PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Martins G.R., Marinho R.C., Bezerra-Junior R.Q., Câmara L.M.C, Albuquerque-Pinto L.C. & Teixeira M.F.S. 2017. Isolation, culture and characterization of multipotent mesenchymal stem cells from goat umbilical cord blood. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):643-649. Laboratório de Virologia, Núcleo de Pesquisa em Sanidade Animal, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: rmgabrielle@hotmail.com Mesenchymal stem cells (MSC) reside in small numbers in many adult tissues and organs, and play an active role in the homeostasis of these sites. Goat derived multipotent MSC have been established from bone marrow, adipose tissues and amniotic fluid. Umbilical cord blood (UCB) is considered an important source of these cells. However, the MSC isolation from the goat UCB has not been demonstrated. Therefore, the aim of the present study was to isolate, culture and characterize goat umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells. MSC were isolated from UCB by Ficoll-Paque density centrifugation and cultured in DMEM supplemented with 10% or 20% FBS. FACS analysis was performed and induction lineage differentiation was made to characterize these cells. They exhibited two different populations in flow cytometry, and revealed the positive expression of CD90, CD44 and CD105, but negative staining for CD34 in larger cells, and positive stained for CD90 and CD105, but negative for CD44 and CD34 in the smaller cells. MSC from goat UCB showed capability to differentiate into chondrocytes and osteoblasts when incubated with specific differentiation medium. Present study established that goat mesenchymal stem cells can be derived successfully from umbilical cord blood.

• Mesenchymal stem cells umbilical cord células tronco cordão umbilical

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Martins G.R., Marinho R.C., Bezerra-Junior R.Q., Câmara L.M.C, Albuquerque-Pinto L.C. & Teixeira M.F.S. 2017. Isolation, culture and characterization of multipotent mesenchymal stem cells from goat umbilical cord blood. [Isolamento, cultura e caracterização de células tronco mesenquimais multipotentes provenientes do sangue do cordão umbilical caprino.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):643-649. Laboratório de Virologia, Núcleo de Pesquisa em Sanidade Animal, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: rmgabrielle@hotmail.com As células tronco mesenquimais (MSC) residem em pequenas quantidades em muitos tecidos e órgãos adultos, desempenhando um papel ativo na homeostase destes locais. O isolamento de MSC já foi demonstrado em amostras de medula óssea, tecido adiposo e fluido amniótico de cabras. O sangue de cordão umbilical é considerado uma fonte importante desse tipo de células. No entanto, até o presente momento, não foi demonstrado o isolamento de MSC provenientes do sangue de cordão umbilical de cabras. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi isolar, cultivar e caracterizar células tronco mesenquimais provenientes do sangue do cordão umbilical caprino. As MSC foram isoladas utilizando o gradiente de densidade Ficoll-Paque e cultivadas em DMEM suplementado com 10% ou 20% de FBS. A caracterização desse tipo celular foi realizada através de análise por citometria de fluxo e diferenciação em linhagens celulares mesodermais. A analise no citômetro de fluxo demonstrou a presença de duas populações distintas, um grupo com células maiores e outro com células menores; observando expressão positiva de CD90, CD44 e CD105, e negativa para CD34 nas células maiores; enquanto que as menores foram positivas para CD90 e CD105, mas negativas para CD44 e CD34. As células isoladas demonstraram capacidade de se diferenciar em condrócitos e osteoblastos quando incubadas com meio de diferenciação específico. O presente estudo demonstrou que células tronco mesenquimais podem ser obtidas com sucesso do sangue do cordão umbilical caprino.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Kawamoto F.Y.K., Muzzi L.A.L., Liria B.O.A.G., Camassa J.A.A., Moreira S.H., Rossignoli P.P. & Muzzi R.A.L. 2017. [Magnetic resonance in the evaluation of autogenous osteochondral graft in articular cartilage of rabbits.] Ressonância magnética na avaliação de enxerto osteocondral autógeno na cartilagem articular de coelhos. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(5):502-510. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Lavras, Câmpus Universitário, Av. Doutor Sylvio Menicucci 1001, Cx. Postal 3037, Kennedy, Lavras, MG 37200-000, Brazil. E-mail: fe.kawamoto@gmail.com This study aimed to determine the characteristics and applicability of magnetic resonance imaging (MRI) in the evaluation of autogenous osteochondral graft in intact or macerated format, with or without insulin-like growth factor type 1 (IGF-1) used in repair of cartilage lesions induced in rabbits. Nine New Zealand rabbits were used, in which 18 stifle joints underwent grafting procedure in the femoral trochlear groove. These were divided into four groups, referred as intact osteochondral graft + IGF-1 (n=5), intact osteochondral graft + saline solution (n=4), macerated osteochondral graft + IGF-1 (n=5) and macerated osteochondral graft + saline solution (n=4). Animals were euthanized 12 weeks after surgery and the joints were subjected to MRI using a high magnetic field scanner of 1.5 Tesla. In addition, samples of grafting sites were subjected to anatomopathological examination. The MRI was effective as a noninvasive method to evaluate the repair tissue in osteochondral grafts in articular cartilage of the femur of rabbits by providing complementary data to macroscopic and histological examinations. Through these images and anatomopathological examinations satisfactory results were observed in relation to the repair process of autogenous osteochondral grafts in cartilage of rabbits, regardless of its format or the addition of IGF-1.

