PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Nunes Rangel M.F., Lemos L.S., Almeida C.M.C., Sales L.G. & Vieira-da-Motta O. 2010. Development of Polyclonal IgY antibodies in chickens and IgG in rabbits immunized against proteins of Pythium insidiosum isolated from horses in the state of Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 30(1):87-93. Micologia Veterinária do Setor de Doenças Infectocontagiosas, Laboratório de Sanidade Animal do Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Av. Alberto Lamego 2000, Horto, Campos dos Goytacazes, RJ 28013-602, Brazil. E-mail: olney@uenf.br Pythiosis is caused by Pythium insidiosum and the occurrence of disease in horses was described in the North and Northwest State of Rio de Janeiro, Brazil. The disease was described in cattle, sheep, humans, and horses in different states and regions across the country. This paper describes the development of IgY and IgG polyclonal antibodies, in chicken and rabbits, respectively against proteins extracted from kunkers and hyphae of P. insidiosum from affected horses. The proteins were recognized by chicken, rabbit and horse antibodies by immunodiffusion and Western blot against majority bands of 27 and 43 KDa, and titrated by ELISA. The antibodies IgY developed by the first time against Brazilian strains of P. insidiosum may represent a valuable tool in the detection of antigens of the pathogen and contribute to further studies aimed at immunotherapy and knowledge about this disease in endemic areas in Rio de Janeiro and in Brazil.

• Pythiosis Pythium insidiosum

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Nunes Rangel M.F., Lemos L.S., Almeida C.M.C., Sales L.G. & Vieira-da-Motta O. 2010. Development of Polyclonal IgY antibodies in chickens and IgG in rabbits immunized against proteins of Pythium insidiosum isolated from horses in the state of Rio de Janeiro. [Desenvolvimento de Anticorpos IgY em galinhas e IgG em coelhos imunizados contra proteínas de Pythium insidiosum isolado de equinos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil.] Pesquisa Veterinária Brasileira 30(1):87-93. Micologia Veterinária do Setor de Doenças Infectocontagiosas, Laboratório de Sanidade Animal do Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Av. Alberto Lamego 2000, Horto, Campos dos Goytacazes, RJ 28013-602, Brazil. E-mail: olney@uenf.br Pitiose é causada por Pythium insidiosum e a doença foi descrita em equinos no Norte e Noroeste do Estado do Rio de Janeiro, Brasil. A doença foi descrita em bovinos, ovelhas, humanos e cavalos em diferentes estados e regiões do país. Este trabalho descreve o desenvolvimento de anticorpos policlonais, IgY e IgG, em galinha e coelho, respectivamente, contra proteínas extraídas de kunkers e hifas de P. insidiosum de cavalos doentes. As proteínas foram reconhecidas por anticorpos de galinha, coelho e cavalos contra as bandas majoritárias de 27 e 34 KDa em imunodifusão e Western blot tituladas por ELISA. Os anticorpos IgY desenvolvidos pela primeira vez contra cepas brasileiras de P. insidiosum podem representar um valioso instrumento na detecção de antígenos de patógenos e contribuem para novos estudos baseados na imunoterapia e no entendimento sobre esta doença em áreas endêmicas no Rio de Janeiro e em todo o país.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Souza F.G., Osório A.L.A.R., Csordas B.G., Prado R.Q., Elisei C., Soares C.O., Araújo F.R., Fragoso S.P. & Rosinha G.M.S. 2009. [Development and evaluation of a strain of Brucella abortus gotten by the knockout of the virB10 gene.] Desenvolvimento e avaliação de uma cepa knockout de Brucella abortus obtida pela deleção do gene virB10. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(11):943-950. Programa de Pós-Graduação, Mestrado em Ciência Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: fabicientista@gmail.com Brucella spp. are intracellular facultative gram-negative bacteria which are pathogenic for many species of mammals, causing brucellosis, a worldwide spread zoonosis. Therefore the search for more efficient alternatives of control, as the development of new potential immunogens is necessary. In this study, we knockouted virB10 from Brucella abortus S2308 strain, generating a mutant strain probably incapable to produce the corresponding native protein. The gene virB10 is part of an operon that codifies for type IV secretion system, which is essential for the intracellular survival and multiplication of the bacteria in host cells. The knockout was carried through by the construction of the suicidal plasmid pBlue: virB10: kan and eletroporation in eletrocompetent cells of B. abortus S2308, leading to the exchange of the wild gene for the interrupted gene, containing the gene of resistance to kanamycin, for double homologous recombination. BALB/c mice were inoculated with S19, RB-51, DvirB10 strains of B. abortus and S2308 wild strain; the results demonstrated that the BALB/c mice inoculated with S19 and BALB/c mice inoculated with S2308 presented faster fall of trend line, when compared with the too much groups, for bacterial recovery (BR) and esplenic weight (EW) respectively. The groups that received DvirB10 S2308 B. abortus and RB-51 demonstrated similar behavior for both the characteristics. In the sixth week postinoculation, the results for BR (log UFC ± standart deviations) and EW (esplenic weight ± standart deviations), respectively, showed: groups inoculated with strains S2308 (4,44±1,97 and 0,44±0,11), S19 (1,83±2,54 and 0,31±0,04), RB-51 (0,00±0,00 and 0,20±0,01) and DvirB10 S2308 (1,43±1,25 and 0,19±0,03). Considered the bacterial clearance, all the groups differed statistical from the group that received S2308 (p<0,0001), the group inoculated with DvirB10 S2308 B. abortus was similar to the S19 group (p=0,4302) and different of group RB-51 (p=0,0063). The evaluation of the persistence of the strains showed that virB10 is essential for the maintenance of the virulence. These results support other studies concerning the immunogenic potential of this mutant strain.

