Resultado da pesquisa (88)
Termo utilizado na pesquisa PCR
#1 - Molecular epidemiology of Clostridioides difficile obtained from fecal samples of wild animals in Brazil
Abstract in English:
Clostridioides difficile is a strictly anaerobic, spore-forming Gram-positive bacterium associated with diarrhea, known as C. difficile infection (CDI). In domestic animals, C. difficile is considered an important pathogen mostly in pigs and horses, but there are also reports in other domestic species. In wild animals, the epidemiology of C. difficile is largely unknown, and the role of the bacterium as a cause of diarrhea is unclear. The aim of this study was to determine the prevalence of C. difficile in the feces of wild animals referred to the Center of Medicine and Research in Wild Animals (CEMPAS). Fecal samples obtained from 100 animals of 34 different species were subjected to qPCR for the detection of the C. difficile 16S rRNA gene and two major toxin genes (tcdA and tcdB) and to anaerobic bacterial isolation. A total of 63 animals (63%) were positive for C. difficile by qPCR, and 16 isolates were recovered. The opossum (Didelphis spp.) had the highest number of positive animals in both tests (from 21 samples, 19 were qPCR positive, and four isolates were recovered). Three toxigenic strains (RT 002, 004, and 014), all previously described as infecting humans and animals, were isolated in the following species: bearded dragon (Pogona vitticeps), pampas fox (Lycalopex vetulus), and marmoset (Callithrix sp.). The presence of C. difficile in the feces of wild animals highlights the importance of wildlife as potential carriers of infection for production animals or humans.
Abstract in Portuguese:
O Clostridioides difficile é uma bactéria Gram-positiva estritamente anaeróbica e formadora de esporos, associada à diarreia e conhecida como infecção por C. difficile (CID). Em animais domésticos, o C. difficile é considerado um patógeno importante principalmente em porcos e cavalos, mas também há relatos em outras espécies domésticas. Em animais selvagens, a epidemiologia do C. difficile é amplamente desconhecida, e o papel da bactéria como causa de diarreia não está claro. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência do C. difficile nas fezes de animais selvagens encaminhados ao Centro de Medicina e Pesquisa em Animais Selvagens (CEMPAS). Amostras de fezes obtidas de 100 animais de 34 espécies diferentes foram submetidas à qPCR para a detecção do gene 16S rRNA do C. difficile e dois principais genes de toxina (tcdA e tcdB), além de isolamento bacteriano anaeróbico. Um total de 63 animais (63%) foram positivos para C. difficile por qPCR, e 16 isolados foram recuperados. O gambá (Didelphis spp.) apresentou o maior número de animais positivos em ambos os testes (de 21 amostras, 19 foram positivas na qPCR, e quatro isolados foram recuperados). Três cepas toxigênicas (RT 002, 004 e 014), todas previamente descritas como infectando humanos e animais, foram isoladas nas seguintes espécies: dragão barbado (Pogona vitticeps), raposa-pampas (Lycalopex vetulus) e sagui (Callithrix sp.). A presença de C. difficile nas fezes de animais selvagens destaca a importância da vida selvagem como potencial portadora de infecção para animais de produção ou seres humanos.
#2 - Causes of death in domestic cats during COVID-19 pandemic (2020-2021): A multi-institutional necropsy study from Mato Grosso and Rio de Janeiro, Brazil
Abstract in English:
Retrospective studies that address the diseases in the feline species are scarce. Herein, we presented the cause of death or euthanasia of cats from January 2020 to December 2021, during the first and second years of the SARS-CoV-2 pandemic. The data were obtained from necropsies performed by the Federal Rural University of Rio de Janeiro and the Federal University of Mato Grosso. A total of 96 feline necropsies were performed. In 87 cases (90.6%), we established the reason for death, while in nine cases (9.4%), the diagnoses were inconclusive. We established the diagnostic groups: infectious and parasitic (37.5%), neoplasm (14.5%), malformation (7.3%), lower urinary tract disease (7.3%), degenerative (6.2%), traumas (6.2%), other causes (8.4%) and iatrogenic (3.1%). The most common cat diseases in Mato Grosso and Rio de Janeiro were infectious. The most common inflammatory lesions were bacterial and viral pneumonia. Alphaherpesvirus (FeHV), Mycoplasma sp., and Pseudomonas sp. were the main detected agents.