• Magnetic resonance imaging osteochondral graft articular cartilage imagem por ressonância magnética enxerto osteocondral cartilagem articular

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Kawamoto F.Y.K., Muzzi L.A.L., Liria B.O.A.G., Camassa J.A.A., Moreira S.H., Rossignoli P.P. & Muzzi R.A.L. 2017. [Magnetic resonance in the evaluation of autogenous osteochondral graft in articular cartilage of rabbits.] Ressonância magnética na avaliação de enxerto osteocondral autógeno na cartilagem articular de coelhos. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(5):502-510. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Lavras, Câmpus Universitário, Av. Doutor Sylvio Menicucci 1001, Cx. Postal 3037, Kennedy, Lavras, MG 37200-000, Brazil. E-mail: fe.kawamoto@gmail.com Este trabalho teve o objetivo de determinar as características e a aplicabilidade do exame de ressonância magnética na avaliação de enxerto ostecondral autógeno, em formato íntegro ou macerado, associado ou não ao fator de crescimento semelhante à insulina tipo 1 (IGF-1), utilizado no reparo de lesões induzidas na cartilagem articular de coelhos. Foram utilizados 9 coelhos da linhagem Nova Zelândia, em que as 18 articulações fêmoro-tíbio-patelares foram submetidas à enxertia osteocondral autógena no sulco troclear femoral. Estas foram divididas em quatro grupos, denominados como enxerto osteocondral íntegro + IGF-1 (n=5), enxerto osteocondral íntegro + solução fisiológica (n=4), enxerto osteocondral macerado + IGF-1 (n=5) e enxerto osteocondral macerado + solução fisiológica (n=4). Os animais foram eutanasiados em 12 semanas após a cirurgia e as articulações foram submetidas ao exame de ressonância magnética utilizando um aparelho scanner de 1,5 Tesla de alto campo magnético. Além disso, amostras dos locais de enxertia foram submetidas aos exames anatomopatológicos. O exame de ressonância magnética mostrou-se eficaz como um método não invasivo para avaliação do tecido de reparação em enxertos osteocondrais na cartilagem articular do fêmur de coelhos, fornecendo dados complementares aos exames macroscópicos e histológicos. Por meio destas imagens e dos exames anatomopatológicos, foram observados resultados satisfatórios em relação ao processo de reparação dos enxertos osteocondrais autógenos na cartilagem de coelhos, independentemente de seu formato ou da adição de IGF-1.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Albinati A.C.L., Soares P.C., Albinati R.C.B., Moreira E.L.T., Lira A.D. & Carvalho J.V. 2017. [Toxicity of Thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri).] Toxicidade do inseticida Tiametoxam para o Pacamã (Lophisiolurus alexandri). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):307-312. Colegiado de Medicina Veterinária, Universidade do Vale do São Francisco, Rodovia BR-407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: catarina.albinati@gmail.com This research evaluated acute and chronic toxicity of a thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri), assessing the LC50 and liver histopathological changes in animals exposed for 96 hours and 15 days. Therefore, were used 120 fingerlings subjected to five different concentrations (30, 60, 120, 240 and 480mg/L) for 15 days with two sampling times, 96 hours and 15 days. There was no significant mortality during the experimental period, however the animals showed changes as vacuolation, congestion and necrosis. The LC50 was determined as greater than 100mg/L, considered practically non-toxic. Necrosis was the more significant change in exposed animals, with increasing occurrence in chronic toxicity test.