• Brucella abortus

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Souza F.G., Osório A.L.A.R., Csordas B.G., Prado R.Q., Elisei C., Soares C.O., Araújo F.R., Fragoso S.P. & Rosinha G.M.S. 2009. [Development and evaluation of a strain of Brucella abortus gotten by the knockout of the virB10 gene.] Desenvolvimento e avaliação de uma cepa knockout de Brucella abortus obtida pela deleção do gene virB10. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(11):943-950. Programa de Pós-Graduação, Mestrado em Ciência Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: fabicientista@gmail.com Brucella spp. são bactérias gram-negativas, intracelulares facultativas que são patogênicas para muitas espécies de mamíferos causando a brucelose, uma zoonose difundida mundialmente. Por isso a busca de alternativas de controle mais eficientes se faz necessário como o desenvolvimento de novas cepas que possam ser testadas como potenciais imunógenos. Neste estudo realizou-se a deleção do gene virB10 da cepa S2308 de Brucella abortus gerando uma cepa knockout provavelmente incapaz de produzir a proteína nativa correspondente. O gene virB10 faz parte de um operon que codifica para um sistema de secreção do tipo IV, essencial para a sobrevivência intracelular e multiplicação da bactéria em células hospedeiras. A deleção foi realizada pela construção do plasmídeo suicida pBlue:virB10:kan e eletroporação deste em células eletrocompetentes de B. abortus S2308, ocorrendo a troca do gene selvagem pelo gene interrompido, com o gene de resistência a canamicina, por recombinação homóloga dupla. Camundongos BALB/c foram inoculados com as cepas S19, RB-51, DvirB10 de B. abortus e B. abortus S2308 selvagem; os resultados demonstraram que camundongos BALB/c inoculados com S19 e camundongos BALB/c inoculados com S2308 apresentaram queda mais rápida de linha de tendência, quando comparadas aos demais grupos, para recuperação bacteriana (RB) e peso esplênico (PE) respectivamente. Os grupos que receberam DvirB10 S2308 de B. abortus e RB-51 demonstraram comportamento semelhante para ambas as características. Na sexta semana após a inoculação, os resultados para RB (log de UFC ± desvio padrão) e PE (peso esplênico ± desvio padrão), respectivamente, mostraram: grupos inoculados com as cepas S2308 (4,44±1,97 e 0,44±0,11), S19 (1,83±2,54 e 0,31±0,04), RB-51 (0,00±0,00 e 0,20±0,01) e DvirB10 S2308 (1,43±1,25 e 0,19±0,03). Considerado o clearance bacteriano, todos os grupos diferiram estatisticamente do grupo que recebeu S2308 (p<0,0001), o grupo inoculado com DvirB10 S2308 de B. abortus foi semelhante ao grupo S19 (p=0,4302) e diferente do grupo RB-51 (p=0,0063). A avaliação da persistência revelou que o gene virB10 é essencial para a manutenção da virulência da bactéria. Os resultados obtidos possibilitarão que outras pesquisas sejam realizadas avaliando o potencial imunogênico desta cepa mutante.

