Resultado da pesquisa (226)

Termo utilizado na pesquisa plasm

#1 - Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii, and Neospora caninum infection in bovine fetuses from a slaughterhouse in southern Brazil

Abstract in English:

This study aims to describe the molecular detection of Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii, and Neospora caninum in brain samples obtained from bovine fetuses at a slaughterhouse in South Brazil. Brain samples from 35 fetuses of asymptomatic pregnant beef cows underwent nested polymerase chain reaction (PCR) to amplify a fragment of the 18S rRNA gene specific to S. neurona, T. gondii, and N. caninum. The amplicons were subjected to a two-step digestion process: first, with the restriction enzyme DdeI, which differentiates N. caninum from T. gondii and S. neurona; and subsequently, with the HpaII enzyme, to distinguish S. neurona from T. gondii and N. caninum. Of the 35 brain samples tested, 26 yielded positive PCR results for the 18S rRNA gene. Of these, 23 were digested with restriction enzymes, yielding 17 positive samples for S. neurona, five for N. caninum, and one for T. gondii. Specific primers for S. neurona, N. caninum, and T. gondii were employed to confirm the restriction fragment length polymorphism results. DNA sequencing and phylogenetic analysis, based on the ITS-1 region, were conducted on a positive sample for S. neurona, confirming our surprising findings. The sequence from fetus 75 exhibited a high nucleotide identity (97.79%) and clustered with S. neurona sequences available in GenBank. Molecular analyses confirmed the unprecedented detection of S. neurona, a protozoan not previously reported in cattle, in bovine fetal brain samples, thereby underscoring the necessity for further research on Apicomplexa protozoan infections in cattle.

Abstract in Portuguese:

Este estudo tem como objetivo descrever a detecção molecular de Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii e Neospora caninum em amostras de cérebro obtidas de fetos bovinos em um matadouro no Sul do Brasil. Amostras de cérebro de 35 fetos de vacas gestantes assintomáticas foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) aninhada para amplificar um fragmento do gene 18S rRNA específico para S. neurona, T. gondii e N. caninum. Os amplicons foram submetidos a um processo de digestão em duas etapas: primeiro, com a enzima de restrição DdeI, que diferencia N. caninum de T. gondii e S. neurona; e posteriormente, com a enzima HpaII, para distinguir S. neurona de T. gondii e N. caninum. Das 35 amostras de cérebro testadas, 26 apresentaram resultados positivos na PCR para o gene 18S rRNA. Destas, 23 foram digeridas com enzimas de restrição, resultando em 17 amostras positivas para S. neurona, cinco para N. caninum e uma para T. gondii. Primers específicos para S. neurona, N. caninum e T. gondii foram empregados para confirmar os resultados do polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição. Sequenciamento de DNA e análise filogenética, baseada na região ITS-1, foram realizados em uma amostra positiva para S. neurona, confirmando nossos resultados surpreendentes. A sequência do feto 75 apresentou uma alta identidade de nucleotídeos (97,79%) e se agrupou com sequências de S. neurona disponíveis no GenBank. As análises moleculares confirmaram a detecção inédita de S. neurona, um protozoário não anteriormente relatado em bovinos, em amostras de cérebro fetal bovino, destacando assim a necessidade de mais pesquisas sobre infecções por protozoários do filo Apicomplexa em bovinos.


#2 - Salivary gland adenocarcinoma in a capuchin monkey (Sapajus nigritus)

Abstract in English:

Salivary gland neoplasms are infrequently documented in veterinary medicine and rare in non-human primates; therefore, they are scarce in the literature. Adenocarcinomas are malignant neoplasms that originate in the glandular epithelium and can affect various species. Our study presents detailed cytological, histological, and immunohistochemical findings of a salivary gland adenocarcinoma in a capuchin monkey (Sapajus nigritus). In the necropsy, a multilobulated mass was observed in the left submandibular region, characterized by a dark red surface, soft and firm upon cut surface. Histologically, a neoplastic proliferation of malignant epithelial cells was identified in the submandibular region and the lungs. The cells showed acinar formation, areas of architectural tissue differentiation loss, and solid aggregates. Immunohistochemistry was conducted to corroborate and elucidate the case. In the neoplasia, there was positive immunolabelling for pan-cytokeratin (Pan CK) and cytokeratin 7 (CK7), and negative labeling for thyroglobulin, thyroid transcription factor-1 (TTF-1), cytokeratin 20 (CK20), and Napsin A. The cytological, anatomopathological, and immunohistochemical findings lead to the diagnosis of salivary gland adenocarcinoma. Remarkably, this report seems to be the inaugural documentation of this neoplasm in a capuchin monkey (Sapajus nigritus).