• Toxicity thiamethoxam insecticide pacamã Lophisiolurus alexandri fish toxicidade tiametoxam inseticida pacamã peixe

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Albinati A.C.L., Soares P.C., Albinati R.C.B., Moreira E.L.T., Lira A.D. & Carvalho J.V. 2017. [Toxicity of Thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri).] Toxicidade do inseticida Tiametoxam para o Pacamã (Lophisiolurus alexandri). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):307-312. Colegiado de Medicina Veterinária, Universidade do Vale do São Francisco, Rodovia BR-407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: catarina.albinati@gmail.com Este estudo avaliou a toxicidade aguda e crônica de um inseticida a base de tiametoxam para peixes da espécie Pacamã (Lophisiolurus alexandri), avaliando a CL50%, além de alterações histopatológicas hepáticas em animais expostos por 96 horas e 15 dias ao inseticida. Para tanto foram utilizados 120 alevinos submetidos a cinco diferentes concentrações do inseticida (30, 60, 120, 240 e 480mg/L) por 15 dias, com dois tempos amostrais, 96 horas e 15 dias. Não houve mortalidade significativa durante todo o período experimental, no entanto os animais apresentaram alterações como vacuolização citoplasmática, congestão e necrose. A CL50% foi determinada como superior a 100mg/L, considerada praticamente não tóxico. A necrose foi a alteração melhor evidenciada nos animais expostos, com o aumento da ocorrência nos animais do teste de toxicidade crônica.

Abstract in English:

ABSTRACT.- García J.A., Cantón G.J., García B.L., Micheloud J.F., Campero C.M., Späth E.J.A. & Odriozola E.R. 2017. Retrospective analysis of cattle poisoning in Argentina (2000-2013). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):210-214. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA), Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Ruta Nacional 226 Km 73,5, (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina. E-mail: garciajuanagustin@hotmail.com A retrospective analysis (2000 to 2013) of cattle poisoning caused by toxic plants and other compounds was carried out in the Pampas region of Argentina by the Animal Health Group of INTA-EEA, Balcarce. During this period, 1263 reports of diseases of different etiologies (infectious, parasitic, toxic, metabolic and miscellaneous) were recorded in cattle, by collecting anamnestic, clinical and pathological information. A toxic etiology was diagnosed in 21.1% of these reports. Iatrogenic poisoning caused by ionophores was the most frequently recorded etiology. Consumption of toxic plants (Wedelia glauca, Solanum glaucophyllum, among others), mycotoxins (Claviceps purpurea, Claviceps paspali, Epichloë coenophiala, among others), and plants producing cyanide and nitrates/nitrites were also commonly diagnosed. The high frequency of toxic episodes and the difficulties in their diagnosis by practitioners in our livestock production systems emphasizes the importance of this report.