Abstract in English:

RESUMO.- Costa F.B., Alves F.R., Costa A.P., Barros A.C.E., Guerra P.C., Sousa A.L. & Oliveira A.S. 2009. Ultrasonographic and radiographic determination of egg development of jurarás (Kinosternon scorpioides) in captivity. [Determinação ultrassonográfica e radiográfica do desenvolvimento de ovos de jurarás em cativeiro.] Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):841-846. Departamento das Clínicas, Universidade Estadual do Maranhão, Cidade Universitária Paulo VI, Tirirical, Cx. Postal 9, São Luís, MA 65055-310, Brazil. E-mail: franc.borges@yahoo.com.br A tartaruga Kinosternon scorpioides (Linnaeus, 1766), com nome popular de jurará, é uma espécie bastante variável, e muitos nomes diferentes são atribuídos às suas populações, de acordo com sua localização geográfica. Atualmente, quatro subespécies foram validadas como K. scorpioides surgindo desde o extremo Sul do Panamá e norte da América do Sul, podendo ser encontradas ainda no Equador, no norte do Peru, sul da Bolívia, norte da Argentina, leste da Guiana e no Brasil. Desde modo, foi realizado um estudo ultrassonográfico e radiológico, a fim de descrever a morfologia e o desenvolvimento dos ovos de K. scorpioides em cativeiro, utilizando-se 20 fêmeas, no período de setembro de 2005 a agosto de 2006. No primeiro mês, o ciclo ovariano foi caracterizado pela ausência de folículos vitelogênicos, atrésicos ou presença de ovos em ovidutos. De outubro de 2005 a março de 2006 a varredura ultrassonográfica permitiu determinar o crescimento vitelogênico dos folículos, os quais foram observados com um formato que variou de ovóide a esférico, envolvidos por um conteúdo ecogênico, uma camada não-ecogência de albumina e uma casca de elevada ecogenicidade. Ovos presentes em ovidutos foram identificados por radiografias apenas 180 dias após início do experimento, quando a casca tornou-se suficientemente mineralizada para impressionar o filme radiográfico. Um transdutor linear de 7,5 MHz promoveu imagens com resolução e penetração adequada para visibilização de folículos. Exames ultrassonográficos sucessivos em fêmeas K. scorpioides permitiram determinar os estágios iniciais de desenvolvimento de folículos vitelogênicos e o exame radiográfico mostrou-se como técnica simples para avaliar a presença de ovos em ovidutos, permitindo fazer inferências sobre desenvolvimento de ovos em jurarás, a partir dos 6 meses de pós-observação por ultrassonografia.

