Resultado da pesquisa (202)
Termo utilizado na pesquisa Evaluation
#1 - HPLC-DAD-MS/MS chemical characterization and evaluation of poisoning by Vernonia rubricaulis in sheep and mice
Abstract in English:
Vernonia rubricaulis is a plant responsible for poisoning cattle living in areas subject to flooding in the Pantanal biome of Brazil. Because V. rubricaulis causes acute hepatic necrosis and clinical signs and lesions similar to other hepatotoxic plants, its action pathways are probably similar. However, the potentially toxic components of V. rubricaulis remain unknown. Our study aims to determine the chemical profiles of aqueous and ethanolic extracts of the leaves of V. rubricaulis in the budding stage, which is known to be toxic, and in the mature stage. Experimental trials using mice and sheep investigated the presence of toxic substances in the extracts. Three groups of mice received different doses of V. rubricaulis extract. Another four groups were carried out with sheep that received: (1) aqueous extract of immature leaves, (2) aqueous extract of mature leaves, (3) ethanolic extract of mature leaves, and (4) ethanolic extract of immature leaves. Intoxication was reproduced in sheep only with the aqueous extract of V. rubricaulis buds; ethanol was not a suitable solvent for extracting toxic compounds. This finding suggests that toxic components are not present in considerable amounts in the mature plant. Swiss mice proved not to be suitable experimental models for reproducing intoxication because none of the extracts was toxic to the animals, including the one that was toxic in sheep. The chemical profile of the extracts revealed the presence of sugars, flavonoids, sphingolipids, and chlorogenic acids. Chemical profiles determined by HPLC-DAD-MS of the aqueous and ethanolic extracts of the buds and mature leaves of V. rubricaulis did not reveal compounds with known toxic potential. We demonstrated that the aqueous extraction method of V. rubricaulis was efficient at extracting toxic components from the plant’s leaves in the budding stage.
Abstract in Portuguese:
Vernonia rubricaulis é uma planta responsável por causar surtos de intoxicação em bovinos que vivem em áreas sujeitas a alagamento no bioma Pantanal do Brasil. Por causar necrose hepática aguda e quadro anatomopatológico semelhante a outras plantas hepatotóxicas, como Xanthium spp., era suposto que seu princípio ativo fosse semelhante ao desta planta. No entanto, os potenciais componentes tóxicos permanecem desconhecidos. Este estudo buscou determinar o perfil químico dos extratos aquoso e etanólico das folhas de V. rubricaulis, na fase de brotação, sabidamente tóxica, e na fase adulta. Para investigar a presença das substâncias tóxicas nos extratos, estudos experimentais utilizando camundongos e ovinos foram realizados. Ensaios experimentais utilizando ratos e ovinos investigaram a presença de substâncias tóxicas nos extratos. Três grupos de camundongos receberam diferentes doses do extrato de V. rubricaulis. Outros quatro grupos foram formados com ovinos que receberam: (1) extrato aquoso de folhas imaturas, (2) extrato aquoso de folhas maduras, (3) extrato etanólico de folhas maduras, e (4) extrato etanólico de folhas imaturas. A intoxicação foi reproduzida em ovinos apenas com o extrato aquoso dos brotos de V. rubricaulis, revelando que o etanol não é um bom solvente extrator dos compostos tóxicos e corroborando com achados prévios que sugerem que estes componentes não estão presentes em quantidades tóxicas na planta adulta. Camundongos Swiss não foram classificados como modelos experimentais adequados para a reprodução da intoxicação, uma vez que nenhum dos extratos foi tóxico, nem mesmo aquele que foi tóxico para ovinos. O perfil químico dos extratos revelou a presença de compostos das classes dos açúcares, flavonoides, esfingolipídeos e ácidos clorogênicos. Assim, os perfis químicos determinados por HPLC-DAD-MS dos extratos aquoso e etanólico das folhas em fase de brotação e das folhas adultas, não revelaram compostos com potencial tóxico conhecido, indicando que outras estratégias de determinação do perfil químico ou outras técnicas de caracterização estrutural devem ser empregadas para tal finalidade. Entretanto, o estudo demonstrou que o método de extração aquosa de V. rubricaulis foi eficiente na extração dos componentes tóxicos das folhas em fase de brotação.