• Poisoning

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- García J.A., Cantón G.J., García B.L., Micheloud J.F., Campero C.M., Späth E.J.A. & Odriozola E.R. 2017. Retrospective analysis of cattle poisoning in Argentina (2000-2013). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):210-214. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA), Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Ruta Nacional 226 Km 73,5, (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina. E-mail: garciajuanagustin@hotmail.com A retrospective analysis (2000 to 2013) of cattle poisoning caused by toxic plants and other compounds was carried out in the Pampas region of Argentina by the Animal Health Group of INTA-EEA, Balcarce. During this period, 1263 reports of diseases of different etiologies (infectious, parasitic, toxic, metabolic and miscellaneous) were recorded in cattle, by collecting anamnestic, clinical and pathological information. A toxic etiology was diagnosed in 21.1% of these reports. Iatrogenic poisoning caused by ionophores was the most frequently recorded etiology. Consumption of toxic plants (Wedelia glauca, Solanum glaucophyllum, among others), mycotoxins (Claviceps purpurea, Claviceps paspali, Epichloë coenophiala, among others), and plants producing cyanide and nitrates/nitrites were also commonly diagnosed. The high frequency of toxic episodes and the difficulties in their diagnosis by practitioners in our livestock production systems emphasizes the importance of this report.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com Sustainable control of gastrointestinal nematodes (GIN) in small ruminants has been based on the use of alternative methods, including targeted selective treatment, such as FAMACHA. Another GIN control alternative is the use of herbal medicines, although in many cases their use is based on empirical knowledge. Biopolymer nanoformulations has been investigated to maximize the essential oil effects against sheep gastrointestinal nematodes. The aim of the present study was to combine a Eucalyptus staigeriana essential oil nanoemulsion (EsNano) with FAMACHA as an alternative control for sheep haemonchosis. The study was performed over six months at a commercial sheep farm located in a semiarid region of Northeast Brazil. Initially, a fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep with levamisole, ivermectin and oxfendazole in sheep was performed used to determine the most effective anthelmintic to use as the positive control. Levamisole has been selected because it showed efficacy superior to 95%. EsNano was obtained and then its physicochemical properties were characterized. The average (±SE) size of the particles in the nanoemulsion was 276.8 (±12.3) nm with bimodal distribution and polydispersity. Nine visits were performed, from April to September 2013, with an interval of 17 days. One hundred sixty-two male and female sheep were divided into three groups (n=54 each) and were treated when FAMACHA score was 3, 4, or 5: G-EsNano 250mg kg-1 EsNano; G-Lev 7.5mg kg-1 levamisole (positive control), and G-Neg was not treated (negative control). Feces from sheep were collected to quantify the number of eggs per gram of feces (epg) and to identify nematode genera. Sheep weight gain was monitored. The epg data for each group and the average sheep weight gains were analyzed by variance analysis and compared with the Tukey’s test (P<0.05). Significant difference between the number of animals treated with EsNano and levamisole was not observed in any visit (P>0.05). The epg variation was similar in the G-EsNano and G-Lev groups on visits (P>0.05), except the second and fifth evaluation in the epg groups were significantly different (P<0.05). Haemonchus spp. was the most prevalent nematode. There was no significant weight gain in any of the treated groups (P<0.05). The combination of phytotherapy and FAMACHA can be an alternative to minimize the use of synthetic anthelmintics to control resistant GIN populations of small ruminants.