• Kinosternon scorpioides jurará mud turtle wildlife conservation reproduction

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Costa F.B., Alves F.R., Costa A.P., Barros A.C.E, Guerra P.C., Sousa A.L. & Oliveira A.S. 2009. Ultrasonographic and radiographic determination of egg development of jurarás (Kinosternon scorpioides) in captivity. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):841-846. Departamento das Clínicas, Universidade Estadual do Maranhão, Cidade Universitária Paulo VI, Tirirical, Cx. Postal 9, São Luís, MA 65055-310, Brazil. E-mail: franc.borges@yahoo.com.br Kinosternon scorpioides (Linnaeus, 1766), with its common name of jurará, is a quite variable species of turtles, and many different names have been applied to populations throughout its range. Currently, however, four subspecies are considered valid as K. scorpioides arises from southern Panama over most of northern South America and is found in Ecuador, northern Peru, southern Bolivia, northern Argentina, eastern Guyana and Brazil. Thus, an ultrasonographic and radiographic study was performed in order to describe the morphology and development of eggs of 20 female jurará mud turtles K. scorpioides, from September 2005 to August 2006. In the first month, the ovarian cycle was characterized by absence of vitellogenic follicles, atresic follicles or oviduct eggs. From October 2005 to March 2006 on, ultrasonographic scanning allowed to establish the growing vitellogenic follicles. Vitellogenic follicles were observed with spherical to ovoid shapes, with a surrounding echogenic yolk, a nonechogenic albumin layer, and a high echogenic shell. The oviduct eggs were identified by radiography just 180 days after beginning the experiment, when the shell became enough mineralized to impress the radiographic film. This experiment allowed to obtain by means of the 7.5 MHz linear probe images with adequate resolution and penetration for visualization of follicles. Successive ultrasonographic examinations of 20 K. scorpioides females allowed to access initial stages of vitellogenic follicles and oviduct eggs, and radiographic examination revealed to be an easy technique to assess oviduct eggs and to allow evaluation of egg development in jurarás, from 6 months on.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Agreste F.R., Bombonato P.P. & Hernandez-Blazquez, F.J. 2007. [Morphometric characteristics of thymus development in dogs.] Características morfométricas do desenvolvimento do timo em cães. Pesquisa Veterinária Brasileira 27(6):236-240. Departamento de Cirurgia, Setor de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres, Universidade de São Paulo, Avenida Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-000, Brazil. E-mail: bombonat@usp.br The thymus is an organ with great immunological relevance during foetus life and neonatal period, It is the predecessor of lymphopoiesis and shows high lymphopoietic activity, being also the largest lymphoid organ during intrauterine life and at birth. In this study, the morphological aspects of the prenatal development of dog thymus were described in foetus of different ages and sexes. Twenty-four foetus of mongrel domestic dogs, males and females, were divided into four age groups. The thymus presented two lobes linked by a rose-colored tissue connection that was localized in the cranial mediastinal space. The cranial portion protrudes slightly beyond the first pair of ribs. The cells that formed the thymus parenchyma were well organized. Concentric aggregates named Hassal corpuscles were observed, involved by a thin capsule of connective tissue thickened by adipose tissue. The vessels size gradually increased with the foetus age, being larger in animals that were closer to birth. The volume (Vref) and size parameters of female thymus were larger than in males.

• Thymus vascularization lymphatic system morphometry dogs

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Agreste F.R., Bombonato P.P. & Hernandez-Blazquez, F.J. 2007. [Morphometric characteristics of thymus development in dogs.] Características morfométricas do desenvolvimento do timo em cães. Pesquisa Veterinária Brasileira 27(6):236-240. Departamento de Cirurgia, Setor de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres, Universidade de São Paulo, Avenida Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-000, Brazil. E-mail: bombonat@usp.br The thymus is an organ with great immunological relevance during foetus life and neonatal period, It is the predecessor of lymphopoiesis and shows high lymphopoietic activity, being also the largest lymphoid organ during intrauterine life and at birth. In this study, the morphological aspects of the prenatal development of dog thymus were described in foetus of different ages and sexes. Twenty-four foetus of mongrel domestic dogs, males and females, were divided into four age groups. The thymus presented two lobes linked by a rose-colored tissue connection that was localized in the cranial mediastinal space. The cranial portion protrudes slightly beyond the first pair of ribs. The cells that formed the thymus parenchyma were well organized. Concentric aggregates named Hassal corpuscles were observed, involved by a thin capsule of connective tissue thickened by adipose tissue. The vessels size gradually increased with the foetus age, being larger in animals that were closer to birth. The volume (Vref) and size parameters of female thymus were larger than in males.

