PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Vector-borne diseases have been emerging and reemerging all over the world, causing a challenge to veterinary and human medicine. Among these diseases are those caused by agents of the order Rickettsiales, obligatory intracellular Gram-negative bacteria, with ability to infect several animals and humans. Rickettsiales of the species Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. residing in cytoplasmic vacuoles of leukocytes and platelets. Rickettsiales of the species Rickettsia spp. freely infect cytoplasm or nucleus of host cells. The aim of the present study was to investigate the natural infection with Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Anaplasma phagocytophilum and Rickettsia spp. in captive wild felids at the Federal District and Goiás, Brazil. In addition, it was also aimed to relate possible changes in hemogram with the presence of these agents. Blood samples from 34 animals were analyzed by PCR to detect the presence of DNA from these agents. The DNA of Ehrlichia canis was detected in 5.8% (2/34) of samples. A. platys was detected in 64.7% (22/34), A. phagocytophilum was detected in 5.8% (2/34). The DNA of Rickettsia spp. was not detected in any sample. Two felides presented co-infection with E. canis and A. platys, and two presented co-infection with A. platys and A. phagocytophilum. There were no significant differences in hematological data from positive and negative samples. The data suggest that captive wild felids can serve as potential reservoirs for Ehrlichia spp. and Anaplasma spp., despite hematological abnormalities were not observed.

• Molecular investigation Ehrlichia canis Anaplasma platys Anaplasma phagocytophilum captivity wild felids Anaplasma spp. diagnose polymerase chain reaction cats parasitoses

Abstract in Portuguese:

Doenças transmitidas por vetores estão emergindo e reemergindo em todo o mundo, representando um desafio na medicina humana e veterinária. Entre essas doenças estão aquelas causadas pelos agentes da ordem das Rickettsiales, que são bactérias Gram-negativas intracelulares obrigatórias, com capacidade de infectar vários animais e seres humanos. As Rickettsiales das espécies Ehrlichia spp. e Anaplasma spp. são observadas em vacúolos citoplasmáticos de leucócitos e plaquetas. As Rickettsiales da espécie Rickettsia spp. infectam livremente citoplasma ou núcleo de células hospedeiras. O objetivo do presente estudo foi investigar a infecção natural por Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Anaplasma phagocytophilum e Rickettsia spp. em felídeos selvagens cativos no Distrito Federal e Goiás, Brasil. Além disso, também objetivou-se relacionar possíveis alterações hematológicas decorrentes da presença desses agentes. Amostras de sangue de 34 animais foram analisadas por meio da PCR para detecção de presença de DNA desses agentes. O DNA de Ehrlichia canis foi detectado em 5,8% (2/34) das amostras, A. platys foi detectado 64,7% (22/34), A. phagocytophilum foi detectado em 5,8% (2/34). O DNA de Rickettsia spp. não foi detectado em nenhuma amostra. Dois felídeos apresentaram coinfecção por E. canis e A. platys e dois apresentaram coinfecção por A. platys e A. phagocytophilum. Não houve diferenças significativas nos dados hematológicos das amostras positivas e negativas. Os dados sugerem que os felídeos selvagens cativos podem servir como potenciais reservatórios para Ehrlichia spp. e Anaplasma spp., a despeito de não ocasionarem alterações hematológicas.

• Investigação molecular Ehrlichia canis Anaplasma platys Anaplasma phagocytophilum Rickettsia spp. felídeos selvagens cativeiro Anaplasma spp. diagnóstico PCR felinos parasitoses

Abstract in English:

ABSTRACT.- Campos S.D.E., Cunha N.C., Machado C.S.C., Souza T.V.T., Fonseca A.B.M., Pinter A., Fonseca A.H. & Almosny N.R.P. 2017. [Spotted Fever Group Rickettsiae in dogs at the surroundings of Conservation Units in the state of Rio de Janeiro: serological survey and associated factors.] Circulação de Rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em cães no entorno de Unidades de Conservação Federais do estado do Rio de Janeiro: evidência sorológica e fatores associados. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(11):1307-1312. Departamento de Patologia e Clínica Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brazil Filho 64, Santa Rosa, Niterói, RJ 24230-340, Brazil. E-mail: s.destri@gmail.com Diseases caused by Rickettsiae have wide distribution and are associated with arthropods. Rickettsia rickettsii is the most pathogenic species of the Spotted Fever Group (SFG) and responsible for the Brazilian Spotted Fever. In the southeast the disease is endemic and serological surveys have demonstrated the presence of antibodies to SFG antigens in dogs, reinforcing the participation of the dog as sentinels. The main vectors are Amblyomma ticks, for which hosts are often wildlife animals. The aim of this study was to evaluate the presence of SFG Rickettsiae in the surroundings of Conservation Units (UC) at the state of Rio de Janeiro by Indirect Immunofluorescence Assay in dogs, and determine associated factors. Serum samples of 155 dogs were tested, with 16.1% of the seropositive animals at least to one of the antigens tested. There was an association between seroreactivity dogs and access to rainforest fragments; lack of veterinary care assistance; lack of actions against ticks; and family income up to two minimum salaries. Dogs with this profile had a higher chance of being exposed to SFG Rickettsiae. According to logistic regression, not going to rainforest areas was considered a protective factor for the dog along with the existence of veterinary care assistance and treatment against ticks. It was concluded that the SFG pathogens are present in the surroundings of UC studied, and possibly both R. rickettsii and R. parkeri are infecting dogs, since the animals showed exposure to both agents. We emphasize the participation of the veterinary and the adoption of the tick control measures as tools in preventing rickettsial infection.

