and also increases in with the age. The kidneys showed a predominance of type I collagen in group 1 and 2, and type III collagen in group 3.

• Kidney rim

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Agopian R.G., Guimarães K.P., Fernandes R.A., Silva M.V.M., Righetti M.M.S., Prisco C.R.D., Bombonato P.P. & Liberti E.A. 2016. [Morphometric study on the kidneys of domestic cats (Felis catus).] Estudo morfométrico em rins de felinos domésticos (Felis catus). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(4):329-338. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: rafael.agopian@gmail.com A saúde renal tem ao longo dos últimos anos chamado atenção dos médicos veterinários, pois o comprometimento deste órgão na insuficiência renal crônica se apresenta como a maior causa de morbidade e mortalidade em felinos. O presente estudo propõe a caracterização biométrica dos rins de gatos, Felis catus, sob os aspectos macroscópicos (comprimento, altura, largura, peso e volume), mesoscópico (altura do córtex e da medula, e a sua inter-relação) e microscópica (volume glomerular), a fim de se estabelecer possíveis diferenças decorrentes de idade, sexo e simetria bilateral. Foram utilizados, rins de 30 animais da espécie Felis catus (gato deméstico), sendo 15 machos e 15 fêmeas com idade variando entre 3 meses a 15 anos, divididos em três grupos: grupo 1 (3-9 meses), grupo 2 (3-5 anos) e grupo 3 (acima de 10 anos). Os rins foram fotografados, pesados, mensurados e processados para histologia. O volume glomerular foi obtido através de estereologia. Os dados macroscópicos permitiram observar uma imparcialidade morfométrica e morfológica quando comparados os lados, independente do grupo e do sexo, sobre o comprimento, altura, largura, peso e volume dos rins. Para o sexo foi detectado diferença significante entre machos e fêmeas independente da faixa etária para comprimento, altura, peso e volume, com exceção da largura. Considerando a idade houve diferença significativa para todos os parâmetros: comprimento, altura, largura, peso e volume. Nas mensurações de córtex, medula e sua inter-relação, quando considerada a simetria bilateral, não foi detectada diferença significante entre rim direito e esquerdo. Para o sexo, não foi detectada diferença entre machos e fêmeas na mesoscopia no córtex, na medula e na inter-relação córtex/medula. Quanto à idade, a mensuração da altura do córtex e a inter-relação córtex/medula apresentou diferença significante, porém essa diferença não foi estabelecida para a medula do rim. Foram encontradas diferenças significantes entre grupos e entre machos e fêmeas, em relação ao volume ocupado pelo glomérulo no parênquima renal. Em todas as técnicas biométricas utilizadas não foram detectadas diferenças entre os rins direito e esquerdo. As mensurações macroscópicas mostraram que machos apresentaram um rim maior em comprimento, altura, largura, peso e volume do que as fêmeas. A faixa etária está diretamente relacionada ao tamanho do rim, que cresce em todas as dimensões, fica mais pesado e com maior volume quando comparados jovens e adultos, e se mostra estável morfometricamente em relação aos adultos e senis. O parênquima renal não difere entre os sexos, mas a altura do córtex e a relação com a medula aumentam com a idade. O volume do glomérulo renal é maior em machos do que em fêmeas e também aumenta em relação à idade. Os rins mostraram um predomínio de colágeno tipo I nos animais do grupo 1 e 2, e colágeno tipo III nos animais do grupo 3.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Souza L.A., Silva L.A.F., Oliveira B.J.N.A., Lacerda E.P.S., Beletti M.E., Lima A.P., Dias T.A. & Eurides D. 2016. [Immunomagnetic method associated with MesenCult® medium to obtain bone marrow mononuclear cells from rabbits negative for CD45 monoclonal antibody.] Método imunomagnético associado ao meio MesenCult® na obtenção de células mononucleares da medula óssea de coelhos negativas para o anticorpo monoclonal CD45. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(4):339-344. Departamento de Medicina Veterinária, Escola de Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Goiás, Campus Samambaia, Avenida Esperança s/n, Campus Samambaia, Goiânia, GO 74690-900, Brazil. E-mail: souza_vet@yahoo.com.br The objective of this study was to describe guidelines for the isolation of bone marrow mononuclear cells from rabbits, followed by cell purification by negative depletion with CD45 monoclonal antibody, and further expansion in MesenCult® medium. Ten adult male New Zealand White rabbits, age average of 1.0±0.2 years and weighting 3.5±0.24kg, were used to obtain a standardized method. The mononuclear cells of the bone marrow were isolated with Ficoll-paque® density gradient centrifugation, and the cell purification and acquisition was completed by negative depletion with CD45 monoclonal antibody in immunomagnetic base. The cell population obtained was expanded in MesenCult® medium. Through isolation with Ficoll-paque® density gradient was possible to obtain an average yield of 7.31x106 cells/mL. After purification and acquisiton of potential mesenchymal stem cells by the immunomagnetic base, there was a yield decrease to 2.28x106 cells/mL; however the expansion process was increased in cell culture. The results indicated that cells obtained from the mononuclear fraction of bone marrow and cultivated in vitro were capable to generate adherent cells 24 hours after culture, with predominance of fibroblastoid cells suggestive of mesenchymal stem cells. It can be concluded that mesenchymal stem cells can be achieved with purified rabbit bone marrow mononuclear cells through the immunomagnetic method, as the MesenCult® medium provides a suitable environment for a quick in vitro expansion, and the number of passages exerts negative influence on the morphological characteristics.