• Haemonchus contortus essential oil chitosan óleo essencial quitosana

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. [Uso da nanoemulsão de Eucalyptus staigeriana no controle da hemoncose em ovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com O controle sustentável de nematoides gastrintestinais (NGI) em pequenos ruminantes tem sido baseado na utilização de métodos alternativos, incluindo o tratamento alvo-seletivo, tal como o FAMACHA. Outra alternativa de controle de NGI é o uso de plantas medicinais, embora, em muitos casos, a sua utilização seja baseada no conhecimento empírico. Nanoformulações biopoliméricas tem sido investigadas para maximizar os efeitos de óleos essenciais sobre nematoides gastrointestinais em ovinos. O objetivo do presente estudo foi combinar a nanoemulsão do óleo essencial de Eucalyptus staigeriana (EsNano) com o método FAMACHA como uma alternativa para o controle da hemoncose em ovinos. Este estudo foi realizado ao longo de seis meses em uma fazenda comercial de ovinos localizada em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Inicialmente, um teste de redução da contagem de ovos nas fezes (FECRT) em ovinos com levamisol, ivermectina e oxfendazole foi realizado para determinar o anti-helmíntico mais eficaz, para posterior uso como controle positivo. Levamisol foi selecionado porque mostrou eficácia superior a 95%. EsNano foi obtido e, em seguida, as suas propriedades físico-químicas foram caracterizadas. O tamanho médio (±SE) das partículas na nanoemulsão foi 276,8 (±12,3) nm, com distribuição bimodal e polidispersividade. Foram realizadas nove visitas, de abril a setembro de 2013, com um intervalo de 17 dias. Cento e sessenta e dois ovinos machos e fêmeas foram divididos em três grupos (n=54 cada) e foram tratados quando o FAMACHA foi 3, 4 ou 5: G-EsNano 250 mg kg-1 EsNano; G-Lev 7,5mg kg-1 de levamisol (controlo positivo), e G-Neg não foi tratado (controle negativo). As fezes dos ovinos foram coletadas para quantificar o número de ovos por grama de fezes (opg) e identificar os gêneros de nematóides. O ganho de peso de ovinos foi monitorado. Os dados do opg de cada grupo e os ganhos de peso médio dos ovinos foram analisados por análise de variância e comparadas com o teste de Tukey (P<0,05). Diferença significativa entre o número de animais tratados com EsNano e levamisol não foi observada em nenhuma visita (P>0,05). A variação opg foi semelhante para os grupos G-EsNano e G-Lev nas vistas (P>0,05), excetuando a segunda e quinta avaliação em que os opg dos grupos foram significativamente diferentes (P>0,05). O nematoide Haemonchus spp. foi o mais prevalente. Não houve aumento significativo de peso em qualquer um dos grupos tratados (P>0,05). Assim, a combinação de fitoterapia e FAMACHA pode ser uma alternativa para minimizar o uso anti-helmínticos sintéticos para controlar populações resistentes NGI em pequenos ruminantes.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, are a painless and non-invasive source of MSC and can be used for stem cell banking.

• Cryopreservation stem cells amniotic mesenchymal layer umbilical cord fetuses cell banking criopreservação células tronco cordão umbilical

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. [Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. Apresentaram também capacidade de diferenciação in vitro nas três linhagens mesodermais e quando analisadas pós criopreservação por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram viabilidade de 80%. Estes resultados indicam que MA e TCU, obtidos tanto no momento de parto como em abatedouro, de fetos bovinos podem ser utilizados como fonte não invasiva e indolor de CTMs e possibilitam a formação de bancos de armazenamento de células.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Souza R.C.A., Peres R., Sousa M.G. & Camacho A.A. 2017. Cardiac parameters during the estrous cycle of canine bitches. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):295-299. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Universidade Estadual Paulista, Unesp-Jaboticabal, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14870-000, Brazil, E-mail: camacho@fcav.unesp.br The cardiovascular parameters of canine bitches were assessed during the estrous cycle. A total of eleven mongrel female dogs were enrolled in a longitudinal prospective investigation. Six animals were bred during the study and were assigned into group I, in which evaluations were performed during proestrus, estrus, gestational diestrus and anestrus. The five remaining bitches were not bred and underwent evaluations during proestrus, estrus, nongestational diestrus and anestrus. The holter data showed a gradual increase in the minimum and mean heart rate along pregnancy, as well as a reduction during anestrus, which differed significantly among the distinct periods. The values for maximal heart rate documented during pregnancy were significantly lower than those recorded during anestrus, and a variation in the heart rate circadian rhythm was also found, as demonstrated by decreases at night and rises during the day. Cardiac rhythm had a similar performance in both pregnancy and anestrus. Likewise, the blood pressure, electrocardiography, and echocardiography data did not vary during the estrous cycle. The results support the role played by the autonomic nervous system during these two distinct periods in order to attain a heart rate that provides the blood needed by the female’s body during the various stages of the reproductive cycle. Further studies are needed to better clarify the cardiovascular compensatory neuroendocrine events that accompany gestation in this species.