• Spotted fever Rickettsia rickettsii Rickettsia parkeri Rickettsias febre maculosa

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Campos S.D.E., Cunha N.C., Machado C.S.C., Souza T.V.T., Fonseca A.B.M., Pinter A., Fonseca A.H. & Almosny N.R.P. 2017. [Spotted Fever Group Rickettsiae in dogs at the surroundings of Conservation Units in the state of Rio de Janeiro: serological survey and associated factors.] Circulação de Rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em cães no entorno de Unidades de Conservação Federais do estado do Rio de Janeiro: evidência sorológica e fatores associados. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(11):1307-1312. Departamento de Patologia e Clínica Veterinária, Universidade Federal Fluminense, Rua Vital Brazil Filho 64, Santa Rosa, Niterói, RJ 24230-340, Brazil. E-mail: s.destri@gmail.com Doenças causadas por rickettsias tem ampla distribuição geográfica e estão associadas a artrópodes hematófagos. Rickettsia rickettsii é espécie mais patogênica do Grupo da Febre Maculosa (GFM) e responsável pela Febre Maculosa Brasileira. No sudeste do país a doença é endêmica e inquéritos sorológicos tem demonstrado presença de anticorpos para antígenos do GFM em cães, reforçando a participação do cão como sentinela. Os principais vetores são carrapatos do gênero Amblyomma, cujos hospedeiros são, muitas vezes, animais de vida silvestre. Assim, objetivou-se avaliar a circulação de rickettsias do GFM no entorno de Unidades de Conservação (UC) no Rio de Janeiro por meio da Imunofluorescência Indireta em cães, além de determinar os fatores associados. Amostras de soro de 155 cães foram testadas, sendo 16,1% dos animais sororreagentes pelo menos a um dos antígenos testados. Houve associação entre a sororreatividade dos cães e o acesso à mata; falta de assistência médico-veterinária; falta de medidas contra carrapatos; e renda familiar do responsável de até dois salários mínimos. Cães com este perfil apresentaram maior chance de serem expostos aos agentes do GFM. De acordo com o modelo de regressão logística, não frequentar áreas de mata foi considerado um fator de proteção para o cão, juntamente com possuir acompanhamento médico-veterinário e receber medidas contra carrapatos. Concluiu-se que patógenos do GFM circulam no entorno das UC estudadas, sendo possível que R. rickettsii e R. parkeri infectem cães, uma vez que os animais demonstraram exposição aos dois agentes. Ressalta-se a participação do veterinário e a adoção de medidas de combate a carrapatos como ferramentas na prevenção da infecção rickettsial.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Guimarães M.F., Araujo A.C., Freire D.P., Machado D.M.R., Martins N.N.V.M., Moraes-Filho J. & Horta M.C. 2017. [Infection survey of Rickettsia rickettsii and Coxiella burnetii in sheep and goats from National Park of Serra das Confusões, Piauí.] Investigação sorológica de Rickettsia rickettsii e Coxiella burnetii em caprinos e ovinos no entorno do Parque Nacional da Serra das Confusões, Piauí. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):555-560. Laboratório de Parasitologia e Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia BR- 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. Email: horta.mc@hotmail.com The diseases caused by bacteria from the genera Rickettsia and Coxiella have hematophagous arthropods as vectors, mostly by ticks, which act directly on the transmission of pathogens that are responsible for diseases with major impact on veterinary and human medicine. The present study aimed to survey the infection of Rickettsia rickettsii and Coxiella burnetii in sheep and goats surrounding in the National Park of Serra das Confusões (NPSC), located in the state of Piauí, Northeast of Brazil. Serum samples from 202 goats and 153 sheep were tested by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) for the detection of antibodies against R. rickettsii and C. burnetii. The samples were considered positive when they showed titers ≥ 64. Ticks in parasitic stage were collected and identified. All samples from sheep and goats were seronegative for R. rickettsii. Seropositivity was verified in 2% (3/153) of the samples of sheep for C. burnetii, with titers ranging from 64 to 4096. The serum samples obtained from goats were seronegative to the above antigens. In total, 56 ticks were collected from 15 sheep (9.8%) all identified as Rhipicephalus microplus. The study demonstrated absence of infection by R. rickettsii in samples of sheep and goats, absence of infection of C. burnetii in goats; and the first report of serological occurrence of C. burnetii in sheep in this region of Brazil.

