PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Bernardo C.C., Avelar B.R., Ignacchiti M.D.C., Martins I.V.F. & Pereira M.J.S. 2013. [Comparison of comercial® ELISA kits for antibodies in serum and milk with a fecal test in cattle naturally infected with Fasciola hepatica.] Comparação de kits ELISA® comerciais para anticorpos no soro e leite com um teste coproparasitológico em bovinos naturalmente infectados por Fasciola hepatica. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(1):37-40. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal do Espírito Santo, Alto Universitário s/n, Cx. Postal 16, Alegre, ES 29500-000, Brazil. E-mail: ivfmartins@gmail.com The fascioliasis is a disease caused by a trematode that affects the liver mainly of domestic ruminants and can also parasite man; its diagnosis is routinely done by coprological methods. The aim of this study was to compare commercial ELISA kits for antibodies in serum and milk with a coprological test in cattle naturally infected by Fasciola hepatica. We collected fecal, blood and milk samples from cattle in the municipality of Jerônimo Monteiro, southern Espírito Santo state. The fecal samples were processed by the fecal egg sedimentation for F. hepatica, which is used as a gold standard for analyzis. Blood (92) and milk (43) samples were processed according to the manufacturer instructions of the respective commercial ELISA kits tested. We used the McNemar chi-square for statistical comparison and calculated the sensitivity, specificity, predictive values, and kappa. The results showed that the frequency of positivity for the commercial serum ELISA kits (c2=34.02) and milk (c2=19.04) differed significantly (p<0.0001) compared with fecal egg sedimentation. The sensitivity of the kits was 100%, but possessed low specificity, 42.85 and 30% for serum and milk respectively. The coefficient kappa showed agreement for testing serum (0.33) and milk (0.21). The positive predictive value of the kits for serum and milk were respectively 44.61% and 38.23%, and negative predictive values were 100% for both tests. Despite the increased sensitivity of commercial ELISA kits and the difference in relation to the fecal egg sedimentation test for detection of F. hepatica positive animals, the choice of a diagnostic test should consider the effectiveness. When a herd is affected by parasitism, treatment is applied to all animals; so, the fecal egg sedimentation test for the diagnosis of disease in the field is most efficient, as the test is cheap and easy to perform.

• Fascioliasis Fasciola hepatica fasciolose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Bernardo C.C., Avelar B.R., Ignacchiti M.D.C., Martins I.V.F. & Pereira M.J.S. 2013. [Comparison of comercial® ELISA kits for antibodies in serum and milk with a fecal test in cattle naturally infected with Fasciola hepatica.] Comparação de kits ELISA® comerciais para anticorpos no soro e leite com um teste coproparasitológico em bovinos naturalmente infectados por Fasciola hepatica. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(1):37-40. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal do Espírito Santo, Alto Universitário s/n, Cx. Postal 16, Alegre, ES 29500-000, Brazil. E-mail: ivfmartins@gmail.com A fasciolose é uma enfermidade causada por um trematoda que acomete o fígado principalmente de ruminantes domésticos, podendo parasitar o homem e seu diagnóstico é realizado rotineiramente por exames coproparasitológicos. O objetivo do presente estudo foi comparar kits comerciais de ELISA para anticorpos no soro e leite com um teste coproprarasitológico em bovinos naturalmente infectados por Fasciola hepatica. Foram coletadas amostras de fezes (92) sangue (92) e leite (43) de bovinos provenientes de propriedades de gado leiteiro do município de Jerônimo Monteiro, sul do Estado do Espírito Santo. As amostras de fezes coletadas foram processadas pela técnica de sedimentação fecal para ovos de F. hepatica, utilizada como padrão ouro para as análises. Amostras de sangue e de leite foram processadas segundo a orientação do fabricante dos respectivos Kits ELISA comerciais testados. Utilizou-se o c2 de McNemar para comparação estatística e calcularam-se a sensibilidade e especificidade, valores preditivos e kappa. Os resultados obtidos mostraram que as frequências de positividade pelo uso dos kits ELISA comerciais de soro e de leite diferiram significativamente (p<0,0001) em relação ao exame coproparasitológico. A sensibilidade dos Kits foi de 100%, porém possuíram baixa especificidade, 42,85 e 30% para o soro e leite respectivamente. O coeficiente de kappa mostrou concordância sofrível para os testes de soro (0,33) e de leite (0,21). Os valores preditivos positivos dos kits para soro e leite foram, respectivamente, 44,61 e 38,23% e, os valores preditivos negativos de 100% para ambos os testes. Apesar da maior sensibilidade dos kits ELISA comerciais e, destes apresentarem diferença em relação ao exame coproparasitológico na detecção dos animais positivos para F. hepatica, a escolha de um teste diagnóstico deve considerar o custo benefício. Quando se trata da presença de parasitismo em rebanhos, o tratamento é aplicado em todos os animais e, assim, o exame coproparasitológico para o diagnóstico da doença tem maior eficiência, já que é menos oneroso e de fácil execução.

