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#1 - Gangrenous mastitis in sheep caused by multidrug-resistant Staphylococcus haemolyticus

Abstract in English:

Mastitis is a multifactorial disease and considered one of the most critical problems in the dairy industry worldwide. The condition is characterized by reduced milk and several abnormalities in the mammary gland. This study aimed to report an outbreak of gangrenous mastitis caused by multidrug-resistant Staphylococcus haemolyticus in a Santa Inês sheep herd. Eighteen sheep were affected, and five of them with severe clinical pictures were examined. The clinical and pathological picture were variable and characterized by apathy, anorexia, emaciation, opaque and brittle hair, apparent and congested episcleral vessels, and hyperthermia. These ewes had enlarged, firm, and painful mammary glands. Macroscopically, these lesions consisted of severe gangrenous mastitis, and microscopically, the primary lesions consisted of necrosis, thrombosis, and fibrosis of the mammary parenchyma. Milk samples from one of the five severely affected ewes were collected and cultured under aerobic or microaerophilic incubation at 37°C for 24 hours on sheep blood agar. The obtained colonies were then submitted to MALDI-TOF for speciation. The colonies were also submitted to an antimicrobial susceptibility test, genotyping of virulence factors and resistance genes were also performed. The isolates showed antimicrobial multiresistance since they were resistant to seven out of 13 tested antibiotics. The isolates were also positive for two staphylococcal enterotoxigenic genes (sec and see) and fibronectin-binding protein B (fnbB).

Abstract in Portuguese:

A mastite é uma doença multifatorial e é considerada um dos problemas mais importantes na indústria de laticínios no mundo todo. A condição é caracterizada pela redução de leite e várias anormalidades na glândula mamária. O objetivo deste estudo foi relatar um surto de mastite gangrenosa causada por Staphylococcus haemolyticus multirresistente em um rebanho ovino Santa Inês. Dezoito ovelhas foram afetadas e cinco delas com quadro clínico severo foram examinadas. O quadro clínico-patológico era variável quanto a severidade e consistia em apatia, anorexia, magreza, pelos opacos e quebradiços e vasos episclerais aparentes e ingurgitados. As ovelhas apresentavam glândulas aumentadas, firmes e dolorosas. Macroscopicamente, as principais lesões consistiam em mastite gangrenosa e microscopicamente havia necrose do parênquima glandular, trombose e fibrose. Amostras de leite de uma das cinco ovelhas severamente afetadas foram coletadas e cultivadas sob incubação aeróbica ou microaerofílica a 37°C por 24 horas em ágar sangue de ovelha. As colônias obtidas foram então submetidas ao MALDI-TOF para especiação. Além disso, as colônias foram submetidas a um teste de suscetibilidade antimicrobiana e foi realizada a genotipagem de fatores de virulência e genes de resistência. Os isolados apresentaram multirresistência antimicrobiana por serem resistentes a sete dos 13 antibióticos testados. Os isolados também foram positivos para dois genes enterotoxigênicos estafilocócicos (sec e see) e proteína B de ligação à fibronectina (fnbB).


#2 - Testicular and seminal evaluation of goats fed hay Cenostigma pyramidale

Abstract in English:

This study aimed to assess the possible occurrence of reproductive changes in male goats associated with ingestion of Cenostigma pyramidale hay. Sixteen animals divided into two experimental groups, G1 and G2 (control group) were used. Animals in G1 received 2% of forage, based on live weight (LW), composed of 100% of C. pyramidale, and animals in G2 received 2% of Panicum maximum “Massai’ grass hay, based on LW. Both groups received 1% of concentrated feed supplementation based on LW, along with mineralized salt and water ad libitum. The goats were subjected to weighing, testicular biometry, and semen and blood collection every 30 days. After 120 days, the animals were castrated and their testes were collected. Testicular measurements were performed and fragments were collected for histological processing to determine the gonadosomatic index (GSI), diameter of the seminiferous tubules, height of the germinal epithelium (HGE), volumetric proportion and volume of the testicular parenchyma components, total length of the seminiferous tubules, length of the seminiferous tubules per gram of testis, and leydigosomatic and tubulosomatic indexes. The data were evaluated for normality using the Student’s t-test. Data with normal distribution were assessed using analysis of variance (ANOVA) and the non-parametric data were evaluated using the Kruskal-Wallis test, both at 5% probability. Statistically significant differences (p<0.05) were observed for GSI (G1=0.48 ±0.08 and G2=0.34 ±0.09) and HGE (G1=52.95 ±2.99 and G2=.47.63 ±2.67) between treatments. Consumption of C. pyramidale hay increased LW and, consequently, testicular weight, contributing to high GSI. In conclusion, ingestion of C. pyramidale has no toxic effect on the testicular, seminal and histological parameters of goat testis. Due to its nutritional characteristics, consumption of this plant improves animal body development. Because C. pyramidale is adapted to semi-arid regions, it can be an alternative source of feed for goats during periods of shortage.