• Spotted Fever febre Maculosa Febre Q

Abstract in Portuguese:

RESUMO- Guimarães M.F., Araujo A.C., Freire D.P., Machado D.M.R., Martins N.N.V.M., Moraes-Filho J. & Horta M.C. 2017. [Infection survey of Rickettsia rickettsii and Coxiella burnetii in sheep and goats from National Park of Serra das Confusões, Piauí.] Investigação sorológica de Rickettsia rickettsii e Coxiella burnetii em caprinos e ovinos no entorno do Parque Nacional da Serra das Confusões, Piauí. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):555-560. Laboratório de Parasitologia e Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia BR- 407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. Email: horta.mc@hotmail.com As doenças causadas por bactérias dos gêneros Rickettsia e Coxiella possuem como vetores artrópodes hematófagos, na sua maioria carrapatos, que atuam diretamente na transmissão de patógenos responsáveis por enfermidades de grande impacto na medicina veterinária e humana. O presente estudo objetivou realizar uma investigação sorológica de Rickettsia rickettsii e Coxiella burnetii em caprinos e ovinos criados no entorno do Parque Nacional da Serra das Confusões (PNSC), localizado no estado do Piauí, região nordeste do Brasil. Amostras de soro de 202 caprinos e 153 ovinos foram testadas pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos anti-R. rickettsii e anti-C. burnetii, sendo consideradas positivas quando apresentaram títulos ≥ 64. Carrapatos em fase de parasitismo foram coletados e identificados. Todas as amostras de caprinos e ovinos foram soronegativas para antígenos de R. rickettsii. Foi verificado soropositividade em 2% (3/153) das amostras de ovinos para C. burnetii, com títulos variando de 64 a 4.096. As amostras de caprinos não foram reagentes ao referido antígeno. Não foi observado parasitismo em caprinos por carrapatos. No total, foram coletados 56 carrapatos parasitando 15 ovinos (9,8%), todos identificados como Rhipicephalus microplus. O estudo demonstrou a ausência de anticorpos anti-R. rickettsii nas amostras de caprinos e ovinos, ausência de anticorpos anti-C. burnetii em caprinos; e possibilitou o primeiro relato da ocorrência sorológica de C. burnetii em ovinos nesta região do Brasil.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Paiva K.A.R., Pereira J.S., Fonseca Z.A.A.S., Coelho W.A.C., Teixeira G.M.S.L., Oliveira M.F. & Ahid S.M.M. 2017. [Rickettsia amblyommii associated with rodent and marsupials native of Raphael Fernandes Experimental Station da UFERSA, Rio Grande do Norte, Brazil.] Rickettsia amblyommii associado a roedores e marsupiais nativos da Estação Experimental Rafael Fernandes da UFERSA, Rio Grande do Norte. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):621-626. Departamento de Ciências Animais, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Av. Francisco Mota, Presidente Costa e Silva, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: kaliane_paiva@hotmail.com The study aimed to register the occurrence of Rickettsia sp. in rodents and marsupials native of the Rafael Fernandes Experimental Station of UFERSA, Mossoró/RN, Brazil. The study consisted of field research on small wild mammals, with data expressed in simple frequency and percentage through IBM SPSS (IBM Corp., Armonk, NY), version 22.0. Samples of blood plasma from 36 marsupials and 5 rodents were collected. From these, 64 contained Amblyomma auricularium, 7 Amblyomma parvum and 12 Amblyomma sp. All blood plasma samples were analyzed by indirect immunofluorescence technique, and 16 macerated specimens of A. auricularium and 3 of A. parvum were analyzed by reaction technique Polymerase Chain. From the tested plasma samples 17.60% were seropositive for Rickettsia amblyommii, 8 were positive for A. auricularium e R. amblyommii in gene gltA analysis of the fragments (350 bp) and ompA (587 bp) with 100% similarity with Candidatus R. amblyommii Bahia and AAPE strain, what corresponded to a low circulation of the agent from the vectors and hosts. This study registers for the first time the occurrence of R. amblyommii in marsupials Gracilinanus agilis and Monodelphis domestica belonging to the Didelphidae family, and in rodents of the Echimyidae and Cricetidae families, the species of which were Thrichomys sp. and Wiedomys sp. respectively, in Mossoró, Rio Grande do Norte.