Abstract in English:

Using Lymnaea cubensis Pfeiffer, 1839 collected in valleys in the municipality of Três Rios, Rio de Janeiro State, generations of this species were reared in the laboratory. Egg laying commenced for L. cubensis with 18 days of age at 27-29°C. The number of eggs varied from 3 to 24 per egg-mass with a hatchibility index of ca. 100%. Lymnaea cubensis eggs and individuais of more than 30 days of age did not resist 40 days of deseccation although one-dayold specimens survived; additionaliy, the susceptibility and resistance to infection with the miraddium of Fasciola hepatica L., 1758 and the development of this trematode were studied. At 25-27°C the incubation period of F. hepatica eggs was 11 to 13 days. The individual infection of 3 groups of 80 molluscs with 1-3, 3-5 or 5-10 miracidia of F. hepatica indicated that L. cubensis did not survive to the emergence of cercariae when more than 5 miracidia were used per mollusc. Cercariae emerged 35-36 days post-infection with envirommental temperatures of 27-29°C. The mean number of metacercariae was 78.4 and 108.3 for the groups infected with 1-3 and 3-5 miracidia, less than that observed for L. columella Say, 1817, the intermediate host of F. hepatica in Rio de Janeiro State. Experimentally, the prepatent periods for F. hepatica in various hosts, were found to be: bovine, 71 days; rabbit, 65 days; rat, 41-44 days; hamster, 33-34 days, and mouse, 32-35 days. In the guinea-pig, adult F. hepatica were observed 56 days post infection, with ova in the uterus. A prevalence of 35.8% for fascioliasis was obtained in 475 cattle examined in the municipality of Três Rios. Fascioliasis was not encountered in seven other municipalities studied.

• Fascioliasis Fasciola hepatica Lymnaea cubensis biology experimental infection cattle

Abstract in Portuguese:

A partir de exemplares de Lymnaea cubensis Pfeiffer, 1839, coletados em valas no município de Três Rios, Estado do Rio de Janeiro, foram obtidas gerações de moluscos criados em laboratótio. L. cubensis iniciou postura aos 18 dias de idade à temperatura de 27 a 29°C. O número de ovos variou de 3 a 24 por postura, com índice de eclodibilidade próximo de 100%. Ovos de L. cubensis e indivíduos com mais de 30 dias de idade não resistiram a 40 dias de dessecação, porém exemplares com um dia de idade sobreviveram. Foram também observadas a susceptibilidade e a resistência à infecção por miracídios de Fasciola hepatica L., 1758, bem como o desenvolvimento do helminto. Em estufa, a 25-27°C, o período de incubação dos ovos foi de 11 a 13 dias. A infecção individual de três grupos de 80 moluscos com 1 a 3, 3 a 5 e 5 a 10 miracídios de F. hepatica mostrou que L. cubensis não sobrevive até à emergência de cercária, quando se utilizaram mais de 5 miracídios por molusco. A emergência de cercárias ocorreu com 35 a 36 dias de infecção em temperatura ambiente de 27 a 29°C. O número médio de metacercárias de 78,4 e 108,3 para os grupos infectados com 1 a 3 e 3 a 5 miracídios respectivamente, foi inferior ao observado para L. columella Say, 1817, hospedeiro intermediário deste trematódeo no Estado do Rio de Janeiro. Foi experimentalmente verificado que o período pré-patente de F. hepatica em bovino é. de 71 dias, em coelho, de 65 dias, em rato, de 41 a 44 dias, em hamster, de 33 a 34 dias, e em camundongos, de 32 a 35 dias; em cobaias com 56 dias de infectados, foi observada, nas vias biliares, a presença de helmintos com ovos no útero. A prevalência da fasciolose entre 4 7 5 bovinos examinados no foco detectado no município de Três Rios foi de 35,8%. Em sete outros municípios não foi encontrada a fasciolose.

• Fasciolose Fasciola hepatica Lymnaea cubensis biologia infecção experimental bovinos