• Cardiac parameters estrous cycle cardiovascular system reproductive cycle ciclo estral sistema cardiovascular ciclo reprodutivo

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Souza R.C.A., Peres R., Sousa M.G. & Camacho A.A. 2017. Cardiac parameters during the estrous cycle of canine bitches. [Parâmetros cardíacos durante o ciclo estral de cadelas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):295-299. Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Universidade Estadual Paulista, Unesp-Jaboticabal, Via de Acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n, Jaboticabal, SP 14870-000, Brazil, E-mail: camacho@fcav.unesp.br Os parâmetros cardiovasculares de fêmeas caninas foram avaliados durante o ciclo estral. Um total de onze cadelas sem raça definida foram incluídas nesta pesquisa prospectiva longitudinal. Seis animais foram colocados em reprodução durante o estudo e avaliados durante o proestro, estro, diestro gestacional e anestro. As cinco cadelas restantes não se reproduziram e foram avaliadas durante o proestro, estro, diestro não gestacional e anestro. Os dados derivados do holter indicaram aumento gradativo nas frequências cardíacas mínima e média durante a gestação, bem como redução durante o anestro, diferindo significativamente entre os distintos períodos. Os valores da frequência cardíaca máxima documentados durante a gestação foram significativamente inferiores àqueles registrados durante o anestro. Também foi identificada variação no ritmo circadiano da frequência cardíaca, conforme demonstrado por sua redução à noite e elevação durante o dia. No entanto, o ritmo cardíaco se comportou de modo semelhante tanto na gestação quanto no anestro. Da mesma forma, os dados de pressão sanguínea, eletrocardiografia e ecocardiografia não variaram durante o ciclo estral. Os resultados atestam o papel desempenhado pelo sistema nervoso autônomo ao longo desses dois períodos distintos, visando manter uma frequência cardíaca que garanta o suprimento sanguíneo necessário pelo organismo da fêmea durante os vários estágios do ciclo reprodutivo. Estudos adicionais são necessários para esclarecer mais detalhadamente os eventos neuroendócrinos e cardiovasculares compensatórios que acompanham a gestão nessa espécie.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Alvarenga P.B., Rezende A.L., Justo F.B., Rezende S.R., Cesar J.C.G., Santos, R.M., Mundim A.V. & Saut J.P.E. 2017. [Metabolic profile of clinically healthy Jersey cows.] Perfil metabólico de vacas Jersey clinicamente saudáveis. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):195-203. Laboratório de Saúde em Grandes Animais, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Av. Pará 1720, Bloco 2T, Campus Umuarama, Bairro Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: jpsaut@ufu.br The understanding of animal metabolism is important for the success of livestock activity. The aim of this study was to determine the serum biochemical profile of clinically healthy Jersey cows in pre and postpartum, housed in semi-intensive production system in Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. Clinical examination and blood collection from 40 multiparous lactating dairy cows, between -150 days prepartum up to 60 days postpartum (DPP) were performed. At the laboratory, serum parameters of total proteins, albumin, globulins, urea, creatinine, non-esterified fatty acids (NEFA), &#946;-hydroxybutyrate (BHBA), triglycerides, cholesterol, high density lipoprotein (HDL), very low density lipoproteins (VLDL), low density lipoproteins (LDL), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyl transferase (GGT), creatine kinase (CK), calcium, phosphorus and magnesium were analyzed. To the total of cows (n=40) enrolled, only 21 cows were complied with the inclusion criterias. It was proceeded the Tukey test for parametric data, and to the nonparametric data it was held the Kruskal Wallis test for the comparison between days evaluated. There was no interference of negative energy balance and subclinical hypocalcemia in the occurrence of uterine diseases and reproductive performance. In conclusion, Jersey cows have biochemical profile characterized by hyperglobulinemia during peripartum, and high levels of triglycerides, but without impaired liver function and reproductive performance.