#2 - Evaluation of erythrocyte dysmorphism in dog urine
Abstract in English:
Glomerulopathy is an important cause of kidney disease in dogs. Diagnosis is based on anamnesis, clinical examination, and complementary tests and can be complex and costly depending on the stage of the disease. Morphological evaluation of erythrocytes observed during urinalysis is frequently conducted for humans, which may help identify kidney damage in animals with kidney disease – individuals with glomerular disease present with erythrocyte dysmorphism, particularly the presence of erythrocytes recognized as acanthocytes. Animal studies are limited, and their results are often contradictory. Thus, the objective of this study was to identify the different populations of isomorphic and dysmorphic red blood cells (RBCs) present in the urine of dogs and to compare the bright-field and phase-contrast optical microscopy techniques in identifying morphological changes in RBCs during urinalysis. A total of 40 samples were selected from dogs with microscopic or macroscopic hematuria from routine care at Federal Rural University of Pernambuco Veterinary Hospital and were sent to the hospital’s Veterinary Clinical Pathology Laboratory. Physical, chemical, and sediment examinations were conducted. Subsequently, RBCs were evaluated and differentiated using bright-field and phase-contrast microscopy. In dog urine samples, it was possible to identify all populations considered isomorphic and dysmorphic that are described in humans. Among those considered isomorphic, normal RBCs, annulocytes, and echinocytes were observed, whereas stomatocytes, acanthocytes, codocytes, ghost cells, knizocytes and cells with no defined names (other) were found among the dysmorphic forms. No significant difference was observed between the two microscopic techniques used to differentiate and classify erythrocytes. Therefore, it is possible to identify and differentiate the morphological alterations found in RBCs in dogs’ urine. Compared with a phase-contrast microscope, a conventional optical microscope can be used without any detrimental effects, thereby facilitating the use of this technique in the laboratory routine, as it is cost-effective. Further studies should be conducted to evaluate the sensitivity and specificity of the identification of erythrocyte dysmorphism as an early marker of glomerular lesions.
Abstract in Portuguese:
As glomerulopatias são importantes causas de afecções renais em cães. Seu diagnóstico é baseado na anamnese, exame clínico e exames complementares e pode se tornar complexo e oneroso dependendo da fase da doença. Uma avaliação frequentemente utilizada na medicina humana e que pode auxiliar na localização da lesão renal em animais com doença renal é a avaliação morfológica dos eritrócitos observados na urinálise. Indivíduos com doença glomerular apresentam dismorfismo eritrocitário, especialmente com a presença de eritrócitos reconhecidos como acantócitos. Estudos em animais são escassos e seus resultados muitas vezes são contraditórios. Dessa forma, objetivou-se identificar as diferentes populações de hemácias isomórficas e dismórficas presentes na urina de cães e comparar as técnicas de microscopia óptica de campo claro e de contraste de fase na identificação de alterações morfológicas em hemácias durante a realização da urinálise. Foram selecionadas quarenta amostras de urina de cães com hematúria microscópica ou macroscópica, oriundas da rotina de atendimento do Hospital Veterinário da UFRPE e enviadas ao Laboratório de Patologia Clínica Veterinária desta instituição. As amostras passaram por exame físico, químico e do sedimento, sendo posteriormente as hemácias avaliadas e diferenciadas utilizando-se os métodos de microscopia de campo claro e de contraste de fase. Nas amostras de urina de cães, foi possível identificar todas as populações consideradas isomórficas e dismórficas já descritas em humanos. Dentre as consideradas isomórficas foram observadas hemácias normais, anulócitos e equinócitos e dentre as formas dismórficas foram encontradas estomatócitos, acantócitos, codócitos, células fantasmas, nizócitos e células ainda sem nomenclatura definida (outros). Não foi observada diferença significativa entre as duas técnicas microscópicas empregadas na diferenciação e classificação dos eritrócitos. Conclui-se que é possível identificar e diferenciar as alterações morfológicas encontradas nas hemácias de urinas de cães e que o uso de microscópio óptico tradicional convencional, quando comparado ao microscópio de contraste de fase, pode ser empregado sem grande prejuízo para o exame, facilitando a utilização dessa técnica na rotina laboratorial por ser um equipamento mais acessível. Outros estudos devem ser realizados para avaliar a sensibilidade e especificidade do uso da identificação do dismorfismo eritrocitário como um marcador precoce de lesões glomerulares.