Abstract in Portuguese:
Estudos retrospectivos que abordam doenças em felinos domésticos são escassos. Apresentamos aqui a causa da morte ou razões para eutanásia de gatos domésticos entre janeiro de 2020 e dezembro de 2021, durante o primeiro e segundo ano da pandemia de SARS-CoV-2. Os dados foram obtidos em necropsias realizadas pela Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro e Universidade Federal de Mato Grosso. Foram realizadas 96 necropsias de felinos. Em 87 casos (90,6%) foi estabelecido a causa da morte e em nove casos (9,4%) os diagnósticos foram inconclusivos. Estabelecemos os grupos diagnósticos: infecciosos e parasitários (37,5%), neoplasias (14,5%), malformações (7,3%), doenças do trato urinário inferior (7,3%), degenerativas (6,2%), traumas (6,2%), outras causas (8,4%) e iatrogênicas (3,1%). As doenças mais frequentes em gatos do Mato Grosso e Rio de Janeiro foram as infecciosas. As lesões inflamatórias mais frequentes foram as pneumonias bacterianas e virais. Os principais agentes detectados foram Alphaherpesvirus (FeHV), Mycoplasma sp. e Pseudomonas sp.
#3 - Occurrence of pathogens transmitted by Rhipicephalus sanguineus sensu lato ticks in dogs in the semiarid region of Rio Grande do Norte state, Brazil
Abstract in English:
The aim of this study was to determine the occurrence of infection by Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Babesia vogeli, and Hepatozoon canis in dogs from the semiarid region of Rio Grande do Norte state. Also, we evaluated the characteristics that favor the infection by E. canis and the presence of Rhipicephalus sanguineus s.l. ticks. For that, 120 dogs were included, from which blood samples were collected for DNA extraction and molecular diagnosis of these four pathogens. Anamnesis and physical examination were performed on each patient, and all properties were characterized. Chi-square and Fisher’s exact tests were used to verify the association of the studied variables. The most prevalent pathogen in the study was E. canis (13.3%), followed by A. platys (11.7%), H. canis (6%) and B. vogeli (6%). Correspondence analysis performed between E. canis positivity and the variables studied showed the influence of factors such as tick history, non-vaccination and non-use of antiparasitic medications. The main environmental factor observed in the infection by E. canis was the presence of trees and vegetation in the residences. Recognizing these characteristics can help elaborate prevention and control strategies since environmental management activities seek to reduce the interaction between vector and host and, consequently, the exposure to diseases.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de infecção por Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Babesia vogeli e Hepatozoon canis em cães da região semiárida do estado do Rio Grande do Norte. Ainda, foram avaliadas as características que favorecem a infecção por E. canis e a presença de carrapatos Rhipicephalus sanguineus s.l. Para tanto, foram incluídos 120 cães, dos quais foram coletadas amostras de sangue para extração de DNA e diagnóstico molecular desses quatro patógenos. Foi realizada anamnese e exame físico de cada paciente e todas as propriedades foram caracterizadas. Os testes Qui-quadrado e exato de Fisher foram utilizados para verificar a associação das diferentes variáveis estudadas. O patógeno de maior prevalência no estudo foi E. canis (13,3%), seguido por A. platys (11,7%), H. canis (6%) e B. vogeli (6%). A análise de correspondência realizada entre a positividade de E. canis e as variáveis estudadas, demonstrou influência de fatores como histórico de carrapatos, ausência de vacinação e ausência de uso de medicações antiparasitárias. Os principais fatores ambientais observados na infecção por E. canis foram a presença de árvores e jardins nas residências. O reconhecimento dessas características pode auxiliar na elaboração de estratégias de prevenção e controle, visto que atividades de manejo ambiental buscam reduzir a interação entre vetor e hospedeiro e, consequentemente, a exposição a doenças.