Abstract in Portuguese:

Neoplasias de glândula salivar são pouco documentadas na medicina veterinária e raras em primatas não-humanos, portanto são escassos na literatura. Adenocarcinomas são neoplasias malignas que se originam do epitélio glandular e podem afetar várias espécies. Nosso estudo apresenta achados citológicos, histológicos e imuno-histoquímicos de um adenocarcinoma de glândula salivar em macaco-prego (Sapajus nigritus). Na necropsia, foi observada uma massa multilobulada na região submandibular esquerda, caracterizada por uma superfície vermelha escura e macia a firme ao corte. Histologicamente, uma proliferação neoplásica de células epiteliais malignas foi identificada na região submandibular e nos pulmões. As células apresentaram formação acinar, áreas com perda de diferenciação tecidual e agregados sólidos. Foi realizado imuno-histoquímica para corroborar e elucidar o caso. Houve imunomarcação positiva para citoqueratina (Pan CK) e citoqueratina 7 (CK7), e marcação negativa para tireoglobulina, fator de transcrição de tireoide-1 (TTF-1), citoqueratina 20 (CK20) e Napsin A. Os achados citológicos, anatomopatológicos e imuno-histoquímicos levam ao diagnóstico de adenocarcinoma de glândula salivar. Este relato apresenta um caso que parece ser inédito desta neoplasia em um macaco-prego (Sapajus nigritus).


#3 - Bovine abortion caused by Ureaplasma diversum infection in Midwest Brazil

Abstract in English:

Ureaplasma diversum has been reported to infect the respiratory and genital systems in cattle, leading to numerous reproductive alterations, including abortions. However, detailed and comprehensive studies of fetal pathology in naturally infected cases are lacking in the scientific literature to this date. Therefore, this study describes the pathological lesions in three fetuses spontaneously aborted by three heifers naturally infected with U. diversum localized in three municipalities from Mato Grosso State, Brazil. The fetal necropsy revealed diffusely reddened and unexpanded lungs. Histologically, diffuse moderate subacute to chronic neutrophilic and histiocytic bronchointerstitial pneumonia with bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia. U. diversum was identified in fetal tissues by molecular approaches and sequencing. To our knowledge, this is the first description of bovine abortion caused by U. diversum infection in the Midwest of Brazil.

Abstract in Portuguese:

Ureaplasma diversum infecta os sistemas respiratório e genital de bovinos, levando a várias alterações reprodutivas, inclusive abortos. No entanto, até o momento, não há na literatura científica, estudos detalhados e abrangentes no Brasil sobre as lesões fetais em casos naturalmente infectados. Portanto, este artigo descreve as lesões em três fetos espontaneamente abortados por três novilhas naturalmente infectadas por U. diversum localizadas em três municípios do estado de Mato Grosso, Brasil. A necropsia fetal revelou pulmões difusamente avermelhados e não expandidos. Histologicamente, havia pneumonia neutrofílica e histiocítica broncointersticial subaguda a crônica difusa e moderada com hiperplasia do tecido linfoide associado aos brônquios. U. diversum foi identificado em tecidos fetais após a realização de técnicas moleculares e sequenciamento. Esta parece ser a primeira descrição de aborto bovino causado por infecção por U. diversum na região Centro-Oeste do Brasil.


#4 - Mycoplasma spp. in Psittaciformes kept as pets in the southwestern Amazon of Brazil

Abstract in English:

Mycoplasmosis, caused by Mycoplasma spp., is a disease of great importance in birds, especially in the poultry industry. They are considered emerging bacteria that cause subclinical and clinical diseases in various birds and should not be ruled out as responsible for infections in Psittaciformes. Their development may go unnoticed, given their slow evolution, which ends up generating difficulties in the diagnosis and treatment of these animals. Thus, this research aims to detect the presence of Mycoplasma spp. in Psittaciformes kept as pets in the southwestern Amazon of Brazil. The animals in the study were kept as pets and were selected based on convenience criteria. Biological material was collected using swabs from the oral and cloacal cavities of 100 birds. Subsequently, PCR was performed in all samples to identify Mycoplasma spp. The results demonstrated the presence of DNA from Mycoplasma spp. in 7% (7/100) of the biological samples of the investigated Psittaciformes.