#3 - Characterization of coccidiosis and evaluation of suggestive cases of subclinical necrotic enteritis in broilers
Abstract in English:
This study performed the characterization of coccidiosis in broilers and evaluated the occurrence of suggestive cases of necrotic enteritis (NE), seeking if there is an association between the diseases in Brazilian flocks. Two hundred and fifty-six birds from 32 flocks were evaluated. Macroscopic and histopathological lesions were graduated for coccidiosis and NE. Intestinal content was investigated by polymerase chain reaction (PCR) for seven species of Eimeria and by selective anaerobic culture for Clostridium perfringens and identification of the NetB gene. Flocks positive for coccidiosis represented 93.8%. Macroscopic lesions of coccidiosis were Grade 1 for E. acervulina (27%); E. tenella (9.7%) and E. maxima (8.9%). Histopathological evaluation showed Grade 1 in duodenum (38.2%); jejunum (21.4%); cecum (9.3%) and ileum (5%). PCR demonstrated positivity for E. tenella (21.9%), E. maxima (18.8%), and E. acervulina (3.1%). Suggestive macroscopic lesions of necrotic enteritis ranged from Grade 1 (16%), 2 (23%) and 3 (10,9%). Histopathology indicated the absence of necrosis, showing only hemorrhage in the mucosa and submucosa, with the presence of Eimeria spp. Clostridium perfringens type A netB+ was not isolated, demonstrating that macroscopic lesions found mostly in the jejunum did not characterize NE, based on histopathology and negativity of the NetB gene. The study suggests that, due to the high occurrence of coccidiosis, many macroscopic findings suggestive of NE are, in fact, attributed to atypical lesions caused by the reproduction of Eimeria spp.
Abstract in Portuguese:
Este estudo realizou a caracterização de coccidiose em frangos de corte e avaliou a ocorrência de casos sugestivos de enterite necrótica (EN), buscando se há alguma associação entre estas duas enfermidades em lotes de frango de corte no Brasil. Foram avaliadas 256 aves de 32 lotes. Lesões macroscópicas e histopatológicas foram graduadas para coccidiose e EN. O conteúdo intestinal foi investigado por reação em cadeia da polimerase (PCR) para sete espécies de Eimeria e por cultura anaeróbia seletiva para Clostridium perfringens e identificação do gene NetB. Os lotes positivos para coccidiose representaram 93,8%. Lesões macroscópicas de coccidiose foram de Grau 1 para E. acervulina (27%); E. tenella (9,7%) e E. maxima (8,9%). A avaliação histopatológica mostrou Grau 1 no duodeno (38,2%); jejuno (21,4%); ceco (9,3%) e íleo (5%). A PCR demonstrou positividade para E. tenella (21,9%), E. maxima (18,8%) e E. acervulina (3,1%). Lesões macroscópicas sugestivas de enterite necrótica variaram de grau 1 (16%), 2 (23%) e 3 (10,9%). A histopatologia indicou ausência de necrose, apresentando apenas hemorragia em mucosa e submucosa, com presença de Eimeria spp. Clostridium perfringens tipo A netB + não foi isolado, demonstrando que lesões macroscópicas encontradas principalmente no jejuno não caracterizaram NE, com base na histopatologia e negatividade do gene NetB. O estudo sugere que, em virtude da alta ocorrência de coccidiose nos lotes, muitos achados macroscópicos sugestivos de EN são, na verdade, atribuídos a lesões atípicas provocadas pela reprodução de Eimeria spp.
#4 - Evaluation of infection by Borrelia sp. in domestic and wild mammals and ticks from the Catimbau National Park, Pernambuco
Abstract in English:
Spirochetes in the genus Borrelia (Spirochaetes) are the etiological agents of two zoonotic diseases that have rodents as reservoirs: the Lyme disease, transmitted by ixodid ticks (Ixodidae), and tick-borne relapsing fever, which is transmitted mostly by argasid ticks (Argasidae). The information on the epidemiology of pathogens that affect animals is scarce, especially in places that have been barely studied, such as the Caatinga biome. Thus, in the present study, we aimed to detect DNA of Borrelia in the blood of wild and domestic mammals, as well as in ticks collected in the Catimbau National Park, State of Pernambuco, Northeast Brazil. Blood was collected from 77 captured wild animals belonging to Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2), and Dasypodidae (2) families. Additionally, blood samples from 120 sheep, 119 goats, 70 dogs, and 47 cattle were obtained. A total of 286 ticks were collected in the environment and identified as Ornithodoros cf. tabajara (188) and Ornithodoros rietcorreai (98); in addition, larvae of Ornithodoros spp. were collected on Thrichomys laurentius (4 specimens) and Monodelphis domestica (1); larvae of O. rietcorreai on Didelphis albiventris (2) and T. laurentius (1); Amblyomma parvum on T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) on dogs (121) and Rhipicephalus microplus on cattle (47). All blood samples, 120 free-living ticks, 46 O. rietcorreai and 74 O. cf. tabajara, and 12 R. sanguineus s.l. were submitted to DNA extraction to perform a polymerase chain reaction (nested PCR), aiming at amplifying a fragment of the flaB gene present in all species of Borrelia. Only one free-living specimen of O. cf. tabajara (1.3%) was positive. Negative detections in mammals may be related to the absence of infection or the low concentration of the spirochetes in the hosts. The low prevalence of Borrelia found in ticks can be explained by the low infection rates that these spirochetes depict in their vectors. New studies focusing on the detection of antibodies, as well as on the sequencing and isolating Borrelia spp. should be encouraged for a better understanding of the epidemiology of these bacterial agents in the region.