• Dairy cows metabolic profile postpartum perfil metabólico pós-parto vacas leiteiras

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Alvarenga P.B., Rezende A.L., Justo F.B., Rezende S.R., Cesar J.C.G., Santos, R.M., Mundim A.V. & Saut J.P.E. 2017. [Metabolic profile of clinically healthy Jersey cows.] Perfil metabólico de vacas Jersey clinicamente saudáveis. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):195-203. Laboratório de Saúde em Grandes Animais, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Av. Pará 1720, Bloco 2T, Campus Umuarama, Bairro Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: jpsaut@ufu.br O conhecimento do metabolismo dos animais é de suma importância para se obter sucesso em qualquer atividade que envolva rebanhos. Objetivou-se determinar o perfil bioquímico sérico de vacas Jersey clinicamente saudáveis no pré e pós-parto, mantidas em sistema de criação semi-intensivo na região de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. Realizou-se o exame clínico e coleta de sangue de 40 vacas da raça Jersey multíparas e lactantes em 15 momentos, entre -150 dias pré-parto até 60 dias pós-parto (DPP). No laboratório, foram analisadas as concentrações séricas de proteínas totais, albumina, globulinas, ureia, creatinina, ácidos graxos não esterificados (NEFA), &#946;-hidroxibutirato (BHBA), triglicerídeos, colesterol, lipoproteínas de alta densidade (HDL), lipoproteínas de muita baixa densidade (VLDL), lipoproteínas de baixa densi­dade (LDL), aspartato aminotransferase (AST), gama-glutamil transferase (GGT), creatina quinase (CK), cálcio, fósforo e magnésio. Dos 40 animais, apenas 21 vacas atenderam aos critérios de inclusão e seus dados foram utilizados. Procedeu-se o teste de Tukey para os dados paramétricos e para os dados não paramétricos realizou-se o teste de Kruskal Wallis na comparação entre os momentos avaliados. Não houve interferência do balanço energético negativo e da hipocalcemia subclínica na ocorrência de doenças uterinas e no desempenho reprodutivo. Concluiu-se que vacas da raça Jersey apresentam perfil bioquímico caracterizado por hiperglobulinemia durante o periparto, além de níveis elevados de triglicérides, entretanto, sem comprometimento da função hepática e desempenho reprodutivo.

Abstract in English:

This study evaluated the status of serum calcium in 39 Holstein cows with displacement of the abomasum (DA), from 30 dairy farms selected in the region of Campos Gerais, Paraná state, Brazil.. The diagnosis of abomasal displacement was performed by auscultation and percussion, besides the clinical signs and history information. Before surgery, blood samples were collected to measure blood levels of calcium, albumin, protein and glucose. As a control group, blood samples were collected from healthy cows that were in similar period of lactation. Of the 39 cows with abomasal displacement, 35 had hypocalcemia and in the control group only one cow. Blood glucose and protein concentrations were lower in the animals with DA when compared with the control group.

• Hypocalcemia displacement of abomasum cattle dairy cattle

Abstract in Portuguese:

Este estudo avaliou o status do cálcio sérico em 39 vacas com deslocamento de abomaso (DA), provenientes de 30 propriedades leiteiras selecionadas, na região de Campos Gerais no Paraná. O diagnóstico do deslocamento de abomaso foi realizado por percussão auscultatória, além dos sinais clínicos e informações da anamnese. Previamente ao procedimento cirúrgico, amostras de sangue foram coletadas para a mensuração dos níveis sanguíneos de cálcio, albumina, proteína e glicose. Como grupo controle, amostras de sangue foram coletadas de vacas hígidas que se encontravam em semelhante período de lactação. Das 39 vacas com deslocamento de abomaso, 35 apresentaram hipocalcemia e no grupo controle, apenas um animal. Concentrações sanguíneas de glicose e proteína foram inferiores nos animais com DA, quando comparados com animais do grupo controle.