Abstract in Portuguese:

A micoplasmose aviária, causada por Mycoplasma spp. é uma enfermidade de grande importância nas aves, principalmente na indústria avícola. São consideradas bactérias emergentes, que causam doenças subclínicas e aparentes em diversas aves, e não devem ser descartadas como responsáveis por infecções em Psittaciformes. O desenvolvimento pode passar despercebido, dado o seu caráter de evolução lenta, o que acaba por gerar uma dificuldade no diagnóstico e no tratamento desses animais. Dito isto, esta pesquisa tem como objetivo detectar a presença de Mycoplasma spp. em Psittaciformes mantidos como pet na Amazônia Sul Ocidental do Brasil. Os animais do estudo eram criados como pets e a seleção se deu por critério de conveniência. Foram realizadas coletas de material biológico com swabs na cavidade oral e cloacal em 100 aves. Posteriormente, foi processado o PCR para identificação de Mycoplasma spp. em todas as amostras. Os resultados demonstraram a presença de DNA da bactéria Mycoplasma spp. em 7% (7/100) das amostras biológicas dos Psittaciformes investigados.


#5 - Occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in cats (Felis catus) in the municipality of Maceió, Alagoas

Abstract in English:

Toxoplasma gondii is an intracellular protozoan parasite responsible for toxoplasmosis, with felids serving as its definitive hosts. This neglected zoonotic disease affects both humans and animals worldwide. This study aimed to perform a serological survey and spatial analysis of the occurrence of anti-T. gondii IgG antibodies in cats from the municipality of Maceió, Alagoas. Overall, blood serum samples from 337 adult cats, collected from a private laboratory (137 samples) and the Zoonosis Surveillance Unit (200 samples), were tested using the indirect immunofluorescence test to detect IgG antibodies, with a cutoff dilution of 1:16. Samples with peripheral tachyzoite fluorescence were considered positive. Spatial distribution maps of Maceió’s neighborhoods and Health Districts were designed, and additional factors such as age, sex, and breed were analyzed. Serological analysis revealed that 33.53% (113/337) of the samples were seropositive, with 57.52% (65/113) originating from the private laboratory. The neighborhoods with the highest positivity rates were Ponta Verde, with 14.15% (16/113), and Benedito Bentes, with 11.50% (13/113). Health District I, a coastal and affluent area, had the highest positivity rate at 31.86% (36/113). Age analysis indicated that 60.20% (68/113) of seropositive cats were older than two years, with males comprising 55.75% of the positive cases. Most seroreactive cats were of undefined breed, with 91.15% (103/113). This study seems to be the first serological survey of T. gondii in cats from Maceió, and its findings are consistent with those from other states in northeastern Brazil. Furthermore, it highlights the need to acknowledge the relationship between the occurrence of infection and social vulnerability.

Abstract in Portuguese:

Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular responsável pela toxoplasmose, tendo os felídeos como seus hospedeiros definitivos. Essa doença zoonótica negligenciada afeta tanto humanos quanto animais em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi realizar um levantamento sorológico e uma análise espacial da ocorrência de anticorpos anti-T. gondii IgG em gatos do município de Maceió, Alagoas. No total, 337 amostras de soro sanguíneo de gatos adultos, coletadas de um laboratório privado (137 amostras) e da Unidade de Vigilância de Zoonoses (200 amostras), foram testadas utilizando o teste de imuno fluorescência indireta para detectar anticorpos IgG, com uma diluição de corte de 1:16. Amostras com fluorescência periférica de taquizoítos foram consideradas positivas. Mapas de distribuição espacial dos bairros e distritos de saúde de Maceió foram elaborados, e fatores adicionais, como idade, sexo e raça, foram analisados. A análise sorológica revelou que 33,53% (113/337) das amostras foram soropositivas, sendo 57,52% (65/113) provenientes de laboratório privado. Os bairros com as maiores taxas de positividade foram Ponta Verde (14,15%; 16/113) e Benedito Bentes (11,50%; 13/113). O Distrito de Saúde I, uma área litorânea e de alto poder aquisitivo, apresentou a maior taxa de positividade, com 31,86% (36/113). A análise etária indicou que 60,20% (68/113) dos gatos soropositivos tinham mais de dois anos de idade, sendo que os machos representaram 55,75% dos casos positivos. A maioria dos gatos sororreativos era de raça indefinida (91,15%; 103/113). Este parece ser o primeiro levantamento sorológico de T. gondii em gatos de Maceió, e seus achados são consistentes com os de outros estados do nordeste do Brasil. Além disso, destaca a necessidade de reconhecer a relação entre a ocorrência da infecção e a vulnerabilidade social.