Abstract in Portuguese:
No gênero Borrelia (Spirochaetes) encontram-se dois grupos de agentes responsáveis por duas doenças zoonóticas, que têm roedores como reservatórios e acometem humanos: o grupo de Lyme, transmitido por carrapatos ixodídeos, e a febre recorrente, que pode ser transmitida por carrapatos argasídeos ou piolhos. Poucas são as informações sobre epidemiologia e agentes patogênicos que acometem animais, podendo representar uma riquíssima fonte de informações, principalmente em locais nunca estudados, pois podem ser bioindicadores de qualidade do ambiente e saúde. Desta forma, no presente estudo foi realizada a pesquisa de Borrelia spp. em amostras de sangue de mamíferos silvestres e domésticos, assim como de carrapatos, do Parque Nacional do Catimbau, Pernambuco. Foi realizada a captura e colheita sanguínea de 77 animais pertencentes às famílias Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2) e Dasypodidae (2). Adicionalmente, amostras de sangue foram obtidas de 120 ovinos, 119 caprinos, 70 cães e 47 bovinos. Foram coletados 286 carrapatos no ambiente, identificados como Ornithodoros cf. tabajara (188) e Ornithodoros rietcorreai (98); além de carrapatos coletados nos animais: Ornithodoros spp. em Thrichomys laurentius (4 espécimes) e Monodelphis domestica (1); O. rietcorreai em Didelphis albiventris (2) e T. laurentius (1); Amblyomma parvum em T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) em cães (121) e R. microplus em bovinos (47). Todas as amostras sanguíneas, 120 carrapatos de vida livre, sendo 46 O. rietcorreai e 74 O. cf. tabajara, e 12 R. sanguineus s. l. foram submetidos à extração de DNA para realização da reação em cadeia da polimerase (nested-PCR), visando amplificação de um fragmento do gene flaB presente em todas as espécies de Borrelia. Não houve amplificação nas amostras sanguíneas dos animais, no entanto em um espécime de O. cf. tabajara de vida livre (1,3%) foi detectado o DNA de Borrelia. A não detecção nos mamíferos pode estar relacionada com a ausência de infecção ou à baixa concentração do agente nos hospedeiros. A baixa prevalência encontrada nos carrapatos pode ser justificada devido à baixa infecção nos vetores. Novos estudos focando na determinação de anticorpos, assim como no sequenciamento e isolamento de Borrelia devem ser estimulados para uma melhor compreensão da epidemiologia do agente na região.
#5 - Retrospective evaluation of canine anal sac carcinoma (260 cases) in Brazil: late detection and failures in lymph node evaluation
Abstract in English:
Anal sac neoplasms are common in companion animals, and the epidemiological profile has been extensively described in international studies; however, national data are still lacking. Data on the Brazilian reality of anal sac carcinoma cases’ diagnosis and treatment are also scarce. The purpose of this study was to retrospectively evaluate cases of canine anal sac carcinoma and assess the profile of involvement, tumor size, and lymphatic invasion at the time of diagnosis. Information was obtained from Vetpat laboratory database, from 260 cases spanning a 12-year period (2010-2021). In histopathological evaluation at the time of diagnosis, data on sex, age, and race were described, as well as tumor size and lymphatic invasion. The presence of metastasis was also assessed in cases where lymph nodes were sampled. Simple descriptive statistical analysis was used to evaluate the data. Adult and elderly, female, and mixed-breed animals were more involved, indicating differences from international studies that can be attributed to sociocultural factors. In terms of tumor size, it was observed that 93% of the cases had the largest diameter above 2.5cm. Only 7% of the cases had the largest diameter below 2.5cm, demonstrating the often late diagnosis and the importance of rectal palpation examination during the general physical assessment of canine patients, particularly at an advanced age. Regarding lymphatic invasion and affected lymph nodes, 50% of the cases had lymphatic invasion described in the histopathological examination. However, only 5% of the lymph nodes were sent along with the primary tumor, indicating the disease’s aggressive behavior but with possible metastases underdiagnosed.