Abstract in Portuguese:

Para avaliar a possível ocorrência de alterações reprodutivas em caprinos machos associado ao consumo de Cenostigma pyramidale, foram utilizados 16 animais divididos em dois grupos experimentais, G1 e G2 (grupo controle). Animais pertencentes ao G1 receberam 2% de volumoso, com base no peso vivo (PV), constituído de 100% de C. pyramidale e o G2 receberam 2%, com base no PV, de feno de Panicum maximum ‘Massai’. Todos os grupos receberam 1%, com base no PV, de suplementação concentrada, além de sal mineralizado e água ad libitum. A cada 30 dias os animais eram submetidos à pesagem, biometria testicular e coletas de sêmen. O sêmen foi avaliado quanto ao volume, turbilhonamento, vigor, motilidade, concentração espermática, defeitos maiores, menores e totais. Após 120 dias os animais foram castrados e os testículos coletados. Foram realizadas as mensurações testiculares e coletados fragmentos para o processamento histológico, para determinação do índice gonadossomático, diâmetro dos túbulos seminíferos, altura do epitélio germinativo, proporção volumétrica e volume dos componentes do parênquima testicular, comprimento total dos túbulos seminíferos, comprimento de túbulo seminífero por grama de testículo, índices leydigossomático e tubulossomático. Os dados foram avaliados quanto à normalidade pelo teste t de Student, os dados com distribuição normal foram analisados por análise de variância com 5% de probabilidade e os não paramétricos, pelo teste de Kruskal-Wallis, a 5% de probabilidade. Houve diferenças significativas (p<0,05) para índice gonadossomático (G1=0,48±0,08 e G2=0,34±0,09) e altura do epitélio germinativo (G1=52,95±2,99 e G2=47,63±2,67) entre os tratamentos. O feno de catingueira promoveu aumento no peso corporal e consequentemente maior peso testicular, o que contribui para elevação do IGS. Concluiu-se que o consumo da C. pyramidale não possui efeito tóxico sobre os parâmetros testiculares, seminais e histológicos do testículo dos caprinos e que a planta, por suas características nutricionais promoveu melhora no desenvolvimento corporal dos animais e por ser uma planta adaptada ao clima do semiárido, se constitui uma fonte alternativa de alimentação para esta categoria animal, durante períodos de escassez de alimento.


#3 - Use of oral fluids to detect anti Lawsonia intracellularis antibodies in experimentally infected pigs

Abstract in English:

Several pathogens and antibodies derived from serum or produced in tissues associated with the oral cavity are present in the oral fluid (OF). Considering the applicability of this alternative sample, recent studies in veterinary medicine have tested OF as a replacement for serum in diagnostic assays. The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) to detect anti-Lawsonia intracellularis immunoglobulin A (IgA) and immunoglobulin G (IgG) in OF samples from experimentally infected pigs. Sixty-two pigs were divided into two groups: control (T1, n=30) and inoculated with L. intracellularis (T2, n=32). Blood, OF and fecal samples were collected at 0, 7, 14, 21, 28 and 42 days post-inoculation (dpi). Some adaptations of the standard technique for serum were made to IPMA for the detection of IgA and IgG in OF. The IPMA showed high specificity and sensitivity for serum samples and high specificity and moderate sensitivity for the detection of IgA and IgG in OF. There was high agreement between the results of serum IgG and OF IgA and IgG. Based on our results, oral fluid samples may be used for the evaluation and determination of anti-L. intracellularis antibodies in pigs, but not for individual diagnosis of swine proliferative enteropathy.