#6 - Epidemiology of toxoplasmosis in felids and canids in Brazil: A brief One Health overview

Abstract in English:

Toxoplasmosis is a disease caused by the obligate intracellular protozoan Toxoplasma gondii, which infects animals and humans worldwide. Felids are definitive hosts that eliminate oocysts, contaminating the environment, food, and water. Among carnivores, cats are the most important hosts for the epidemiology of the disease since a single individual can shed millions of oocysts. Wild canids are considered sentinels and play an essential role in the epidemiology of toxoplasmosis due to tissue cysts in muscle cells, representing a source of infection for carnivores through predation, while environmental contamination is mainly due to oocyst shedding by felids. Free-ranging felids are more likely to be infected by T. gondii than felids living in captivity. The free-living wild canids have lower seropositivity compared to canids in captivity. This review article presents epidemiological data on toxoplasmosis in domestic and wild carnivores in Brazil, targeting professionals in clinical practice, veterinary pathology, diagnostics, and One Health. Therefore, we understand the importance of disseminating diagnoses, epidemiological investigations and animal health programs to control, prophylaxis and treat toxoplasmosis in domestic and wild carnivores.

Abstract in Portuguese:

A toxoplasmose é uma doença causada pelo protozoário intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, responsável por infectar animais e seres humanos em todo o mundo. Os felinos são hospedeiros definitivos e eliminam oocistos que contaminam o ambiente, alimentos e água. Dentre os carnívoros, os felinos são os hospedeiros mais importantes para a epidemiologia da doença, visto que um único indivíduo é capaz de excretar milhões de oocistos. Canídeos selvagens são considerados sentinelas e desempenham um papel essencial na epidemiologia da toxoplasmose, pois os cistos teciduais presentes nas células musculares representam uma fonte de infecção para carnívoros por meio da predação, enquanto a contaminação ambiental ocorre principalmente pela eliminação de oocistos por felídeos. Os felinos de vida livre têm maior probabilidade de serem infectados por T. gondii do que os felinos mantidos sob cuidados humanos. Os canídeos silvestres de vida livre apresentam menor soropositividade em comparação aos canídeos em cativeiro. Este artigo de revisão apresenta dados sobre a epidemiologia da toxoplasmose em carnívoros domésticos e silvestres no Brasil focado para profissionais da área clínica, patologia veterinária, diagnóstico e Saúde Única. Portanto entendemos a importância de divulgação de métodos de diagnósticos, investigações epidemiológicas e programas de saúde animal para contribuir com o controle, profilaxia e tratamento da toxoplasmose em carnívoros domésticos e silvestres.


#7 - Clinical, pathological and immunohistochemical characterization of spontaneous neoplasms in pet rodents in Northeastern Brazil

Abstract in English:

In the last decade, there has been a significant increase in the demand for small rodents such as hamsters, guinea pigs, rats, and mice to be kept as pets. Consequently, the veterinary care provided to these animals has also increased. The aim of this study was to describe gross, histopathological and immunohistochemical findings of 26 spontaneous neoplasms diagnosed in 25 pet rodents in Northeastern Brazil. A retrospective study was carried out from 2014 to 2022 in two veterinary diagnostic laboratories to identify cases of tumoriform lesions in these species. Hamsters represented the most frequent species in this study (60%, 15/25), followed by rats (28%, 7/25), guinea pigs (8%, 2/25), and mice (4%, 1/25), with a mean age of 17.63 months. The anatomical regions of the face/head and thoracic region were the most affected. The most affected tissues were the skin/subcutaneous/mucosal (65%, 15/26) and mammary gland (23%, 6/26). Eighteen different types of neoplasms were diagnosed, and T-cell lymphomas and mammary adenocarcinomas were the most diagnosed tumors, each corresponding to 12% (3/26) of the cases. Leiomyosarcoma, myxosarcoma and mammary adenocarcinoma metastases were also noted. Immunohistochemistry was essential for the diagnosis of certain malignant mesenchymal and round-cell neoplasms. Pet rodent neoplasms in Northeastern Brazil are common, especially in hamsters, and immunohistochemistry can be a useful tool for the definitive diagnosis of these tumors.