#4 - Experimental infection by Trypanosoma vivax in goats in the Brazilian semiarid: detection of T. vivax DNA in colostrum and assessment of lactogenic transmission
Abstract in English:
This study aimed to identify the presence of Trypanosoma vivax DNA in the colostrum of infected goats and to explore the possibility of transmission for neonates fed using colostrum collected from infected goats. We used twelve goats in the final third of gestation with an age of approximately 24 months. Six goats were inoculated intravenously with 0.5mL of blood containing approximately 1.25x105 trypomastigotes of T. vivax, and six remained uninfected. The presence of T. vivax in colostrum was evaluated by Polymerase Chain Reaction (PCR). The possibility of T. vivax transmission by colostrum was assessed by feeding six neonates born of serologically negative goats using colostrum from infected goats. Peripheral blood from neonates was collected daily for thirty days to assess the T. vivax presence through the examination of Giemsa-stained smears of leukocyte layers with the buffy coat technique (BCT) and by PCR. The results of a direct examination of colostrum were negative, but PCR confirmed the presence of T. vivax DNA in all infected goats. Additionally, lactogenic transmission by colostrum was not demonstrated once both BCT and PCR of neonate peripheral blood were negative.
Abstract in Portuguese:
Este estudo teve como objetivo identificar a presença de DNA de Trypanosoma vivax no colostro de cabras infectadas experimentalmente e verificar a possibilidade de transmissão para neonatos alimentados com colostro coletado de cabras infectadas. Foram utilizadas doze cabras no terço final de gestação com idade aproximada de 24 meses. Seis cabras foram inoculadas intravenosamente com 0,5mL de sangue contendo aproximadamente 1,25x105 tripomastigotas de T. vivax, e seis permaneceram não infectadas. A presença de T. vivax no colostro foi avaliada por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). A possibilidade de transmissão de T. vivax pelo colostro foi avaliada através da alimentação de seis neonatos nascidos de cabras sorologicamente negativas com colostro de cabras infectadas. Foi coletado diariamente o sangue periférico dos neonatos, por trinta dias para avaliar a presença de T. vivax através do exame de esfregaços de camadas leucocitárias coradas por giemsa, pela técnica BCT e por PCR. Os resultados do exame direto do colostro foram negativos, mas a PCR confirmou a presença de DNA de T. vivax no colostro em todas as cabras infectadas. Além disso, a transmissão lactogênica pelo colostro não foi demonstrada, uma vez que tanto a BCT quanto a PCR do sangue periférico do neonato foram negativas
#5 - Genetic diversity of Anaplasma marginale in calves under natural transmission conditions in the Northeast region of Pará
Abstract in English:
The objective of the present study was to detect the genetic diversity of Anaplasma marginale strains in naturally infected calves from a rural property located in the northeastern region of the state of Pará, Eastern Amazon, which has a history of mortality due to anaplasmosis. Fourteen calves positive for A. marginale were selected using a semi-nested polymerase chain reaction for the target msp1α gene, with asymptomatic (n=3) and symptomatic (n=11) infections. After sequencing the samples, two genotypes were verified in the E and C regions and the structures in tandem repeats were determined. Nine different strains were found: eight related to the E genotype (α-β-β-Γ = one animal, asymptomatic; 16-F-17-F-F = two animals, symptomatic; α-β-F-F-F-F = one animal, asymptomatic; 31-62-62-61 = one animal, symptomatic; τ-10-3 = three animals, two symptomatic and one asymptomatic; α-β-β-β = one animal, symptomatic; τ-22 -13-18 = two animals, both symptomatic; β-β-β-BRA1-31 = two animals, both symptomatic), and one related to genotype C (23-24-25-31-27-27 = one animal, asymptomatic). Genotype E was predominant in 92.86% of the samples (13/14), followed by genotype C (7.14%). This study made it possible to detect the genetic diversity of A. marginale in calves from the selected dairy farm, in addition to identifying the BRA1 sequence in the animals of the present study, which was recently diagnosed in Minas Gerais, demonstrating the dispersion of A. marginale strains in herds from different Brazilian states. Genetic diversity of A. marginale was observed in both symptomatic and asymptomatic calves. There were no significant differences when clinical signs were compared to the genotype verified in the infected animals. The prevalence of pathogenicity was not observed.