• Rickettsia amblyommii rodents marsupials roedores marsupiais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Paiva K.A.R., Pereira J.S., Fonseca Z.A.A.S., Coelho W.A.C., Teixeira G.M.S.L., Oliveira M.F. & Ahid S.M.M. 2017. [Rickettsia amblyommii associated with rodent and marsupials native of Raphael Fernandes Experimental Station da UFERSA, Rio Grande do Norte, Brazil.] Rickettsia amblyommii associado a roedores e marsupiais nativos da Estação Experimental Rafael Fernandes da UFERSA, Rio Grande do Norte. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):621-626. Departamento de Ciências Animais, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Av. Francisco Mota, Presidente Costa e Silva, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: kaliane_paiva@hotmail.com O presente estudo teve como objetivo registrar a ocorrência de Rickettsia sp. em roedores e marsupiais nativos da Estação Experimental Rafael Fernandes da UFERSA, Mossoró/RN. O trabalho consistiu em uma pesquisa de campo, com roedores e marsupiais silvestres, com os dados expressos em frequência simples e porcentagem através do programa estatístico IBM SPSS (Armonk, NY: IBM Corp.), versão 22.0. Coletaram-se amostras de plasma sanguíneo de marsupiais (36) e de roedores (5). Destes, 64 continham Amblyomma auricularium, 7 Amblyomma parvum e 12 Amblyomma sp. As amostras de plasma sanguíneo foram analisadas através da técnica de Reação de Imunofluorescência Indireta. Exemplares de A. auricularium e a A. parvum foram macerados e submetidos a Técnica de Reação em Cadeia da Polimerase. Das amostras de plasma testadas, 17,60% apresentaram soropositividade para Rickettsia amblyommii. Oito exemplares de A. auricularium estavam positivos para R. amblyommii na análise de fragmentos dos genes gltA (350 bp) e ompA (587 pb), com 100% de similaridade com Candidatus R. amblyommii estirpe Bahia e AaPE, corres­pondendo a uma baixa circulação do agente dentre os vetores e hospedeiros. Esta pesquisa registra pela primeira vez a ocorrência de R. amblyommii em marsupiais Gracilinanus agilis e Monodelphis domestica pertencentes a Família Didelphidae, e roedores das Famílias Echimyidae e Cricetidae, cujas espécies foram Thrichomys sp. e Wiedomys sp., respectivamente, em Mossoró, estado do Rio Grande do Norte.

Abstract in English:

Brazilian Spotted Fever (BSF) is an infectious disease transmitted by ticks to humans. A new human rickettsial infection was reported to cause spotted fever in the State of São Paulo and was named Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of mammalian host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction Rickettsia sp. Strain Atlantic Forest. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis. The protein bands were transferred to nitrocellulose membrane by electrical migration and subjected to Western blot for protein detection. In all, seven immunoreactive proteins were detected. Two proteins showed higher abundance, with molecular weight of 200 and 130 kDa respectively. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that the two proteins detected representing rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa). The other detected proteins had lower occurrence and molecular weight less than 78 kDa, which may represent members of the cell surface antigens Family (Sca - Surface cell antigen). The detected proteins may serve as a study based on the development of sensitive and specific diagnostic methods in the development of vaccines and they enable further studies to more effective therapies.

• Immunoreactive proteins Rickettsia sp. Atlantic Forest strain rickettsial diseases intracellular bacteria Brazilian Spotted Fever immunogenic proteins.

Abstract in Portuguese:

A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora de Febre Maculosa no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune de hospedeiro mamífero, desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese. As bandas proteicas foram transferidas para membranas de nitrocelulose por migração elétrica e submetidas à técnica de Western-blot, para detecção proteica. Ao todo sete proteínas imunorreativas foram detectadas. Duas proteínas apresentaram maior abundancia, com peso molecular, de 200 e 130 kDa respectivamente. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que as duas proteínas detectadas representem rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa). As demais proteínas detectadas apresentaram menor ocorrência e peso molecular inferior a 78 kDa, podendo representar membros da família de antígenos de superfície celular (Sca – Surface cell antigen). As proteínas detectadas poderão servir como base de estudo na elaboração de métodos diagnósticos sensíveis e específicos, no desenvolvimento de vacinas, além de possibilitarem novos estudos para terapias mais eficazes.