Abstract in Portuguese:
As neoplasias de saco anal possuem incidência importante nos animais de companhia, tendo o seu perfil epidemiológico de acometimento amplamente descrito em estudos internacionais, entretanto dados nacionais ainda são escassos. De modo semelhante, dados acerca da realidade brasileira, associados ao diagnóstico e conduta desses casos, são inexistentes. O objetivo do presente trabalho foi avaliar, de forma retrospectiva, os casos de carcinoma de saco anal canino, avaliando o perfil de acometimento, o tamanho tumoral e a invasão linfática no momento do diagnóstico. Foi obtido informações de 260 casos, respectivo a um período de 12 anos (2010-2021), proveniente do banco de dados do laboratório Vetpat. Foram descritos os dados acerca do sexo, idade e raça, bem como o tamanho tumoral e presença de invasão linfática em avaliação histopatológica no momento do diagnóstico. Os casos que cursavam com envio dos linfonodos também foram avaliados quanto a presença de metástase. Os dados foram avaliados mediante análise estatística descritiva simples. Foi encontrado um maior acometimento em animais adultos a idosos, do sexo feminino e sem raça definida, evidenciando diferenças em relação a estudos internacionais, que podem ser atribuídas a fatores socioculturais. Em relação ao tamanho tumoral, observou-se que 93% dos casos apresentavam o maior diâmetro acima de 2,5cm e apenas 7% dos casos apresentavam o maior diâmetro abaixo de 2,5cm, evidenciando o diagnostico frequentemente tardio, bem como a importância do exame de palpação retal durante a avaliação física geral de pacientes caninos, principalmente em idade avançada. Quanto a avaliação da invasão linfática e linfonodos acometidos, 50% dos casos cursavam com invasão linfática descrita em exame histopatológico, entretanto em apenas 5% dos casos os linfonodos foram enviados junto ao tumor primário, evidenciando o comportamento agressivo da doença, porém com metástases possivelmente subdiagnosticadas.
#6 - Evaluation of phosphorus levels in bones and serum of buffaloes (Bubalus bubalis) before and after supplementation with a selective mineral mixture
Abstract in English:
This study aimed to evaluate phosphorus (P) concentration in serum and bone, the percentage of ash and the specific bone density of buffaloes on Ilha de Marajó before and after mineral supplementation. For this study, 14 crossbred buffaloes of Murrah and Mediterranean descent aged between 18 and 36 months were used. The average values of P before supplementation in serum and bone, the percentage of bone ash and the specific bone density were 5.68mg/dL±1.18, 16.53%±0.53, 59.95%±1.96 and 1.52g/cm3±0.32, respectively, which demonstrated P deficiency in animals raised on Ilha de Marajó. After supplementation with P for a period of seven months, the values were 6.61mg/dL±0.87, 16.90%±0.56 and 60.30%±0.95 and 1.71g/cm3±0.21, respectively. These results showed a significant increase in P concentration in blood serum, specific bone density and percentage of P in ash (P<0.05), but there was no significant increase in the percentage of ash. The average increase in P in the serum and ash did not reach normal levels in all animals; however, 28.6% of the animals had normal values of P in serum and 50% in the ash, and 64.3% had normal specific bone density values. The nonre-establishment, in some of the animals, of the variables of P serum and bone after supplementation for seven months may have occurred as a result of the low intake of the mineral mixture and by the low concentration of P in the Brachiaria brizantha cv. Marandu used for feeding animals during the experiment.