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente trabalho foi detectar a diversidade genética de cepas de Anaplasma marginale em bezerros naturalmente infectados oriundos de uma propriedade rural localizada na região nordeste do estado do Pará, Amazônia Oriental, a qual apresentava histórico de mortalidade devido à anaplasmose. Foram selecionados 14 bezerros positivos para A. marginale pela técnica de semi-nested PCR (nPCR) para o alvo no gene msp1α, com infecção assintomática (n=3) e sintomáticos (n=11). Após o sequenciamento das amostras foram verificados dois genótipos nas regiões E e C, e determinadas as estruturas em tandem repeats. Nove diferentes estirpes foram encontradas, sendo oito relacionadas ao genótipo E (α-β-β-Γ = um animal, assintomático; 16-F-17-F-F = dois animais, sintomáticos; α-β-F-F-F-F = um animal, assintomático; 31-62-62-61 = um animal, sintomático; τ-10-3 = três animais, dois sintomáticos e um assintomático; α-β-β-β = um animal, sintomático; τ-22-13-18 = dois animais, sintomáticos; β-β-β-BRA1-31 = dois animais, sintomáticos) e uma relacionada ao genótipo C (23-24-25-31-27-27 = um animal, assintomático). O genótipo E foi predominante em 92,86% das amostras (13/14), seguido pelo genótipo C (7,14%). O estudo possibilitou a detecção da diversidade genética de A. marginale em bezerros dessa propriedade leiteira, além de identificar a sequência BRA1 nos animais do presente estudo, a qual foi diagnosticada recentemente em Minas Gerais, o que demonstra a dispersão das estirpes de A. marginale nos rebanhos de diferentes estados brasileiros. A diversidade genética de A. marginale foi observada tanto em bezerros sintomáticos quanto em assintomáticos e não houve diferença significativa quando se comparou os sinais clínicos ao genótipo verificado no animal infectado, não observando a prevalência de patogenicidade de estirpes.
#6 - Detection of paratuberculosis in dairy cows from southern Brazil
Abstract in English:
Bovine paratuberculosis causes chronic, incurable diarrhea and weight loss, resulting in decreased cattle production. The disease is caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), an obligate intracellular mycobactin-dependent mycobacterium that replicates slowly in the host and has heightened environmental resistance. In countries where the disease is found and the damage has been quantified, direct and indirect economic losses are extremely high. Local epidemiological data is of paramount importance for the implementation of control programs. Our objective was to verify whether paratuberculosis is present in commercial dairy herds in different mesoregions of RS. Therefore, a prospective, cross-sectional and observational study was performed on dairy cattle from five mesoregions of the RS state, Brazil. Milk samples taken from individual cows on commercial farms were tested using indirect ELISA tests and classified as negative, suspicious, or positive. In herds containing at least one positive cow, we conducted convenience sampling of feces directly from the rectal ampulla to identify MAP through PCR. Of the 362 cows tested, 20 were seroreactive for paratuberculosis from two mesoregions. The PCR tests were all positive; cows with a negative ELISA and positive PCR results probably indicate that the MAP was ingested and eliminated without causing infection. We found that paratuberculosis is likely endemic in the northwest and northeast mesoregions.
Abstract in Portuguese:
A paratuberculose bovina causa diarreia crônica e incurável, perda de peso e resulta em diminuição da produção. A doença é causada pelo Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), micobactéria intracelular obrigatória, dependente de micobactina, que se replica lentamente no hospedeiro e possui elevada resistência ambiental. Nos países onde a doença é encontrada e os danos foram quantificados, as perdas econômicas diretas e indiretas são extremamente altas. Os dados epidemiológicos locais são de suma importância para a implementação de programas de controle. Nosso objetivo foi verificar se a paratuberculose está presente em rebanhos leiteiros comerciais em diferentes mesorregiões do RS. Para tanto, foi realizado um estudo prospectivo, transversal e observacional em bovinos leiteiros de cinco mesorregiões do estado do RS, Brasil. Amostras de leite individuais, provenientes de vacas leiteiras de fazendas comerciais foram testadas com ELISA indireto e classificadas como negativas, suspeitas ou positivas. Em rebanhos contendo pelo menos uma vaca positiva, realizamos amostragem por conveniência, em que foram coletadas fezes diretamente da ampola retal, para identificar MAP por meio da PCR. Das 362 vacas testadas, 20 foram sororreativas para paratuberculose, oriundas de duas mesorregiões. Os testes de PCR foram todos positivos. Vacas com resultado negativo no teste ELISA e PCR positivo provavelmente indicam que o MAP foi ingerido e eliminado sem causar infecção. Sugere-se que a paratuberculose é provavelmente endêmica nas mesorregiões noroeste e nordeste.