• Bone marrow stem cells medula óssea células-tronco mesenquimais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Souza L.A., Silva L.A.F., Oliveira B.J.N.A., Lacerda E.P.S., Beletti M.E., Lima A.P., Dias T.A. & Eurides D. 2016. [Immunomagnetic method associated with MesenCult® medium to obtain bone marrow mononuclear cells from rabbits negative for CD45 monoclonal antibody.] Método imunomagnético associado ao meio MesenCult® na obtenção de células mononucleares da medula óssea de coelhos negativas para o anticorpo monoclonal CD45. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(4):339-344. Departamento de Medicina Veterinária, Escola de Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Goiás, Campus Samambaia, Avenida Esperança s/n, Campus Samambaia, Goiânia, GO 74690-900, Brazil. E-mail: souza_vet@yahoo.com.br O objetivo detse artigo é de descrever um protocolo de isolamento das células mononucleares da medula óssea de coelhos, seguido de purificação celular por depleção negativa com o anticorpo monoclonal CD45 e posterior expansão em meio de cultura MesenCult®. Dez coelhos machos adultos, da raça Nova Zelândia, com idade média de 1,0±0,2 anos e peso médio 3,5±0,24kg, foram utilizados para padronização da metodologia. O isolamento das células mononuclares da medula óssea foi realizado pelo gradiente de densidade Ficoll-paque® e a purificação e obtenção das células- pela depleção negativa com o anticorpo monoclonal CD45 em base imunomagnética. A população celular obtida foi expandida posteriormente em meio de cultura MesenCult®. No isolamento pelo gradiente de icoll-Paque® foi obtido um rendimento médio de 7,31x106 células/mL. Após purificação e obtenção das possíveis células-tronco mesenquimais pela base imunomagnética, houve um decréscimo do rendimento para 2,28x106 células/mL, mas o processo de expansão foi incrementado pelo cultivo celular. Os resultados indicaram que as células obtidas da fração mononuclear da medula óssea, cultivadas in vitro foram capazes de gerar células aderentes 24 horas após o cultivo, com predominância de células fibroblastóides sugestivas de células-tronco mesenquimais. Concluiu-se que a obtenção de células-tronco mesenquimais pode ser alcançada após purificação das células mononucleares da medula óssea de coelhos pelo método imunomagético, o meio de cultura MesenCult® proporciona um ambiente adequado para a rápida expansão in vitro e o número de passagens exerce influência negativa sobre as características morfológicas das células.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Jimenez C.R., Penitente-Filho J.M., Torres C.A.A., Medeiros A.M. & Silva L.S. 2016. Vitrification of bovine preantral follicles with dimethylsulfoxide and sucrose plus α-tocopherol. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(3):209-215. Laboratório de Nutrição Animal, Centro de Energia Nuclear a Agricultura, Universidade de São Paulo, Av. Centenário 303, Cx. Postal 96, Piracicaba, SP 13400-970, Brazil. E-mail: zoocaro@hotmail.com The objective of this study was to evaluate the vitrification of bovine preantral follicles with dimethylsulfoxide (D) and sucrose (S) plus α-tocopherol 5mmol/L (T5) or 10mmol/L (T10) and, evaluate the thawed with minimal essential medium (m) with or without sucrose (s). Ovaries of cows were collected from slaughterhouse for the experiment I (n=66) and II (n=51). In the laboratory ovarian fragments were randomly assigned either to fresh control and 8 vitrification treatments (Controle and Dm; Dms, DSm; DSms; DST5m; DST5ms; DST10m; DST10ms). Ovarian fragments were placed in vitrification solution (5 min) and immersed in liquid nitrogen (-196°C), after a week, the fragments were thawed and analyzed. In the experiments I, preantral follicles were morphologically observed for histological evaluation, (normal; degenerated and developing of stage). In the experiment II, preantral follicles were mechanically isolated from ovarian tissue and examined with trypan blue, where dead and live corresponded to stained or non-stained. The treatments DSm, DSms and DST10m were effective in preserving the morphology in situ. However, the viability of isolated preantral follicles after vitrification remained high only in treatment DST10m. Thus, DST10m preserves survival rates and morphological integrity during vitrification of bovine preantral follicles.