Abstract in English:

Simionatto S., Vaz E.K., Michelon A., Seixas F.K., Dellagostin O.A. 2005. [Development and evaluation of new strategies for immunization against swine colibacillosis.] Desenvolvimento e avaliação de novas estratégias de imunização contra colibacilose suína. Pes-quisa Veterinária Brasileira 25(2):84-90. Laboratório de Biologia Molecular, Centro de Bio-tecnologia, UFPel, Campus Capão do Leão, Cx. Postal 354, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: ssimionatto@bol.com.br Swine colibacillosis caused by enterotoxigenic Escherichia coli remains one of the main sanitary problems in pig farms. The recombinant DNA technology offers the possibility of developing new immunization strategies. This paper describes the development of a subunit vaccine through the expression and purification of the E. coli K88 FaeC fimbrial protein. The gene that codes for this antigen was amplified by PCR and cloned into an E. coli expression vector fused to a 6X histidine tag. The recombinant protein was purified by affinity chromatography and used for mice immunization. In parallel, the same gene was cloned into an eucariotic expression vector with the addition of the Kozak sequence for improving translation of this gene in muscle cells. The resulting plasmid named pUP310 was purified in large scale and used to immunize mice. The immune response afforded by both forms of immunization was monitored by ELISA. There was an immune response in mice inoculated with pUP310 and purified FaeC. It was possible to detect anti-FaeC antibodies 42 days after the first inoculation. The antibody titer increased with time, being still detectable 7 months after the first inoculation. It is concluded that recombinant FaeC and pUP310 are potential tools for immunization of swine against E. coli K88.

• Swine colibacillosis FaeC Escherichia coli DNA vaccine recombinant vaccine.

Abstract in Portuguese:

Simionatto S., Vaz E.K., Michelon A., Seixas F.K., Dellagostin O.A. 2005. [Development and evaluation of new strategies for immunization against swine colibacillosis.] Desenvolvimento e avaliação de novas estratégias de imunização contra colibacilose suína. Pes-quisa Veterinária Brasileira 25(2):84-90. Laboratório de Biologia Molecular, Centro de Bio-tecnologia, UFPel, Campus Capão do Leão, Cx. Postal 354, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: ssimionatto@bol.com.br Swine colibacillosis caused by enterotoxigenic Escherichia coli remains one of the main sanitary problems in pig farms. The recombinant DNA technology offers the possibility of developing new immunization strategies. This paper describes the development of a subunit vaccine through the expression and purification of the E. coli K88 FaeC fimbrial protein. The gene that codes for this antigen was amplified by PCR and cloned into an E. coli expression vector fused to a 6X histidine tag. The recombinant protein was purified by affinity chromatography and used for mice immunization. In parallel, the same gene was cloned into an eucariotic expression vector with the addition of the Kozak sequence for improving translation of this gene in muscle cells. The resulting plasmid named pUP310 was purified in large scale and used to immunize mice. The immune response afforded by both forms of immunization was monitored by ELISA. There was an immune response in mice inoculated with pUP310 and purified FaeC. It was possible to detect anti-FaeC antibodies 42 days after the first inoculation. The antibody titer increased with time, being still detectable 7 months after the first inoculation. It is concluded that recombinant FaeC and pUP310 are potential tools for immunization of swine against E. coli K88.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Madruga C.R., Araújo F.R., Marques A.P.C., Carvalho C.M.E., Cusinato F.Q., Crocci A.J., Kessler R.H. & Miguita M. 2000. [Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies against Babesia bovis.] Desenvolvimento de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Babesia bovis. Pesquisa Veterinária Brasileira 20(4):167-170. Embrapa Gado de Corte, BR 262 Km 4, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for antibodies to Babesia bovis was developed and evaluated in comparison with the indirect fluorescent antibody test (IFAT). The ELISA sensitivity and specificity, estimated with 100 positive sera from cattle experimentally infected with B. bovis and 108 negative sera collected from B. bovis-free herds, were 98.0% and 98.1 %, respectively. Positive and negative predictive values were, respectively, 98.0% and 98.1 %, and precision was 98.1 %. No cross-reactions were detected with 80 sera from calves experimentally inoculated with Babesia bigemina. The ELISA was compared with IFAT using 110 cattle sera from an enzootically stable area and with 168 cattle sera from an enzootically unstable area. In both cases, there was a significant agreement between results of both tests (P=0.631 and 0.4725, respectively). In an epidemiological study performed with ELISA in the Pantanal region of the State of Mato Grosso do Sul with 1,365 cattle sera, 83.9%were positive for antibodies against B. bovis, characterizing this region as enzootically stable.