#7 - Sarcocystis spp. detection in cattle using different diagnostic methods
Abstract in English:
Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.
Abstract in Portuguese:
Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.
#8 - Real-time PCR quantification and histopathological findings of Mycoplasma hyopneumoniae infection in the lungs of pigs slaughtered in São Luís, Maranhão, Brazil
Abstract in English:
Porcine enzootic pneumonia (PES), mainly caused by the bacteria Mycoplasma hyopneumoniae, is the main cause of respiratory problems in pigs. Infection by M. hyopneumoniae leads to production losses and the predisposition of affected animals to secondary infections, which may result in the condemnation of carcasses and organs due to lung lesions at the time of slaughter. The objective of the research was to evaluate the infection by M. hyopneumoniae in pigs submitted to slaughter in São Luís Island/MA, using molecular and histopathological diagnostic methods. One hundred fifty lung samples were collected from inspected (n=65) and non-inspected (n=85) slaughter pigs on São Luís Island, Maranhão, from July 2019 to August 2021. Of the 150 DNA samples collected, 121 showed an amplified product for Cyt B in the PCR assay. Thus, 121 samples were submitted to qPCR of M. hyopneumoniae, of which 44 (36.36%) showed positive results. The mean amount of bacterial load ranged from 1.20 × 101 to 7.20 × 104, with a mean of 1.73 × 104 copies. Of the reagent samples, 81.81% (36 samples) were obtained from non-inspected slaughter, while 18.18% (8 samples) were obtained from slaughterhouses. In the histopathological analysis, 44 positive qPCR samples were evaluated, of which 28 (63.63%) presented results compatible with the main inflammatory process associated with the presence of M. hyopneumoniae, that is, bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia (BALT). Three samples that showed the highest bacterial load (qPCR: 5.63 × 10³, 2.19 × 104 and 7.23 × 104) showed more evident lesions in this study. The microscopic findings associated with the quantifications indicated a relationship between the amount of bacterial load and the presence of microscopic lesions; higher bacterial load in lung tissue is associated with increased histopathologic staining for BALT hyperplasia. In conclusion, the results point to the circulation of the etiological agent in the sampled animals and the need for preventive measures on pig farms in Maranhão with the involvement of producers, sanitary defense and inspection agencies.
Abstract in Portuguese:
A pneumonia enzoótica suína (PES), causada principalmente pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae, é a principal causa de problemas respiratórios em suínos. A infecção por M. hyopneumoniae leva a perdas produtivas e a predisposição dos animais acometidos a infecções secundárias, o que pode resultar em condenação de carcaças e órgãos por lesões pulmonares no momento do abate. O objetivo da pesquisa foi avaliar a infecção por M. hyopneumoniae em suínos submetidos ao abate na Ilha de São Luís, por meio de métodos diagnósticos moleculares e histopatológicos. Para isso, foram coletadas 150 amostras de pulmão de suínos de abate inspecionado (n=65) e não inspecionado (n=85) na Ilha de São Luís/Maranhão, no período de julho de 2019 a agosto de 2021. Das 150 amostras de DNA coletadas, 121 apresentaram produto amplificado para Cyt B no ensaio de PCR. Assim, 121 amostras foram submetidas à qPCR de M. hyopneumoniae, das quais 44 (36,36%) apresentaram resultados positivos. A quantidade média de carga bacteriana variou de 1,20 × 101 a 7,20 × 104, com média de 1,73 × 104 cópias. Das amostras reagentes, 81,81% (36 amostras) foram obtidas de abate não inspecionado, enquanto 18,18% (8 amostras) foram obtidas em abatedouro. Na análise histopatológica, foram avaliadas 44 amostras positivas para qPCR, das quais 28 (63,63%) apresentaram resultados compatíveis com o principal processo inflamatório associado à presença de M. hyopneumoniae, ou seja, hiperplasia do tecido linfóide associado ao brônquio (BALT). Três amostras que apresentaram maior carga bacteriana (qPCR: 5,63 × 10³, 2,19 × 104 e 7,23 × 104) foram mais evidentes neste estudo. Os achados microscópicos associados às quantificações indicaram uma relação entre a quantidade de carga bacteriana e a presença de lesão microscópica; a maior carga bacteriana no tecido pulmonar está associada a maior alteração histopatológica para hiperplasia BALT. Em conclusão, os resultados obtidos sinalizam para a circulação do agente etiológico nos animais amostrados e a necessidade de medidas preventivas nas criações de suínos do estado do Maranhão com envolvimento dos produtores, órgãos de defesa sanitária e inspeção.