Abstract in Portuguese:
Objetivou-se avaliar as concentrações de fósforo (P) no soro e no osso, o percentual de cinzas e a densidade óssea específica em búfalas da Ilha de Marajó antes e após suplementação mineral seletiva. Foram utilizadas 14 búfalas mestiças de Murrah com Mediterrânea, com idades entre 18 e 36 meses. Os valores médios de P, antes da suplementação, no soro, no osso, o percentual de cinzas e a densidade óssea específica foram de 5,68mg/dL±1,18, 16,53%±0,53, 59,95%±1,96 e 1,52g/cm3±0,32, respectivamente, o que demonstra deficiência de P nos animais criados na Ilha de Marajó. Após a suplementação com P por um período de sete meses os valores foram 6,61mg/dl±0,87, 16,90%±0,56 e 60,30%±0,95 e 1,71g/cm3±0,21 respectivamente. Esses resultados caracterizam um aumento significativo nas concentrações de P no soro sanguíneo, na densidade óssea específica e no percentual de P nas cinzas (P<0,05), porém não houve um aumento significativo no percentual de cinzas. O aumento médio nos valores de P no soro e nas cinzas não alcançou patamares de normalidade em todas as búfalas, entretanto 28,6% delas tinham valores normais de P no soro e 50% nas cinzas, 64,3% tinham valores normais da densidade óssea específica. O não restabelecimento, em parte dos animais, das variáveis ósseas e sanguíneas após suplementação com P durante sete meses pode ter ocorrido em virtude da baixa ingestão da mistura mineral e da baixa concentração de P em Brachiaria brizantha cv. Marandu utilizada para alimentação dos animais durante o experimento.
#7 - Pathology, microbiology, and molecular evaluation of tissues from equids serologically positive for Burkholderia mallei in Midwestern Brazil
Abstract in English:
Glanders is a disease caused by the bacterium Burkholderia mallei that primarily affects horses, mules and donkeys. The disease can cause lesions in the skin, lungs and several other organs. However, it often manifests as an asymptomatic disease. In Brazil, serological tests of high sensitivity and specificity are used to assist in the detection of antibodies against B. mallei and to contribute to the control of the disease. However, due to the mandatory euthanasia of seroreactive animals, equids with positive serology for B. mallei and asymptomatic generated great conflicts between breeders, veterinarians and diagnostic laboratories. This study clarifies the limitations of complementary diagnostic tests for detecting B. mallei. It describes the clinical, morphological and laboratory findings in 24 equines from different municipalities in the Mato Grosso State, Brazil, which reacted to the complement fixation test and were positive in the western blotting test for glanders. Data and tissue samples were collected from 24 horses for histological, microbiological and molecular analysis. In 23 horses, no clinical signs, morphological alterations, microbiological isolation, or molecular detection would characterize B. mallei infection. On the other hand, samples from an asymptomatic horse without lesional alterations showed sequence amplification compatible with B. mallei in the PCR. Considering that the infection by B. mallei is subject to the application of animal sanitary defense measures and that, by international requirement and national legislation, the serological results are tools that should support the sanitation procedures for the error of the bacteria in the Mato Grosso State, Brazil.
Abstract in Portuguese:
Mormo é uma enfermidade causada pela bactéria Burkholderia mallei que acomete primariamente cavalos, mulas e burros. A doença pode causar lesões na pele, pulmões e em diversos outros órgãos, entretanto frequentemente manifesta-se como uma enfermidade assintomática. No Brasil são utilizados testes sorológicos de elevada sensibilidade e especificidade para auxiliar na detecção de anticorpos contra B. mallei e contribuir para controle da doença. Porém, devido à obrigatoriedade da eutanásia de animais sororeagentes, os equídeos com sorologia positiva para B. mallei e assintomáticos geraram grandes embates entre criadores, médicos-veterinários e laboratórios de diagnóstico. Este trabalho esclarece as limitações dos testes diagnósticos complementares para detecção de B. mallei e descreve os achados clínicos, morfológicos e de exames laboratoriais em 24 equídeos, procedentes de diferentes municípios do estado de Mato Grosso, Brasil, que reagiram ao teste de fixação de complemento e foram positivos no teste de “western blotting” para mormo. Foram colhidos dados e amostras de tecidos de 24 equídeos para análise histológica, microbiológica e molecular. Em 23 equídeos não existiam sinais clínicos, alterações morfológicas, isolamento microbiológico ou detecção molecular que caracterizassem infecção por B. mallei. Por outro lado, amostras de um cavalo assintomático e sem alterações lesionais apresentaram amplificação de sequência compatível com B. mallei na PCR. Considerando que a infecção por B. mallei é passível da aplicação de medidas de defesa sanitária animal e que por exigência internacional e da legislação nacional, os resultados sorológicos são ferramentas que devem amparar os procedimentos de saneamento para erradicação da bactéria no estado de Mato Grosso, Brasil.