• Babesia bovis ELISA indirect fluorescent antibody test cattle epidemiological survey Pantanal Mato Grosso do Sul Brazil imunofluorescência indireta bovino levantamento sorológico Pantanal Mato Grosso do Sul Brasil.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Madruga C.R., Araújo F.R., Marques A.P.C., Carvalho C.M.E., Cusinato F.Q., Crocci A.J., Kessler R.H. & Miguita M. 2000. [Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of antibodies against Babesia bovis.] Desenvolvimento de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Babesia bovis. Pesquisa Veterinária Brasileira 20(4):167-170. Embrapa Gado de Corte, BR 262 Km 4, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. Uma prova de imunoadsorção enzimática (ELISA) para detecção de anticorpos contra Babesia bovis foi desenvolvida e avaliada em comparação à imunofluorescência indireta (IFI). A sensibilidade e especificidade do ELISA, determinadas pela análise de 100 soros positivos de bovinos infectados experimentalmente com B. bovis e 108 soros negativos colhidos de bovinos livres de infecção por este hemoparasito, foram de 98,0% e 98, 1 %, respectivamente. Os valores preditivos positivo e negativo foram, respectivamente, 98,0% e 98, 1 % e a precisão do teste foi de 9.8, 1 %. Não foram detectadas reações cruzadas com 80 soros de bezerros experimentalmente inoculados com Babesia bigemina. O ELISA foi comparado à IFI usando 110 soros de rebanhos de área de estabilidade endêmica e 168 soros de rebanhos de áreas de instabilidade endêmica. Em ambos os casos, houve concordância significativa (P=0,631 e 0,4725, respectivamente) entre os resultados demonstrados pelos dois testes. Em um estudo epidemiológico realizado com o ELISA na região do Pantanal de Mato Grosso do Sul, com 1.365 soros de bovinos, 83,9% foram positivos para anticorpos contra B. bovis, caracterizando a região estudada como endemicamente estável.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Paredes J.C.M., Oliveira L.G., Braga A.C., Trevisol I.M. & Roehe P.M. 1999. Development and standardization of an indirect ELISA for the serological diagnosis of classical swine fever. [Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica.] Pesquisa Veterinária Brasileira, 19(3/4):123-127. Equipe de Virologia, FEPAGRO- Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. An indirect enzyme linked immunoassay (ELISA-I) was developed and standardized for the serological diagnosis of classical swine fever (CSF). For the comparison, nine hundred and thirty-seven swine serum samples were tested by serum neutralization followed by immunoperoxidase staining (NPLA), considered ·as the standard. Of these, 223 were positive and 714 negative for neutralizing antibodies to classical swine fever virus (CSFV). In relation to the NPLA, the ELISA-I presented a 98.2% sensitivity; 92.86% specificity, 81.11% positive predictive value, 99.4% negative predictive value and a 94.1% precision. Statistical analysis showed a very strong correlation (r=0,94) between both tests. When compared to a commercially available ELISA kit, the performance of both, in relation to the NPLA, was simila1: It was concluded that the ELISA-I is suitable for large scale screening of antibodies to classical swine fever virus, although it does not distinguish antibodies to classical swine fever vírus from those induced by other pestiviruses.