• Proteínas imunorreativas Rickettsia sp. cepa Mata Atlântica riquetsiose bactéria intracelular Febre Maculosa Brasileira proteínas imunogênicas

Abstract in English:

ABSTRACT.- Roier E.C.R., Costa R.L., Pires M.S., Vilela J.A.R., Santos T.M., Santos H.A., Baldani C.D. & Massard C.L. 2016. Epidemiological survey of Neorickettsia risticii in equids from the State of Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(10):939-946. Departamento de Parasitologia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: carlosmassard@ufrrj.br Equine neorickettsiosis (EN), also known as Potomac Horse Fever, is a non-contagious disease caused by the bacterium Neorickettsia risticii of the Anaplasmataceae family. The objectives of this study were to detect the presence of anti-N. risticii antibodies by the indirect immunofluorescence assay (IFA) and of its DNA by qPCR in equids at high and low altitude regions in the State of Rio de Janeiro, Brazil, and to identify factors associated with seropositive equids by multiple logistic regression analysis. The frequency of anti-N. risticii antibodies was 16.05% (n=113/704). The animal age and breeding region were the factors that influenced the seropositivity rate for N. risticii in the equids (p<0.05). Equids from the lowland region had higher seropositivity (p<0.05; OR=5.87) compared to those of the mountain region. The presence of snails on the farm was a factor associated with this result (p<0.05; OR=2.88). In the lowland region, age of the animal and site of breeding were protective factors for the detection of antibodies anti-N. risticii in equids, with lower frequency of seropositivity in younger animals (p<0.05; OR=0.06) and in animals raised in dry areas (p<0.05; OR=0.22). The presence of the target DNA of N. risticii by qPCR was not observed in any of the samples tested. The existence of seropositive equids for N. risticii demonstrates a possible circulation of this agent in the studied area, and that the age related characteristics and equids breeding region are important factors regarding seropositivity in the State of Rio de Janeiro.

• Neorickettsia risticii ehrlichiosis Erliquiose Monocítica Equina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Roier E.C.R., Costa R.L., Pires M.S., Vilela J.A.R., Santos T.M., Santos H.A., Baldani C.D. & Massard C.L. 2016. Epidemiological survey of Neorickettsia risticii in equids from the State of Rio de Janeiro. [Levantamento epidemiológico de Neorickettsia risticii em equídeos do Estado do Rio de Janeiro.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(10):939-946. Departamento de Parasitologia, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: carlosmassard@ufrrj.br A Neorickettisiose equina (NE), também conhecida como Febre do Cavalo de Potomac, é uma doença não contagiosa causada pela bactéria Neorickettsia risticii da família Anaplasmataceae. Os objetivos deste estudo foram detectar a presença de anticorpos anti-N. risticii através da reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e do DNA dessa bactéria através da qPCR em equídeos de regiões de alta e baixa altitude no Estado do Rio de Janeiro, Brasil; e identificar os fatores associados com a soropositividade dos equídeos através da análise de regressão logística múltipla. A frequência de anticorpos anti-N. risticii foi de 16,05% (n=113/704). Observou-se que a idade e a região de criação foram os fatores que influenciaram a taxa de soropositividade para N. risticii nos equídeos (p<0,05). Equídeos da região de baixada apresentaram maior soropositividade (p<0,05; OR=5,87) quando comparado aos criados em região de montanha. A presença de caramujos na propriedade foi um fator associado a este resultado (p<0,05; OR=2,88). Na região de baixada, animais mais jovens (p<0,05; OR=0,06), criados em áreas secas (p<0,05; OR=0,22) demonstraram serem fatores de proteção na detecção de anticorpos anti-N. risticii. Não foi observada a presença do DNA-alvo de N. risticii através da qPCR em nenhuma das amostras testadas. A existência de equídeos soropositivos para N. risticii demonstra a possível circulação desse agente na área estudada, e as características inerentes a idade e a região de criação dos equídeos são fatores importantes relacionados à soropositividade no estado do Rio de Janeiro.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Cicuttin G.L., Boeri E.J., Beltrán F.J. & Gury Dohmen F.E. 2013. Molecular detection of Neorickettsia risticii in Brazilian free-tailed bats (Tadarida brasiliensis) from Buenos Aires, Argentina. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(5):648-650. Sección Serología y Pruebas Biológicas, División Inmunología y Diagnóstico, Instituto de Zoonosis Luis Pasteur, Av. Díaz Vélez 4821, Ciudad Autónoma de Buenos Aires C1405DCD, Argentina. E-mail: gcicuttin@gmail.com Neorickettsia risticii is the causative agent of Potomac Horse Fever, a severe febrile disease affecting horses, transmitted by trematodes species with a complex life cycle. A total of 30 insectivorous bats (Brazilian free-tailed bat Tadarida brasiliensis) were analyzed by PCR for presence of genus Anaplasma, Ehrlichia, Neorickettsia and Rickettsia. Three samples showed positive reactions for genus Anaplasma, Ehrlichia and Neorickettsia, and the sequences were 99.67% identical to Neorickettsia risticii. The role of bats in the life cycle of N. risticii has yet to be elucidated; however bats may be reservoirs for this bacterium. To our knowledge, this is the first evidence of N. risticii in Argentina.