Abstract in Portuguese:

Vários patógenos e anticorpos derivados do soro ou produzidos em tecidos associados a cavidade oral estão presentes no fluido oral (FO). Considerando a aplicabilidade dessa amostra alternativa, estudos recentes em medicina veterinária têm testado o FO como substituto do soro para testes diagnósticos. O objetivo desse estudo foi padronizar a imunoperoxidase em monocamada de célula (IPMC) para a detecção de imunoglobulina A e imunoglobulina G anti-Lawsonia intracellularis em amostras de FO de suínos experimentalmente infectados. Um total de 62 suínos foram divididos em dois grupos: controle (T1, n=30) e inoculados com L. intracellularis (T2, n=32). Sangue, FO e amostras de fezes foram coletados aos 0, 7,14, 21, 28 e 42 dias após a inoculação (dpi). Algumas adaptações da técnica foram realizadas na técnica padrão da IPMC para a detecção de IgA e IgG. A IPMC demostrou alta especificidade e sensibilidade para amostras de soro e alta especificidade de moderada sensibilidade para a detecção de IgA e IgG em FO. Houve alta concordância entre resultados de detecção de IgG em soro com a IgA e IgG em amostras de FO. Baseado em nossos resultados, amostras de fluido oral podem ser usadas em avaliações e detecção de anticorpos anti-L. intracellularis em suínos, porém não de forma individual.


#4 - Indirect ELISA (iELISA) standardization for the diagnosis of bovine enzootic leukosis

Abstract in English:

Enzootic bovine leukosis (EBL) is an infectious disease caused by bovine leukemia virus (BLV) that affects cattle worldwide. Agar gel immunodiffusion (AGID) was the reference test for EBL diagnosis for many years, but enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed higher sensitivity, was faster to perform, and resulted in an objective reading. However, the importation of ELISA kits is lengthy and expensive, and currently, no AGID kits are available in Brazil. The aim of this work was to standardize an indirect ELISA (iELISA) for EBL diagnosis using BLV antigens produced in Tadarida brasiliensis lung (Tb1Lu) cells, which are Bovine viral diarrhea virus (BVDV) free, unlike fetal lamb kidney (FLK) cells, currently used for this purpose. Following standardization, iELISA results were compared with those obtained by AGID and the commercial Chekit Leucose-Serum ELISA. Compared to AGID, iELISA had 94,44% sensitivity, 75.68% specificity, 79.10% positive predictive value (PPV) and 93.30% negative predictive value (NPV), with 84% concordance and a Kappa index of 0.699. Compared to the Chekit Leucose-Serum ELISA, iELISA showed 92.60% sensitivity, 87.09% specificity, 90.27% PPV and 90,00% NPV, with 90.27% concordance and a Kappa index of 0.801. Taking into account the high agreement with the traditional tests and the absence of non-specific reactions with BVDV, the developed assay could be used as diagnostic method to control EBL in Brazil.

Abstract in Portuguese:

A leucose enzoótica bovina (LEB) é uma doença infecciosa natural dos bovinos com distribuição mundial causada pelo “bovine leukemia virus” (BLV). A imunodifusão em gel de ágar (IDGA) foi considerada por muitos anos o teste de eleição, porém ensaios imunoenzimáticos (ELISA) apresentam sensibilidade mais elevada e leitura mais rápida e objetiva. No entanto, a importação de kits de ELISA é um processo dispendioso e demorado, e atualmente não há kits de IDGA comercialmente disponíveis no Brasil. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi padronizar um ELISA indireto (iELISA) para diagnóstico da LEB utilizando antígenos produzidos a partir do cultivo do BLV em linhagem celular Tadarida brasiliensis “lung” (Tb1Lu) livre de “bovine viral diarrhea virus” (BVDV), diferentemente do que acontece com as linhagens “fetal lamb kidney” (FLK) atualmente utilizadas na produção desses antígenos para uso em ensaios sorológicos. Após a padronização do iELISA, os resultados foram comparados com aqueles obtidos por IDGA e pelo ELISA comercial “Chekit Leucose-Serum”. Comparado ao IDGA, o iELISA apresentou 94,44% de sensibilidade, 75,68% de especificidade, valor preditivo positivo (VPP) de 79,1% e valor preditivo negativo (VPN) de 93,3%, com concordância entre os testes de 84% e o índice Kappa 0,699. Quando comparado ao ELISA “Chekit Leucose-Serum”, o iELISA apresentou sensibilidade de 92,6%, especificidade de 87,09%, VPP de 90,27% e VPN de 90%, com concordância de 90,27% e o índice Kappa 0,801. Portanto, devido à alta concordância com os testes tradicionais e ausência da ocorrência de reações inespecíficas com BVDV, o ensaio desenvolvido pode ser utilizado como ferramenta diagnóstica para o controle da LEB no Brasil.