#8 - Evaluation of five parasitological techniques for diagnosing phylum Ciliophora cysts in fecal samples from free-living wild artiodactyls
Abstract in English:
A variety of laboratory techniques are used in parasitological diagnosis. However, studies that analyze their laboratory efficiency are very scarce, especially with regard to biological samples from wild animals that are little known, with little popular attachment, such as artiodactyls. These can be infected by different parasites, including protozoa of the phylum Ciliophora, which includes the parasites Balantioides coli and Buxtonella sulcata. In this light, the aim of this study was to compare the efficiency of five coproparasitological techniques for diagnosing protozoan cysts of the phylum Ciliophora in the feces of free-living artiodactyls. To this end, 101 fecal samples were collected from trails in Pedra Selada State Park, Rio de Janeiro state, from 2020 to 2021. All the samples were analyzed using the qualitative techniques of modified Sheather floatation, modified Ritchie sedimentation and Lutz, as well as the quantitative techniques of Mini-FLOTAC and McMaster. Cyst recovery was best achieved using the modified Ritchie technique, in which 62.5% positivity was detected, followed by Lutz (47.5%), modified Sheather (37.5%) and the quantitative techniques of Mini-FLOTAC (30%) and McMaster (17.5%). In most of the comparisons between the techniques, reasonable agreement regarding the diagnosis was observed (Kappa 0.21 to 0.40), which was statistically significant (p≤0.05). McMaster showed higher mean and standard deviation values for counts of cysts per gram of feces than Mini-FLOTAC. However, there was no significant difference in the estimates for cyst counts (Wilcoxon p>0.05). Sedimentation qualitative techniques were more indicated for diagnosing cysts of protozoa of the phylum Ciliophora in the feces of free-living wild artiodactyls. These techniques can therefore be used as laboratory tools for environmental parasite monitoring. In addition, between the two quantitative techniques, Mini-FLOTAC presented better performance, thus showing its potential as a tool for estimating the abundance of cystic forms of the phylum Ciliophora in environmental samples.
Abstract in Portuguese:
Diversas são as técnicas laboratoriais utilizadas no diagnóstico parasitológico. No entanto, estudos que analisam a eficiência laboratorial das mesmas são muito escassos, principalmente quando se trata de amostras biológicas de animais silvestres, que possuem pouca divulgação e apego popular, como os artiodáctilos. Estes podem se infectar por diferentes parasitos, incluindo os protozoários do Filo Ciliophora, no qual se inclui Balantioides coli, bem como Buxtonella sulcata. Mediante o exposto, este estudo objetivou comparar a eficiência entre cinco técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de cistos de protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos em vida livre. Entre 2020 e 2021 foram coletadas 101 amostras fecais em trilhas do Parque Estadual da Pedra Selada localizado no estado do Rio de Janeiro. Todas as amostras foram analisadas pelas técnicas qualitativas de flutuação de Sheather modificada, sedimentação de Ritchie modificada e Lutz, bem como por meio das técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC e McMaster. Pode-se verificar uma superioridade na recuperação dos cistos por meio da técnica de Ritchie modificada, no qual foi detectado 62,5% de positividade, seguida pelo Lutz (47,5%), Sheather modificada (37,5%) e pelas técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC (30%) e McMaster (17,5%). Na maioria das comparações entre as técnicas foi possível verificar uma concordância razoável (Kappa 0,21 a 0,40) em relação ao diagnóstico entre as mesmas, sendo este estatisticamente significativo (p≤0,05). McMaster em comparação com o Mini-FLOTAC foi a que apresentou os maiores valores médio e de desvio padrão na contagem dos cistos por grama de fezes. No entanto, não foi evidenciado diferença significativa na estimativa de contagem dos cistos (Wilcoxon=p>0,05). Pode-se verificar que as técnicas qualitativas de sedimentação foram consideradas as mais indicadas para o diagnóstico de cistos do protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos silvestres em vida livre, podendo ser utilizadas como ferramentas laboratoriais de monitoramento parasitário ambiental. Além disso, dentre as técnicas quantitativas, o Mini-FLOTAC foi a que apresentou a melhor performance, denotando o seu potencial como uma ferramenta para se estimar a abundância de formas císticas do Filo Ciliophora em amostra ambiental.
#9 - Evaluation of skin prick test, exclusion diet and dietary challenge in the diagnosis of food allergy in dogs with chronic pruritus
Abstract in English:
Allergic dogs are commonly sensitized to food allergens. We evaluated the use of the prick test to diagnose food allergies in dogs with pruritus and the efficacy of an exclusion diet based on the test. The prick test was performed in 10 healthy dogs and 34 dogs with pruritus, of which 25 received an exclusion diet for 60 days and was challenged with positive food on the test. pVAS and CADESI-4 were assessed on days 0, 30, and 60 after re-exposure. As a result, two control group dogs reacted to a single food allergen, milk and wheat. Of the 25 dogs with pruritus that reacted to food allergens, 24 (96%) reacted to more than one food allergen, and only one (4%) reacted to a single food protein: pork. In the test group (n=25), there was a significant improvement of pVAS and CADESI-4 after 30 and 60 days of dietary exclusion, with significant worsening of the scores with food allergen challenge. In conclusion, the prick test can be used for screening food allergens to make an exclusion diet.