• Neorickettsia Potomac Horse Fever

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Cicuttin G.L., Boeri E.J., Beltrán F.J. & Gury Dohmen F.E. 2013. Molecular detection of Neorickettsia risticii in Brazilian free-tailed bats (Tadarida brasiliensis) from Buenos Aires, Argentina. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(5):648-650. Sección Serología y Pruebas Biológicas, División Inmunología y Diagnóstico, Instituto de Zoonosis Luis Pasteur, Av. Díaz Vélez 4821, Ciudad Autónoma de Buenos Aires C1405DCD, Argentina. E-mail: gcicuttin@gmail.com Neorickettsia risticii is the causative agent of Potomac Horse Fever, a severe febrile disease affecting horses, transmitted by trematodes species with a complex life cycle. A total of 30 insectivorous bats (Brazilian free-tailed bat Tadarida brasiliensis) were analyzed by PCR for presence of genus Anaplasma, Ehrlichia, Neorickettsia and Rickettsia. Three samples showed positive reactions for genus Anaplasma, Ehrlichia and Neorickettsia, and the sequences were 99.67% identical to Neorickettsia risticii. The role of bats in the life cycle of N. risticii has yet to be elucidated; however bats may be reservoirs for this bacterium. To our knowledge, this is the first evidence of N. risticii in Argentina.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fortes F.S., Santos L.C., Cubas Z.S., Barros-Filho I.R., Biondo A.W., Silveira I., Labruna M.B. & Molento M.B. 2011. Anti-Rickettsia spp. antibodies in free-ranging and captive capybaras from southern Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(11):1014-1018. Departamento de Medicina Veterinária, Setor de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Juvevê, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: molento@ufpr.br Capybaras (Hydrochaeris hydrochaeris) are among the main hosts of Amblyomma spp. ticks, which is able to transmit Rickettsia species to human beings and animals. Since they are often infested with potential vector ticks, capybaras may be used as sentinels for rickettsiosis, such as the Brazilian Spotted Fever. The aim of the present study was to determine the prevalence of antibodies against Rickettsia spp. using the indirect immunofluorescence assay (IFA) in 21 free-ranging and 10 captive animals from the Zoological Park of the ‘Bela Vista Biological Sanctuary’ (BVBS), Itaipu Binational, Foz do Iguaçu, Southern Brazil. Antigens of six rickettsial species already identified in Brazil (Rickettsia rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. rhipicephali, R. amblyommii and R. felis) were used for IFA. Ticks from each capybara were collected for posterior taxonomic identification. A total of 19 (61.3%) samples reacted to at least one of tested species. Seropositivity was found in 14 (45.2%), 12 (38.7%), 5 (16.1%), 4 (12.9%), 3 (9.7%) and 3 (9.7%) animals for R. rickettsii, R. bellii, R. parkeri, R. amblyommii, R. felis and R. rhipicephali, respectively. Two captive capybaras presented suggestive titers of R. rickettsii infection and one sample showed homologous reaction to R. parkeri. Only one free-ranging capybara presented evidence R. bellii infection. Ticks collected on capybaras were identified as Amblyomma dubitatum e Amblyomma sp. Results evidenced the rickettsial circulation in the area, suggesting a potential role of capybaras on bacterial life cycle.