#5 - Evaluation of galectins 1 and 3 expression in canine melanoma

Abstract in English:

Canine melanoma is a frequently-occuring neoplasm in dogs and presents as malignant and highly metastatic in this context, studies that contribute to the understanding of the tumor microenvironment in melanoma include the role of galectins. Galectins are proteins of the family of animal lectins that display carbohydrate recognition domains. Galectin-1 and galectin-3 are associated with neoplastic transformation, neoplastic cell survival, angiogenesis, immune system evasion, and metastasis. The goal of this study was to establish a correlation between expression patterns of galectin-1 and galectin-3 and the different degrees of aggressiveness of canine melanoma, as well as to determine serum concentration of galectin-3 in dogs with melanoma. Galectin-1 and galectin-3 expression was analyzed by immunohistochemistry in 30 canine melanomas, six melanocytomas and nine metastatic lymph nodes from patients whose primary tumors were also processed and analyzed. Serum samples from 30 dogs were collected and galectin-3 concentration was determined by ELISA and compared to the samples of 10 healthy dogs. Canine melanoma samples expressed galectin-1 in the cytoplasm and presented a variable pattern of galectin-3 staining depending on melanoma aggressiveness. We observed a decrease in the percentage of cells with cytoplasmic galectin-3 immunolabeling simultaneous to the increased nuclear staining intensity, while there was also a decrease in the percent frequency of nuclear galectin-3 immunolabeled cells according to progression of melanoma, comparing the least to the most aggressive cases. Dogs with melanoma had increased serum levels of galectin-3 when compared to healthy animals, suggesting its potential biomarker of patients with melanoma.

Abstract in Portuguese:

O melanoma canino é uma neoplasia frequente em cães que apresenta um potencial maligno e metastático. Neste contexto, investigar o microambiente tumoral é fundamental para compreender os mecanismos intercelulares e intracelulares envolvidos no desenvolvimento e progressão da doença. Neste estudo, destacamos as galectinas, proteínas da família das lectinas animais que exibem domínios de reconhecimento à carboidratos; a galectina-1 e a galectina-3 estão associadas a transformação neoplásica, sobrevivência de células neoplásicas, angiogênese, evasão do sistema immune e desenvolvimento de metástases. O objetivo deste estudo foi determinar os padrões de expressão de galectina-1 e galectina-3 em diferentes graus de agressividade do melanoma canino, bem como dosar a concentração sérica de galectina-3 em cães com melanoma e comparar com cães saudáveis. A expressão de galectina-1 e galectina-3 foi analisada em 30 melanomas caninos, seis melanocitomas e nove linfonodos metastáticos. A galectina-3 sérica foi mensurada em 30 cães com melanoma e comparada a 10 cães saudáveis. No melanoma canino a expressão de galectina-1 foi citoplasmática e a expressão de galectina-3 foi variável de acordo com o grau de agressividade. Notou-se uma redução na porcentagem de células com imunomarcação de galectina-3 citoplasmática e um aumento simultâneo da intensidade de imunomarcação nuclear, enquanto houve também uma diminuição na frequência percentual de células com imunomarcação nuclear de acordo com a progressão do melanoma comparando-se os casos menos com os mais agressivos. Cães com melanoma apresentaram níveis séricos aumentados de galectina-3 quando comparados a animais saudáveis, mostrando seu uso potencial como biomarcador em pacientes com melanoma.