• Hipocalcemia deslocamento de abomaso bovinos gado leiteiro

Abstract in English:

Tuberculosis is a debilitating infecto-contagious disease, caused by an acid-fast bacillus (AFB) that belong to different species of the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC). Mycobacteriosis are important diseases in veterinary medicine because of their zoonotic potential and worldwide distribution, affecting all classes of vertebrates. In wild animals the mycobacteriosis have been reported mainly as a problem in captivity. There are also reports in free-ranging wildlife, endangering and hampering tuberculosis erradication programs in animal production. The diagnosis of the disease in wildlife is usually postmortem, because the tuberculin test is not standardized for wildlife species, and also it is not reliable for screening. The postmortem diagnosis is based on macroscopic findings, microscopic detection of AFB at Ziehl-Neelsen staining (ZN), and mainly isolation and identification of the agent. However, only gross and microscopic exams do not allow to distinguish the species of Mycobacterium involved. The immunostaining with polyclonal anti-Mycobacterium tuberculosis confirms tuberculosis infection, but is not specific; there may be marking of other mycobacteria. The aim of this study was to describe the histologic findings, of ZN staining and immunohistochemistry technique (IHC) of 13 cases of wildlife herbivores diagnosed with tuberculosis in the Setor de Patologia Veterinária of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) during the 2003- 2015 period. Formalin fixed paraffin embedded tissues were recut, stained with hematoxylin and eosin and ZN, and samples were submitted to the IHC (anti-M. tuberculosis marking, streptavidin-biotin peroxidase method). All animals included were adults living in captivity and belonged to the following species: llama (5/13), sambar deer (4/13), camel (1/13), red deer (1/13), Brazilian tapir (1/13) and Nilgai antelope (1/13). The IHC revealed immunostaining of accentuated (4/13), moderate (4/13) and discrete (4/13) intensity, except in a case with insufficient material. The histological features, findings in ZN staining and IHC in the wild herbivores with tuberculosis lesions allowed the diagnosis of infection with Mycobacterium sp., turning into fast and efficient methods of diagnosis, which can help to prevent the spread of this disease in animals from the same herd.

• Mycobacterium sp. tuberculosis herbivores camelids deer histopathology immunohistochemistry diagnosis

Abstract in Portuguese:

A tuberculose é uma enfermidade infectocontagiosa, debilitante, causada por bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). As micobacterioses têm importância em Medicina Veterinária devido ao seu potencial zoonótico e sua distribuição mundial, afetando todas as classes de vertebrados. Em animais selvagens as micobacterioses têm sido um problema relatado principalmente em cativeiro. Contudo, há relatos de sua ocorrência também em animais de vida livre, colocando em risco e dificultando os programas de erradicação da tuberculose em animais de produção. O diagnóstico nas espécies selvagens em geral é post mortem, uma vez que o teste de tuberculina não está padronizado para essas espécies, assim como não é confiável para triagem. São consideradas para o diagnóstico lesões de necropsia, observação microscópica de BAAR na coloração de Ziehl-Neelsen (ZN) e, principalmente, isolamento e identificação do agente. No entanto, apenas os achados morfológicos macro e microscópicos não permitem distinguir a espécie de Mycobacterium envolvida. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo policlonal anti-M. tuberculosis confirma a infecção pelo CMT, mas não é específica, pois pode ocorrer marcação de outras micobactérias. As características histológicas, os achados na coloração de ZN e na IHQ de 13 casos de herbívoros selvagens diagnosticados com tuberculose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) no período de 2003 a 2015 são descritos. A partir das amostras em blocos de parafina foram confeccionadas novas lâminas histológicas, coradas com hematoxilina e eosina (HE) e ZN. Cortes foram submetidos à técnica de IHQ para detecção do CMT. Todos os animais eram adultos, provenientes de cativeiro e incluíram lhama (5/13), cervo sambar (4/13), camelo (1/13), cervo vermelho (1/13), anta brasileira (1/13) e antílope Nilgai (1/13). Na IHQ observou-se imunomarcação acentuada (4/13), moderada (4/13) ou discreta (4/13), exceto em um caso, em que não havia quantidade suficiente de material. As características histológicas, bem como os achados na coloração de ZN e na técnica de IHQ confirmaram o diagnóstico de infecção por Mycobacterium sp. e foram considerados métodos rápidos e eficientes, de forma que podem ajudar na prevenção da disseminação da doença em animais.

• Mycobacterium sp. tuberculose herbívoros camelídeos cervídeos histopatologia imuno-histoquímica diagnóstico