• Vitrification follicles sucrose plus α-tocopherol dimethylsulfoxide oocyte vitrificação folículos dimetilsulfóxido criopreservação oócito

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Jimenez C.R., Penitente-Filho J.M., Torres C.A.A., Medeiros A.M. & Silva L.S. 2016. Vitrification of bovine preantral follicles with dimethylsulfoxide and sucrose plus α-tocopherol. [Vitrificação de folículos pré-antrais bovinos com dimetilxulfoxido e sacarose adicionado de α-tocopherol.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(3):209-215. Laboratório de Nutrição Animal, Centro de Energia Nuclear a Agricultura, Universidade de São Paulo, Av. Centenário 303, Cx. Postal 96, Piracicaba, SP 13400-970, Brazil. E-mail: zoocaro@hotmail.com Os objetivos deste estudo foram avaliar a vitrificação de folículos pré-antrais bovinos com dimetilsulfóxido (D) e sacarose (S) adicionando α-tocoferol 5mmol/L (T5) ou 10mmol/L (T10) e, avaliar o aquecimento com meio essencial mínimo (m) com ou sem sacarose (s). Ovários de fêmeas bovinas foram coletados de abatedouro, para o experimento I (n= 66) e II (n= 51). No laboratório fragmentos ovarianos foram distribuídos aleatoriamente para o controle fresco e 8 tratamentos de vitrificação (Controle e Dm; Dms, a DSm; DSms; DST5m; DST5ms; DST10m; DST10ms). Os fragmentos ovarianos foram colocados na solução de vitrificação (5 min) e imersos em nitrogênio líquido (-196°C). Após uma semana os fragmentos foram aquecidos e analisados. No experimento I, folículos pré-antrais foram observados morfologicamente para avaliação histológica (normal, degenerados e estádio de desenvolvimento). No experimento II, folículos pré-antrais foram mecanicamente isolados do tecido ovariano e examinados com o azul de trypan, observando mortos e vivos corados e não corados respetivamente. Os tratamentos a DSm, DSms e DST10m foram eficazes na preservação da morfologia in situ. No entanto, a viabilidade de folículos pré-antrais isolados após a vitrificação manteve-se elevada apenas no tratamento DST10m. Assim, DST10m preservou as taxas de sobrevivência e integridade morfológica durante a vitrificação de folículos pré-antrais bovinos.