#6 - Effects of canine adipose-derived mesenchymal stem cells on the epithelialization of rabbits’ skin autograft (Oryctolagus cuniculus)

Abstract in English:

The present study aimed to evaluate the effects of mesenchymal stem cells derived from canine adipose tissue in the healing process of full-thickness mesh skin grafts in rabbits. The stem cells were collected from young dogs; and, after characterization, remained in cryopreservation, in independent doses containing 2 x 106 cells. The mesh distal limb graft technique was performed in 60 rabbits, divided into three groups, CG (Control Group), GT1 (Intralesional Stem Cell Treated Group), and GT2 (Intravenous Stem Cell Treated Group), containing 20 animals each. After grafting, each group was randomly divided into four subgroups according to euthanasia time 3, 7, 14, and 30 days, containing five animals in each group. Animals of GT1_14, GT1_30, and GT2_14, GT2_30 subgroups received a second dose of xenogeneic cells on the seventh day. Meanwhile, animals from GT1_30 and GT2_30 received the third dose of xenogeneic cells on day 14. The groups treated with xenogeneic stem cells positively affected type III collagen re-epithelialization and deposition, and possibly GT1 had a controlled inflammatory response. However, no effect on angiogenesis. Thus, it was possible to demonstrate tolerance and therapeutic action of mesenchymal stem cells from canine adipose tissue in skin grafts in rabbits.

Abstract in Portuguese:

O presente estudo teve como principal objetivo avaliar os efeitos das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães no processo de cicatrização de autoenxertos de pele de espessura total em malha em coelhos. As células-tronco foram coletadas de cães jovens, após a caracterização estas permaneceram em criopreservação, em doses individuais contendo 2 x 106 células. A técnica de enxerto em malha na região distal do membro foi realizada em 60 coelhos, divididos em três grupos, GC (Grupo Controle), GT1 (Grupo tratado com células-tronco intralesional) e GT2 (Grupo tratado com células-tronco via endovenosa), contendo 20 animais cada. Imediatamente após a enxertia, cada grupo foi dividido aleatoriamente em quatro subgrupos, de acordo com o tempo de eutanásia 3, 7, 14 e 30 dias contendo cinco animais cada. Animais dos subgrupos GT1_14, GT1_30 e GT2_14, GT2_30 receberam uma segunda dose de células xenógenas no sétimo dia. Ademais, animais do GT1_30 e do GT2_30 receberam a terceira dose de células xenógenas no dia 14. Os grupos tratados com células-tronco xenógenas tiveram um efeito positivo na reepitelização e deposição de colágeno tipo III, e possivelmente, o GT1 teve uma resposta inflamatória controlada, entretanto o efeito na angiogênese não foi observado. Dessa forma, foi possível demonstrar que houve tolerância e ação terapêutica das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de cães em enxertos de pele em coelhos.


#7 - Neoplasms in domestic hamsters in Southern Brazil: epidemiological and pathological aspects of 40 cases

Abstract in English:

Although neoplasms are commonly reported in domestic hamsters, retrospective studies approaching spontaneous tumors with data regarding epidemiological findings are scarce. The present study aimed to describe the epidemiological and pathological findings of 40 cases of tumors in domestic hamsters diagnosed in a veterinary pathology laboratory in Southern Brazil from 2002 to 2019. Chinese hamster (Cricetulus griseus) was the most commonly affected species (16/40), followed by Djungarian hamster (Phodopus sungorus, 11/40) and Syrian hamster (Mesocricetus auratus, 4/40). Among the cases, 57.5% were females (23/40), while 42.5% were males (17/40). The affected hamsters’ median age was of 14-months old, with an age range of 8- to 36-months old. Twenty-four cases were assessed as anatomopathological samples (biopsies), while 16 were composed of carcasses submitted to postmortem examination, and, therefore, the neoplasm was related to the cause of death. The integumentary system was frequently affected (60%, 24/40), followed by the female reproductive tract (22.5%, 9/40), hematopoietic system (10%, 4/40), digestive tract (5%, 2/40), and endocrine system (2.5%, 1/40). The most frequent neoplasm was squamous cell carcinoma (35%, 14/40), mostly on the lip/nasal region (50%, 7/14). Other tumors included fibrosarcoma (10%, 4/40), lymphoma (10%, 4/40), mammary cystadenoma (10%, 4/40), apocrine sweat gland adenoma (7.5%, 3/40), hemangiosarcoma (5%, 2/40), leiomyosarcoma (5%, 2/40), and granulosa ovarian cell tumor (5%, 2/40). The five remaining cases occurred individually and were composed of hepatoid gland adenoma, solid thyroid carcinoma, cutaneous melanoma, ovarian teratoma, and cutaneous trichoblastoma. Neoplasms were identified as an important cause of death and major reason to perform biopsy in domestic hamsters in Southern Brazil.