Abstract in Portuguese:

In the last decade, there has been a significant increase in the demand for small rodents such as hamsters, guinea pigs, rats, and mice to be kept as pets. Consequently, the veterinary care provided to these animals has also increased. The aim of this study was to describe gross, histopathological and immunohistochemical findings of 26 spontaneous neoplasms diagnosed in 25 pet rodents in Northeastern Brazil. A retrospective study was carried out from 2014 to 2022 in two veterinary diagnostic laboratories to identify cases of tumoriform lesions in these species. Hamsters represented the most frequent species in this study (60%, 15/25), followed by rats (28%, 7/25), guinea pigs (8%, 2/25), and mice (4%, 1/25), with a mean age of 17.63 months. The anatomical regions of the face/head and thoracic region were the most affected. The most affected tissues were the skin/subcutaneous/mucosal (65%, 15/26) and mammary gland (23%, 6/26). Eighteen different types of neoplasms were diagnosed, and T-cell lymphomas and mammary adenocarcinomas were the most diagnosed tumors, each corresponding to 12% (3/26) of the cases. Leiomyosarcoma, myxosarcoma and mammary adenocarcinoma metastases were also noted. Immunohistochemistry was essential for the diagnosis of certain malignant mesenchymal and round-cell neoplasms. Pet rodent neoplasms in Northeastern Brazil are common, especially in hamsters, and immunohistochemistry can be a useful tool for the definitive diagnosis of these tumors.


#8 - Co-infection by tick-borne pathogens and Leishmania spp. in dogs with clinical signs suggestive of leishmaniasis from an endemic area in northeastern Brazil

Abstract in English:

The present study aimed to investigate the occurrence of Leishmania spp., hemotropic Mycoplasma spp., tick-borne pathogens (TBP), and co-infection in dogs with clinical signs suggestive of visceral leishmaniasis (VL). It also aimed to determine the factors associated with infection and to map the distribution of co-infected dogs in an endemic area in the Northeast region of Brazil. Blood samples from 168 dogs were evaluated for serological analysis to Leishmania spp., Anaplasma spp., Ehrlichia spp., Babesia spp., and molecular assays to Leishmania spp., Anaplasma platys, Ehrlichia canis, Babesia spp., and hemotropic Mycoplasma spp. In serological and molecular analysis, 29.8% and 5.9% of dogs were co-infected. In the regression analysis, seropositivity for Ehrlichia spp., Babesia spp., and Leishmania spp. was significantly associated with the presence of petechiae, young dogs, and weight loss. Serology revealed that co-exposure with Babesia spp. and Ehrlichia spp. was associated with fever and thrombocytopenia, and there was an association between seropositivity for Ehrlichia spp. and Babesia spp. in dogs seropositive for Leishmania spp. The presence of hemotropic Mycoplasma spp. DNA was associated with anorexia. Thus, dogs with clinical VL have co-infection with other pathogens, reinforcing the importance of this study for a better understanding of these co-infections in dogs from endemic areas.

Abstract in Portuguese:

O presente estudo objetivou investigar a prevalência de Leishmania spp., Mycoplasma spp. hemotrópico, patógenos transmitidos por carrapatos (PTC), e coinfecção em cães com sinais clínicos sugestivos de leishmaniose visceral (LV), determinar os fatores associados à infecção, e mapear a distribuição de cães coinfectados em uma área endêmica no Nordeste do Brasil. Amostras de sangue de 168 cães foram avaliadas por análises sorológicas para Leishmania spp., Anaplasma spp., Ehrlichia spp., Babesia spp., e ensaio molecular para Leishmania spp., Anaplasma platys, Ehrlichia canis, Babesia spp., e Mycoplasma hemotrópico. Pelas análises sorológicas e moleculares, 29,8% e 5,9% dos cães apresentaram coinfecção, respectivamente. Na análise de regressão, a soropositividade para Ehrlichia spp., Babesia spp., e Leishmania spp. foram significantemente associadas com a presença de petéquias, cães jovens, e perda de peso. O diagnóstico sorológico revelou que a coexposição à Babesia spp. e Ehrlichia spp. está associada com febre e trombocitopenia, havendo associação entre a soropositividade para Ehrlichia spp. e Babesia spp. em cães soropositivos para Leishmania spp. A presença de DNA de Mycoplasma foi associada à anorexia. Desta forma, cães com sinais de LV possuem coinfecção com outros patógenos, reforçando a importância deste estudo para um melhor entendimento dessas coinfecções em cães de áreas endêmicas.