• Classical swine fever classical swine fever virus ELISA serology Peste suína clássica vírus da peste suína clássica soroiogia.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Paredes J.C.M., Oliveira L.G., Braga A.C., Trevisol I.M. & Roehe P.M. 1999. Development and standardization of an indirect ELISA for the serological diagnosis of classical swine fever. [Desenvolvimento e padronização de um ELISA indireto para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica.] Pesquisa Veterinária Brasileira, 19(3/4):123-127. Equipe de Virologia, FEPAGRO- Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil. Um ensaio imunoenzimático do tipo ELISA indireto (ELISA-I) foi desenvolvido e padronizado para o diagnóstico sorológico de peste suína clássica. Na comparação foram utilizadas novecentas e trinta e sete amostras de soros suínos, as quais foram testadas pelo teste de soroneutralização seguido de revelação por imunoperoxidase (NPLA), tomado como padrão, resultando em 223 amostras positivas e 714 negativas. Em relação ao NPLA, o ELISA-I apresentou sensibilidade de 98,21%, especificidade de 92,86%, valor preditivo positivo de 81, 11%, valor preditivo negativo de 99,4% e precisão de 94, 1 %. A análise estatística dos resultados revelou uma correlação muito forte (r=0,94) entre os dois testes. Quando comparado com um &quot;kit&quot; de ELISA disponível comercialmente, a performance de ambos em relação ao NPLA foi similar. Concluiu-se que o ELISA-I é um teste apropriado para triagem em larga escala de soros para a detecção de anticorpos contra o Vírus da Peste Suína Clássica (VPSC), embora não seja capaz de diferenciar entre anticorpos induzidos pelo VPSC ou outros pestivírus.

Abstract in English:

Genital systems of 612 female water buffaloes (Bubalus bubalis Lin.) of undefined breed, obtained from slaughterhouses in the State of Para, were studied. A total of 77 (12.6%) animals showed abnormalities. Results from pregnant and non-pregnant animals were considered separately. In the oviducts of pregnant buffaloes, one case (1.3%) of unilateral segmentary aplasia was identified, while three similar cases (3.9%) were noted in non-pregnant buffaloes, as well as one case (1 .3%) with bilateral involvement. A large percentage (44.2%) of the findings were paraovarian cysts: 26 instances (33.8%) of unilateral paraovarian cysts were identified in the mesosalpinx, 11 (14.3%) corresponding to pregnant and 15 (19.5%) to non-pregnant females; eight bilateral cases (10.4%) were also observed, of which three (3.9%) were found in pregnant and five (6.5%) in non-pregnant buffaloes. In the uterus, out of a total of 29 (37.6%) anomalies, seven (9.1%) appeared in pregnant and 22 (28.5%) in non-pregnant buffaloes. A high prevalence (28.6%) of cystic formation on the perimetrium was observed in these animals. Malformations of the cervix were only found in three (3.9%) non-pregnant buffaloes. Two anomalies (2.6%) of the vagina were encountered in non-pregnant animals. Four (5.2%) anomalies were seen in the vestibule, one (1 .3%) in a pregnant animal and three (3.9%) in non-pregnant animals.

• Genital anomalies female buffalo genital system Bubalus bubalis

Abstract in Portuguese:

Foram estudados 612 sistemas genitais de búfalas (Bubalus bubalis Lin.) sem raça definida, provenientes de diferentes regiões do Estado do Pará e abatidas em matadouros, detectando-se anomalias em 77 (12,6%) delas. Os resultados foram considerados separadamente para animais gestantes e não gestantes. Nos oviductos de búfalas gestantes foi identificado um caso de aplasia segmentar unilateral (1,3%), enquanto em não gestantes foram assinalados três casos semelhantes (3,9%) e mais um caso bilateral (1,3%). No mesossalpinge, foram detectados 26 casos (33,8%) de cistos paraováricos unilaterais, sendo 11 (14,3%) em animais gestantes e 15 (19,5%) em não gestantes, além de oito (19,4%) casos bilaterais, sendo três (3,9%) em animais gestantes e cinco (6,5%) em não gestantes, perfazendo um total de 44,2% de cistos paraováricos nos achados. No útero foram verificadas 29 (37,6%) anomalias, sendo sete (9,1 %) em animais gestantes e 22 (28,5%) em não gestantes, com alta prevalência (28,6%) de formações císticas no perimétrio. Na cérvice foram encontradas três (3,9%) malformações em animais não gestantes. Na vagina foram encontradas duas (2,6%) anomalias em búfalas não gestantes, enquanto que no vestíbulo foram encontrados quatro (5,2%) casos, sendo um (1,3%) em búfala gestante e três (3,9%) em búfalas não gestantes.

• Patologia da reprodução sistema genital de búfalas Bubalus bubalis