Abstract in Portuguese:

Embora neoplasmas em hamsters domésticos sejam comumente relatados, estudos retrospectivos abordando neoplasias espontâneas e os dados epidemiológicos associados são escassos. O presente estudo teve o objetivo de descrever os principais achados epidemiológicos e patológicos de 40 casos de tumores em hamsters domésticos diagnosticados em um laboratório de patologia veterinária do Sul do Brasil de 2002 a 2019. A principal espécie acometida foi o hamster chinês (Cricetulus griseus, 16/40), seguido por hamster anão russo siberiano (Phodopus sungorus, 11/40) e hamster sírio (Mesocricetus auratus, 4/40). As fêmeas corresponderam a 57,5% dos casos (23/40), enquanto os machos representaram 42,5% (17/40). Foram afetados roedores com uma faixa etária de 8 a 36 meses de idade, e uma mediana de 14 meses. Do total de casos, 24 foram exames anatomopatológicos (biopsias) e 16 casos foram examinados através de necropsia e, portanto, relacionados com a causa da morte dos animais. O sistema tegumentar foi o mais frequentemente acometido (60%; 24/40), seguido pelo trato reprodutivo (22,5%; 9/40), sistema hematopoietico (10%; 4/40), trato digestório (5%; 2/40) e sistema endócrino (2,5%; 1/40). A neoplasia mais frequentemente diagnosticada foi o carcinoma de células escamosas (35%; 14/40), localizado principalmente em região labionasal (50%; 7/14). Outros tumores incluíram fibrossarcoma (10%; 4/40), linfoma (10%; 4/40), adenoma cístico de glândula mamária (10%; 4/40), adenoma de glândula sudorípara (7,5%; 3/40), hemangiossarcoma (5%; 2/40), leiomiossarcoma (5%; 2/40) e tumor de células da granulosa (5%; 2/40). Os outros cinco casos remanescentes ocorreram individualmente e eram compostos por adenoma de glândula hepatoide, carcinoma sólido de tireoide, melanoma cutâneo, teratoma ovariano e tricoblastoma cutâneo. Neoplasmas foram identificados como importantes causas de morte ou razões para realização de biopsia em hamsters domésticos no Sul do Brasil.


#8 - Assessment of fetal lung maturity using analysis of amniotic fluid from ewes that gave birth prematurely and at term

Abstract in English:

The aim of this study was to evaluate the lung maturity of premature and full-term lambs by analyzing amniotic fluid using the following methods: Clements test, Nile blue cytology test, hematoxylin-Shorr stain, lamellar body count, and radiographic tests. The use of these methods is intended to identify high-risk newborns and provide immediate clinical intervention after birth. Altogether, 56 animals (24 ewes and 32 lambs) were included in the study and divided into 3 groups. Group I consisted of 8 ewes that were at approximately 145 days of gestation; this group delivered 10 lambs naturally. Group II consisted of 8 ewes that were at 138 days’ gestation; this group delivered 11 lambs by cesarean section. Group III consisted of 8 ewes at 138 days’ gestation; this group was administered intramuscular dexamethasone (16mg/animal) 36 hours prior to a cesarean section. Group III delivered11 lambs. Cytological tests were performed using a microscope with a maximum magnification of 1000x, while the Clements test was visually observed by one of the researchers. Amnioticfluid lamellar body counts were measured using transmission electron microscopy. Among the staining methods, hematoxylin-Shorr was reliable, and Group III had a greater number of orangeophilic cells when compared to Group II, probably due to corticoid administration. The Clements test showed pulmonary maturity in approximately 20% of Group I lambs and Group II showed 9.1% of bubbles; however, Group III had the highest pulmonary maturity percentage (36.4%). The lamellar bodies were measured, and all groups had sizes between 0.019 and 0.590µm. Radiographic evaluation revealed that the majority of lambs presented some level of pulmonary radiodensity, indicating an acinar pattern at birth. These results are in line with the expectations of each group. We found that the normal group showed greater pulmonary maturity, whereas Group II presented pulmonary immaturity, which is expected because this group comprised lambs born prematurely and Group III showed pulmonary maturity almost comparable to the normal delivery group (Group I). This is due to the fact that although these animals are premature, the use of dexamethasone helped in pulmonary maturation. Therefore, these pulmonary maturity tests are considered effective when more than one technique is used and can be used routinely in the care of a pregnant ewe in labor, where a simple collection of amniotic fluid can predict a high-risk pregnancy and alert the veterinarian if the newborn needs intensive supportive treatment.