• Rickettsia spotted fever febre maculosa

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fortes F.S., Santos L.C., Cubas Z.S., Barros-Filho I.R., Biondo A.W., Silveira I., Labruna M.B. & Molento M.B. 2011. Anti-Rickettsia spp. antibodies in free-ranging and captive capybaras from southern Brazil. [Anticorpos anti-Rickettsia spp. em capivaras de vida livre e de cativeiro no Sul do Brasil.] Pesquisa Veterinária Brasileira 31(11):1014-1018. Departamento de Medicina Veterinária, Setor de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Juvevê, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: molento@ufpr.br As capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) estão entre os principais hospedeiros do carrapato Amblyomma spp., o qual pode transmitir algumas espécies de riquétsias para seres humanos e animais. Como são frequentemente infestadas por carrapatos vetores potenciais, as capivaras podem ser usadas como sentinelas para riquetsioses, como a Febre Maculosa Brasileira. O objetivo do presente estudo foi determinar a soroprevalência de Rickettsia spp. por meio da reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) em 21 capivaras de vida livre e 10 capivaras de cativeiro do Zoológico do Refúgio Biológico Bela Vista, Itaipu Binacional, Foz do Iguaçu, Brasil. Antígenos de seis espécies de riquétsias já identificadas no Brasil (Rickettsia rickettsii, R. parkeri, R. bellii, R. rhipicephali, R. amblyommii e R. felis) foram utilizados para a RIFI. Carrapatos de cada capivara foram coletados para posterior identificação taxonômica. Um total de 19 (61,3%) amostras reagiu a pelo menos uma das espécies testadas. Foi encontrada soropositividade em 14 (45,2%), 12 (38,7%), 5 (16,1%), 4 (12,9%), 3 (9,7%) e 3 (9,7%) animais para R. rickettsii, R. bellii, R. parkeri, R. amblyommii, R. felis e R. rhipicephali, respectivamente. Duas capivaras de cativeiro apresentaram títulos sugestivos de infecção por R. rickettsii e uma amostra apresentou reação homóloga frente à R. parkeri. Apenas uma capivara de vida livre apresentou evidência de infecção por R. bellii. Os carrapatos coletados sobre as capivaras foram identificados como Amblyomma dubitatum e Amblyomma sp. Os resultados evidenciam a circulação de riquétsias na região, sugerindo uma potencial participação da capivara no ciclo de vida desta bactéria.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Cunha N.C., Fonseca A.H., Rezende J., Rozental T., Favacho A.R.M., Barreira J.D., Massard C.L., Lemos E.R.S. 2009. First identification of natural infection of Rickettsia rickettsii in the Rhipicephalus sanguineus tick, in the State of Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(2):105-108. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: adivaldo@ufrrj.br The Brazilian Spotted Fever (BSF) is a zoonotic disease caused by Rickettsia rickettsii and transmitted by ticks of the genus Amblyomma, more frequently, Amblyomma cajennense. The aim of this paper was to report the first molecular detection of R. rickettsii on R. sanguineus naturally infected in Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were collected from dogs in a rural region of Resende municipality, Rio de Janeiro State, Brazil (22o 30min 9.46sec S, 44o 42min 44.29sec WO), where occurred five human cases of BSF in 2006. The ticks were identified under a stereoscopic microscope and separated in pools by stages, species and sex. DNA extraction was carried out using QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN®). The DNA was submitted to PCR amplification using 04 set of primers: Rr190.70p/Rr190.602n (OmpA, 532bp), BG1-21/BG2-20 (OmpB, 650bp), Tz15/Tz16 (17 kDa protein-encoding gene, 246bp) and RpCS.877p/RpCS.1258n (gltA, 381bp). PCR products were separated by electrophoresis on 1% agarose gels and visualized under ultraviolet light with ethidium bromide. PCR products of the expected sizes were purified by QIAquick® and sequenced by ABI PRISM®. The generated nucleotide sequences were edited with using Bioedit® software and compared with the corresponding homologous sequences available through GenBank, using Discontiguous Mega Blast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). It was confirmed R. rickettsii by sequencing of the material (GenBank FJ356230). The molecular characterization of R. rickettsii in the tick R. sanguineus emphasizes the role of dogs as carriers of ticks from the environment to home. Moreover, this result suggests that there is a considerable chance for active participation of R. sanguineus as one of tick species in the transmission of R. ricketsii to human being in the Brazilian territory.

• Rhipicephalus sanguineus Acari Ixodidae Rickettsia rickettsii molecular analysis Brazilian spotted fever