#9 - Bovine genital leptospirosis: Findings in bulls maintained in Caatinga biome conditions
Abstract in English:
Leptospirosis is a disease that causes economic and social impact, as it affects wild and domestic animals and humans. There may be peculiarities in the epidemiology of this disease in the Caatinga biome, Brazil, where the environment is adverse and the etiologic agent, Leptospira spp., requires alternative transmission routes. Considering that in bovine leptospirosis the genital carrier is constantly neglected and the lack of reports on the role of bulls in the epidemiology of the bovine genital leptospirosis (BGL) syndrome, mainly in semiarid conditions such as Caatinga biome, this study aimed to investigate bulls maintained in Caatinga biome conditions as genital carriers of leptospires. Urinary tract (urine, bladder, and kidney) and reproductive tract (vas deferens, cauda epididymis, and vesicular gland) samples were collected from 42 slaughtered bulls. Microscopic agglutination test (MAT), polymerase chain reaction (PCR), and microbiological isolation were included as diagnostic methods. Anti-Leptospira spp. antibodies were found in 17 (40.48%) animals, while 26 animals (61.90%) had at least one organ or urine with leptospiral DNA, and 10 animals (23.81%) were positive at bacteriological culture. Sequenced samples targeting the LipL32 gene showed 99% similarity with Leptospira borgpetersenii. Molecular analysis of samples from the vas deferens and cauda epididymis is recommended for the diagnosis of genital leptospirosis in bulls and, if it is impossible to collect these tissues, semen can be used. In conclusion, this study provides important information relating to bulls from the Caatinga biome, Brazil, as carriers of genital leptospirosis. The results indicate that, even under adverse environmental conditions, leptospires may survive and propagate, mainly due to the characteristic of genital carriers for the sexually spreading of adapted Leptospira species without influence by external variables. Thus, prevention and control strategies for bovine leptospirosis need to include actions aimed at the genital carrier.
Abstract in Portuguese:
A leptospirose é uma doença que causa impacto econômico e social, pois afeta animais silvestres, domésticos e humanos. É possível que existam peculiaridades na epidemiologia desta doença no bioma Caatinga, Brasil, onde o ambiente é adverso e o agente etiológico, Leptospira spp., requer vias alternativas de transmissão. Considerando que na leptospirose bovina o portador genital é constantemente negligenciado e a falta de relatos sobre o papel dos touros na epidemiologia da síndrome da leptospirose genital bovina (BGL), principalmente em condições semiáridas como no bioma Caatinga, este estudo teve como objetivo investigar touros mantidos em condições do bioma Caatinga como portadores genitais de leptospiras. Amostras do trato urinário (urina, bexiga e rim) e do trato reprodutivo (ducto deferente, cauda do epidídimo e glândula vesicular) foram coletadas de 42 touros abatidos. Teste de soroaglutinação microscópica (SAM), reação em cadeia da polimerase (PCR) e isolamento microbiológico foram incluídos como métodos de diagnóstico. Anticorpos anti-Leptospira spp. foram encontrados em 17 (40,48%) animais, enquanto 26 animais (61,90%) apresentaram pelo menos um órgão ou urina com DNA leptospírico, e 10 animais (23,81%) foram positivos na cultura bacteriológica. As amostras sequenciadas a partir do gene LipL32 apresentaram 99% de similaridade com Leptospira borgpetersenii. Recomenda-se a análise molecular de amostras de ducto deferente e cauda do epidídimo para o diagnóstico de leptospirose genital em touros e, na impossibilidade da coleta desses tecidos, o sêmen pode ser utilizado. Em conclusão, este estudo fornece informações importantes sobre touros do bioma Caatinga, Brasil, como portadores de leptospirose genital. Os resultados indicam que, mesmo em condições ambientais adversas, as leptospiras podem sobreviver e se propagar, principalmente devido à característica de os portadores genitais disseminarem sexualmente espécies adaptadas de Leptospira sem influência de variáveis externas. Assim, as estratégias de prevenção e controle da leptospirose bovina precisam incluir ações voltadas para o portador genital.