Abstract in Portuguese:

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cordeiros prematuros e a termo por meio da análise do líquido amniótico utilizando os seguintes métodos: teste de Clements, teste de citologia do azul do Nilo, coloração de hematoxilina-Shorr, contagem de corpos lamelares e testes radiográficos. Um desses métodos tem por objetivo identificar recém-nascidos de alto risco e fornecer intervenção clínica imediata após o nascimento. Ao todo, 56 animais (24 ovelhas e 32 cordeiros) foram incluídos no estudo e divididos em 3 grupos. O grupo I foi composto por 8 ovelhas com aproximadamente 145 dias de gestação; este grupo deu à luz 10 cordeiros naturalmente. O Grupo II foi composto por 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo deu à luz 11 cordeiros por cesariana. Grupo III consistiu de 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo recebeu dexametasona intramuscular (16 mg / animal) 36 horas antes de uma cesariana. O Grupo III entregou 11 cordeiros. Os testes citológicos foram realizados em microscópio com aumento máximo de 1000x, enquanto o teste de Clements foi observado visualmente por um dos pesquisadores. A contagem de corpos lamelares de líquido amniótico foi medida usando microscopia eletrônica de transmissão. Dentre os métodos de coloração, o hematoxilina-Shorr foi confiável, sendo que o Grupo III apresentou maior número de células orangeofílicas quando comparado ao grupo II, provavelmente devido à administração de corticóide. O teste de Clements mostrou maturidade pulmonar em aproximadamente 20% dos cordeiros do Grupo I e o Grupo II apresentou 9,1% de bolhas; entretanto, o Grupo III apresentou o maior percentual de maturidade pulmonar (36,4%). Os corpos lamelares foram medidos e todos os grupos apresentaram tamanhos entre 0,019 e 0,590µm. A avaliação radiográfica revelou que a maioria dos cordeiros apresentava algum grau de radiodensidade pulmonar, indicando padrão acinar ao nascimento. Esses resultados estão alinhados com as expectativas de cada grupo. Verificamos que o grupo normal apresentou maior maturidade pulmonar, enquanto o Grupo II apresentou imaturidade pulmonar, o que é esperado por se tratar de cordeiros nascidos prematuramente e o Grupo III apresentou maturidade pulmonar quase comparável ao grupo de parto normal (Grupo I). Isso se deve ao fato de que, embora esses animais sejam prematuros, o uso da dexametasona auxiliou na maturação pulmonar. Portanto, esses testes de maturidade pulmonar são considerados eficazes quando mais de uma técnica são utilizadas e podem ser usadas rotineiramente no cuidado de uma ovelha gestante em trabalho de parto, onde uma simples coleta de líquido amniótico pode prever uma gravidez de alto risco e alertar o veterinário se o recém-nascido precisa de tratamento de suporte intensivo.


#9 - Acute-phase protein concentration in bronchoalveolar lavage fluid from healthy horses

Abstract in English:

Bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was analyzed to obtain information on leakage of acute-phase proteins from the blood into the respiratory lumen and about local synthesis. Ceruloplasmin, transferrin, albumin, α1-antitripsin, immunoglobulin G heavy, immunoglobulin G light, immunoglobulin A, haptoglobin, acidic glycoprotein, and P23 were measured in BALF from 30 horses without inflammatory disease by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). In serum, the same proteins were identified except for α1-antitrypsin. In conclusion, this study demonstrated that polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) can be used for the determination of acute-phase proteins in BALF samples from horses. In healthy horses, the values are very low, but they can be compared with reference values to assist in the diagnosis of animals with respiratory diseases.