Abstract in Portuguese:
Cães alérgicos são comumente sensibilizados a alérgenos alimentares. Nós avaliamos o uso do teste de puntura para o diagnóstico de alergias alimentares em cães com prurido e a eficácia de uma dieta de exclusão baseada no teste. O teste de puntura foi realizado em 10 cães saudáveis e em 34 cães com prurido, dos quais 25 receberam uma dieta de exclusão por 60 dias e depois desafiados com o alimento que foi positivo no teste. pVAS e CADESI-4 foram realizados nos dias 0, 30, 60 e depois da reexposição. Como resultados, dois cães do grupo controle reagiram a um único alérgeno alimentar, leite e trigo. Dos 25 cães com prurido que reagiram aos alérgenos alimentares, 24 (96%) reagiram a mais de um alérgeno alimentar e apenas um (4%) reagiu a uma única proteína, que foi porco. No grupo teste (n=25), houve uma significativa melhora do pVAS e CADESI-4 depois de 30 e 60 dias de dieta de exclusão, com significante piora dos scores com o desafio alimentar. Como conclusão, o teste de puntura pode ser usado para selecionar alérgenos alimentares para fazer uma dieta de exclusão.
#10 - Evaluation of troponin I and C in horses intoxicated by salinomycin
Abstract in English:
Ionophores are antibiotics frequently used in animals of production. The most common are monensin, salinomycin, narasin, and lasalocid. The equine species is highly susceptible to ionophores poisoning. The present study aimed to analyze the serum use of cardiac troponin I (cTnI) and the anti-troponin C immunohistochemistry (IHC) technique (anti-cTnC) as a diagnostic tool for cardiac injuries in horses spontaneously poisoned by salinomycin. Seven horses were affected by a disease lasting for 6-72 hours. Three horses recovered. The primary morphological lesions reported in the four necropsied horses that died spontaneously were necrosis of the myocardium and skeletal muscle. Immunohistochemistry for anti-cTnC was performed in selected sections of the cardiac muscle from the equine submitted for necropsy. A decrease in cTnC expression in the cytoplasm of cardiomyocytes was noticed in all four necropsied horses. Samples of serum from six horses tested for cardiac troponin I levels; the most expressive values were mainly in horses with more severe cardiac histological lesions. The serum detection of cTnI can be considered a good marker to determine cardiac damage in horses intoxicated with salinomycin with a clinical evolution of 48 hours or more. The anti-cTnC IHC aided in the detection of cardiac injury in horses independent of clinical evolution.
Abstract in Portuguese:
Ionóforos são antibióticos frequentemente utilizados em animais de produção. Dentre eles, os mais comuns são a monensina, salinomicina, narasina e lasalocida. A espécie equina é altamente suscetível à intoxicação por antibióticos ionóforos. O objetivo do presente estudo foi analisar o uso da troponina sérica cardíaca I (cTnI) e da técnica de imuno-histoquímica anti-troponina C (IHC) (anti-cTnC), como ferramenta diagnóstica para lesões cardíacas em equinos intoxicados espontaneamente por salinomicina. Sete equinos foram afetados, com evolução clínica de seis a 72 horas. Destes, quatro foram necropsiados e três se recuperaram. As principais lesões morfológicas observadas foram necrose do miocárdio e dos músculos esqueléticos. A imuno-histoquímica anti-cTnC foi realizada em amostras selecionadas de tecido cardíaco dos quatro equinos submetidos à necropsia. Em todos os casos foi observada diminuição da expressão de cTnC no citoplasma dos cardiomiócitos. Amostras de soro de seis equinos foram submetidas à dosagem de troponina cardíaca I. Os valores mais altos foram observados em equinos que apresentaram lesões histológicas cardíacas mais graves. A detecção sérica de cTnI pode ser considerada um bom marcador para determinar lesão cardíaca em equinos intoxicados com salinomicina com evolução clínica de 48 horas ou mais. A IHC anti-cTnC auxiliou na detecção da lesão cardíaca nos equinos independente da evolução clínica.