#10 - Comparison of macroscopy, histopathology and PCR for diagnosing Eimeria spp. in broiler chickens
Abstract in English:
Coccidiosis is a disease of great importance in industrial poultry. The correct diagnosis directs the poultry industry to its best treatment and control. Thus, a survey of Eimeria spp. was carried out in intestines of 64 broiler flocks, with an average age of 29 days. Eight broilers from each flock were randomly removed from the slaughter line, in a total of 512 samples. Macroscopic and histopathological lesions in the intestine were classified into Scores 0 to 4. Polymerase chain reaction (PCR) was used to research the oocysts from the seven species of Eimeria spp. in the intestinal content. The macroscopic evaluations showed that 59.4% (38/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 32.8% (21/64) for E. maxima, 29.7% (19/64) for E. tenella, and 34.4% (22/64) for E. brunetti. The histopathological evaluation showed that 87.5% (56/64) of the flocks had at least one broiler with parasitic structures compatible with Eimeria spp. in the duodenum, 70.3% (45/64) in the jejunum, 18.8% (12/64) in the ileum, 46.9% (30/64) in the cecum, and 4.7% (3/64) in the colon. In PCR, 21.9% (14/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 12.5% (8/64) for E. maxima, 3.1% (2/64) for E. mitis, and 32.8% (21/64) for E. tenella. The Kappa Cohen test between macroscopy, histopathology, and PCR demonstrated concordance ranging from weak to moderate with the exception of histopathology and PCR of the cecum, which was strong. In the comparison between macroscopy and histopathology, there were significative differences between Scores 0 and 1 (apart from the cecum). For Score 3, there were significative differences in duodenum, jejunum and cecum (p<0.05). In conclusion, the macroscopic diagnosis and PCR can generate false-negative results, and the histopathological exam proved to be effective, making it essential to associate different techniques for the correct diagnosis of Eimeria spp. in broiler chickens.
Abstract in Portuguese:
A coccidiose é uma doença de grande importância na avicultura industrial. O diagnóstico correto direciona a indústria avícola ao seu melhor tratamento e controle. Desta forma, realizou-se a pesquisa de Eimeria spp. em intestinos de 64 lotes de frangos de corte, com idade média de 29 dias. Em cada lote foram retirados aleatoriamente oito frangos da linha de abate, totalizando 512. Os intestinos foram classificados na macroscopia e na histopatologia em Grau de 0 a 4. No conteúdo intestinal pesquisou-se por reação em cadeia da polimerase (PCR) oocistos das sete espécies de Eimeria. As avaliações macroscópicas demonstraram que 59,4% (38/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 32,8% (21/64) para E. maxima, 29,7% (19/64) para E. tenella e 34,4% (22/64) para E. brunetti. Na avaliação histopatológica, 87,5% (56/64) dos lotes apresentaram pelo menos um frango com estruturas parasitárias compatíveis com Eimeria spp. no duodeno, 70,3% (45/64) no jejuno, 18,8% (12/64) no íleo, 46,9% (30/64) no ceco e 4,7% (3/64) no cólon. Na PCR 21,9% (14/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 12,5% (8/64) para E. maxima, 3,1% (2/64) para E. mitis e 32,8% (21/64) para E. tenella. O teste de concordância de Kappa Cohen entre macroscopia, histopatologia e PCR demonstrou concordância variando de fraca a moderada com exceção da histopatologia e PCR do ceco que foi forte. Na comparação dos graus de macroscopia e histopatologia, foram encontradas diferenças significativas entre o Grau 0 e 1 (exceto no ceco) e no Grau 3 houve diferença para duodeno, jejuno e cecos (p<0,05). Conclui-se que o diagnóstico macroscópico e a PCR podem gerar resultados falsos negativos e que o exame histopatológico se demostrou eficaz, tornando fundamental a associação de diferentes técnicas para o correto diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte.