#9 - Comparison of direct blood smear methods to detect piroplasms in wandering horses from Midwest Brazil

Abstract in English:

Equine piroplasmosis is an apicomplexan hemoprotozoan-caused disease that affects equids worldwide. Horses that survive piroplasmosis can become asymptomatic carriers for the rest of their lives. The present study aimed to determine the frequency of piroplasms and to compare three different blood smear tests (jugular, peripheral, and splenic blood) to detect piroplasms in asymptomatic wandering horses seized by the “Secretaria de Estado da Agricultura, Abastecimento e Desenvolvimento Rural do Distrito Federal” (SEAGRI-DF), Midwest region of Brazil. Of the 100 horses evaluated, 38 were diagnosed positive for piroplasm (38%), with the etiological agents found at the jugular blood smear in 11% (11/100) of horses, peripheral blood smear in 13% (13/100), and splenic blood smear in 38% (38/100). Piroplasm-positive horses showed anemia, neutrophilia, and lymphopenia, but the hematological changes did not differ statistically between positive and negative horses. In summary, the stray horses evaluated showed a high incidence of piroplasm (38%). All positive horses presented one of the etiologic agents in the splenic blood, but some did not show the parasite in the jugular blood smear (27/38, 71%) or the peripheral blood smear (25/38, 65.8%). Thus, the splenic blood was shown to be the best sample to determine the presence of piroplasm in wandering horses. As it is a low-cost and easy-to-perform test, it can be included in the routine diagnosis of equine piroplasmosis, helping to monitor the prevalence of piroplasms in places where molecular techniques are not accessible.

Abstract in Portuguese:

A piroplasmose é uma doença causada por hemoprotozoários apicomplexos que afeta equídeos em todo o mundo. Equinos que sobrevivem à piroplasmose podem se tornar portadores assintomáticos pelo resto de suas vidas. O presente estudo teve como objetivo determinar a frequência de piroplasmas em equinos errantes apreendidos pela Secretaria de Estado da Agricultura, Abastecimento e Desenvolvimento Rural do Distrito Federal (SEAGRI-DF), região Centro-Oeste do Brasil, e comparar três diferentes exames diagnósticos de esfregaços sanguíneos: sangue jugular, periférico e esplênico. Dos 100 equinos avaliados, 38 foram diagnosticados positivos para piroplasmídeos, sendo o agente etiológico encontrado no esfregaço de sangue jugular em 11% (11/100), no esfregaço de sangue periférico em 13% (13/100) e no esfregaço de sangue esplênico em 38% (38/100) dos equinos. Os cavalos positivos apresentaram anemia, neutrofilia e linfopenia, mas as alterações hematológicas não apresentaram diferença estatística entre cavalos positivos e negativos. Em resumo, os equinos errantes avaliados apresentaram alta incidência de piroplasmídeos (38%). Todos os cavalos positivos apresentaram um dos agentes etiológicos no esfregaço sangue esplênico, mas alguns não apresentaram o parasita no esfregaço de sangue jugular (27/38, 71%) ou no esfregaço de sangue periférico (25/38, 65.8%). Assim, o sangue esplênico mostrou-se a melhor amostra para determinar a presença de piroplasmídeos em equinos errantes. Por ser um exame de baixo custo e fácil execução, pode ser incluído na rotina diagnóstica da piroplasmose equina, auxiliando no monitoramento da doença em locais onde as técnicas moleculares não são acessíveis.


#10 - Viability of Toxoplasma gondii in cattle semen cryopreserved with different concentrations of cryoprotectant

Abstract in English:

Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.

Abstract in Portuguese:

Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.


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