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Cunha N.C., Fonseca A.H., Rezende J., Rozental T., Favacho A.R.M., Barreira J.D., Massard C.L., Lemos E.R.S. 2009. First identification of natural infection of Rickettsia rickettsii in the Rhipicephalus sanguineus tick, in the State of Rio de Janeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(2):105-108. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: adivaldo@ufrrj.br The Brazilian Spotted Fever (BSF) is a zoonotic disease caused by Rickettsia rickettsii and transmitted by ticks of the genus Amblyomma, more frequently, Amblyomma cajennense. The aim of this paper was to report the first molecular detection of R. rickettsii on R. sanguineus naturally infected in Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were collected from dogs in a rural region of Resende municipality, Rio de Janeiro State, Brazil (22o 30min 9.46sec S, 44o 42min 44.29sec WO), where occurred five human cases of BSF in 2006. The ticks were identified under a stereoscopic microscope and separated in pools by stages, species and sex. DNA extraction was carried out using QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN®). The DNA was submitted to PCR amplification using 04 set of primers: Rr190.70p/Rr190.602n (OmpA, 532bp), BG1-21/BG2-20 (OmpB, 650bp), Tz15/Tz16 (17 kDa protein-encoding gene, 246bp) and RpCS.877p/RpCS.1258n (gltA, 381bp). PCR products were separated by electrophoresis on 1% agarose gels and visualized under ultraviolet light with ethidium bromide. PCR products of the expected sizes were purified by QIAquick® and sequenced by ABI PRISM®. The generated nucleotide sequences were edited with using Bioedit® software and compared with the corresponding homologous sequences available through GenBank, using Discontiguous Mega Blast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). It was confirmed R. rickettsii by sequencing of the material (GenBank FJ356230). The molecular characterization of R. rickettsii in the tick R. sanguineus emphasizes the role of dogs as carriers of ticks from the environment to home. Moreover, this result suggests that there is a considerable chance for active participation of R. sanguineus as one of tick species in the transmission of R. ricketsii to human being in the Brazilian territory.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Coimbra H.S., Fernandes C.G., Soares M.P., Meireles M.C.A., Radamés R. & Schuch L.F.D. 2006. [Equine monocytic Ehrlichiosis in Rio Grande do Sul: clinical, pathological and epidemiological aspects.] Ehrlichiose monocítica eqüina no Rio Grande do Sul: aspectos clínicos, anátomo-patológicos e epidemiológicos. Pesquisa Veterinária Brasileira 26(2):97-101. Laboratório de Doenças Infecciosas, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: bitoxu@ig.com.br A spontaneous outbreak of equine monocytic Ehrlichiosis (EME) is described. The disease occurred from November 2001 to February 2002 on a farm in the municipality of Arroio Grande, located at the western edge of the Mirim Lake, state of Rio Grande do Sul. Out of 50 horses 13 were affected and 6 died. The morbidity was 26% and the mortality 46.1%. The affected horses were 1-5 years old. The most important clinical sign was a profuse acute diarrhea. At necropsy of a horse that died with clinical signs of the disease, the main alterations were characterized by hemorrhagic areas of the mucosa of the large intestine with liquid contents, and congested and hemorrhagic areas alternating with normal areas as well as nodules with purulent secretion in the mucosa of the small intestine. The histological changes were characterized by moderate mononuclear infiltration of the mucosa, characterizing a lympho-histiocytic enteritis with predominance of macrophages. In the jejunum and ileum, related to the invagination of crypts and villi, a granulomatous enteritis was observed. To confirm the diagnosis of infection by Neorickettsia (Ehrlichia) risticii, blood samples of seven affected horses were taken and a polimerase chain reaction (PCR) was performed. Three tested blood samples were positive (42.8%) with observation of a band of 529pb characteristic of N. risticii.

• Neorickettsia (Ehrlichia) risticii equine monocytic Ehrlichiosis.

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Coimbra H.S., Fernandes C.G., Soares M.P., Meireles M.C.A., Radamés R. & Schuch L.F.D. 2006. [Equine monocytic Ehrlichiosis in Rio Grande do Sul: clinical, pathological and epidemiological aspects.] Ehrlichiose monocítica eqüina no Rio Grande do Sul: aspectos clínicos, anátomo-patológicos e epidemiológicos. Pesquisa Veterinária Brasileira 26(2):97-101. Laboratório de Doenças Infecciosas, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: bitoxu@ig.com.br A spontaneous outbreak of equine monocytic Ehrlichiosis (EME) is described. The disease occurred from November 2001 to February 2002 on a farm in the municipality of Arroio Grande, located at the western edge of the Mirim Lake, state of Rio Grande do Sul. Out of 50 horses 13 were affected and 6 died. The morbidity was 26% and the mortality 46.1%. The affected horses were 1-5 years old. The most important clinical sign was a profuse acute diarrhea. At necropsy of a horse that died with clinical signs of the disease, the main alterations were characterized by hemorrhagic areas of the mucosa of the large intestine with liquid contents, and congested and hemorrhagic areas alternating with normal areas as well as nodules with purulent secretion in the mucosa of the small intestine. The histological changes were characterized by moderate mononuclear infiltration of the mucosa, characterizing a lympho-histiocytic enteritis with predominance of macrophages. In the jejunum and ileum, related to the invagination of crypts and villi, a granulomatous enteritis was observed. To confirm the diagnosis of infection by Neorickettsia (Ehrlichia) risticii, blood samples of seven affected horses were taken and a polimerase chain reaction (PCR) was performed. Three tested blood samples were positive (42.8%) with observation of a band of 529pb characteristic of N. risticii.