Abstract in Portuguese:

O líquido obtido através da lavagem broncoalveolar (LBA) foi analisado para obter informações sobre as proteínas da fase aguda. Ceruloplasmina, transferrina, albumina, α1-antitripsina, imunoglobulina G pesada, imunoglobulina G leve, imunoglobulina A, haptoglobina, glicoproteína ácida e P23 foram medidas nos LBA de 30 cavalos sem doença inflamatória por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE). No soro, as mesmas proteínas foram identificadas, exceto a α1-antitripsina. Em conclusão, este estudo demonstra que a eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) pode ser usada para a determinação de proteínas de fase aguda em amostras de LBA em cavalos. Em cavalos saudáveis, os valores são muito baixos, no entanto, podem ser comparados e auxiliar no diagnóstico de animais com doenças respiratórias.


#10 - Histomorphometric and immunohistochemical evaluation of the frontal cerebral cortex in diabetic rats after treatment with melatonin

Abstract in English:

The central nervous system is vulnerable to complications caused by diabetes. These complications lead to increased oxidative stress in the brain, resulting in damage to the cerebral cortex, among other regions. Insulin and hypoglycemic agents are still the most widely used treatments. However, current research with an experimental model of diabetes suggests the use of antioxidants, such as melatonin. Thus, we tested the hypothesis that exogenous melatonin may decrease or prevent the effects of diabetes in the frontal cortex of the rat brain. Fifty albino rats were allocated into five groups: GC = rats without diabetes induction, GD = diabetic rats induced by streptozotocin, GDM = streptozotocin-induced and melatonin-treated diabetic rats, GDI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with insulin, GDMI = diabetic rats induced by streptozotocin and treated with melatonin and insulin simultaneously. Diabetes was induced by intraperitoneal administration of streptozotocin (60mg/kg). Insulin (5U/day) was administered subcutaneously and melatonin (10mg/kg) by drinking water; both treatments last days after. We analyzed animals’ weight, the cytokines IL-6 and TNF-α, apoptosis, glycogen, and did morphometry and histopathology of the frontal cortex were analyzed. The results showed that the cerebral cortex of the diabetic animals presented axonal degeneration, reduced number of neurons in the cortex, reduced glycogen, increased IL-6 and TNF-α expression, high apoptotic index, and reduced animal weight and the brain. Treatment with melatonin associated or not with insulin prevented such effects. Thus, we conclude that melatonin associated with insulin may be an alternative for avoiding the impact of diabetes in the brain’s frontal cortex.

Abstract in Portuguese:

O sistema nervoso central é vulnerável a complicações originadas pelo diabetes estresse oxidativo no cérebro e resultando em lesões no córtex cerebral, dentre outras regiões. A insulina e hipoglicemiantes ainda são os tratamentos mais utilizados, entretanto, pesquisas atuais com modelo experimental do diabetes sugerem a utilização de antioxidantes como, por exemplo, a melatonina. Assim, testamos a hipótese de que a melatonina exógena pode diminuir ou prevenir os efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro de ratos. Foram utilizados 50 ratos albinos, divididos em 5 grupos: GC = ratos sem indução ao diabetes, GD = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina, GDM = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina, GDI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com insulina, GDMI = ratos induzidos ao diabetes pela estreptozotocina e tratados com melatonina e insulina simultaneamente. O diabetes foi induzido pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (60mg/kg). A insulina (5U/dia) foi administrada por via subcutânea e a melatonina (10mg/kg) pela água de beber. Ambos tratamentos foram realizados durante 30 dias após a indução. Foram analisados o peso dos animais, do cerebro, as citocinas IL-6 e TNF-α, apoptose, glicogênio, além da morfometria e histopatologia do córtex frontal. Os resultados mostraram que o córtex cerebral dos animais diabéticos apresentou degeneração axonal, redução do número de neurônios no córtex, redução do glicogênio, aumento da expressão do IL-6 e TNF-α, elevação do índice apoptótico, além da redução do peso dos animais e do cérebro. O tratamento com melatonina associada ou não a insulina preveniu tais efeitos. Assim, concluímos que a melatonina associada ou não a insulina pode ser uma alternativa na prevenção dos efeitos do diabetes no córtex frontal do cérebro.


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