PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Oliveira F.C.S., Pinheiro S.R., Azevedo S.S., Santos C.S.A.B., Lilenbaum W., Soto F.R.M., Roxo E. & Vasconcellos S.A. 2014. [Standardization of the immunoallergic skin test applied for the diagnosis of tuberculosis and mycobacterioses in swine (Sus scrofa) experimentally sensitized with oil suspensions of inactivated Mycobacterium bovis or M. avium.] Padronização do teste imunoalérgico aplicado ao diagnóstico da tuberculose e micobacterioses em suínos (Sus scrofa) experimentalmente sensibilizados com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(2):123-128. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: savasco@usp.br The diagnostic value of the cutaneous allergic response to tuberculin in piglets experimentally sensitized intramuscularly with the oily suspensions of heat inactivated M. bovis or M. avium was investigated. Ninety-one animals were used and divided into four groups: groups A and B were formed each with 25 individuals, and groups C and D, with 21 and 20 individuals, respectively, balancing the characteristics of race, ancestry, age and sex. At the age of 30 days, all the animals were submitted to the screening test with the use of M. bovis PPD, by the intradermal route at the base of the ear and no reaction was detected. Sixty days after the screening tuberculin test, animals of the group A were injected intramuscularly with 0.5 mL of oily suspension of M. avium D4 strain; animals of the group B received 0.5 mL of an oily suspension of M. bovis, AN5 strain; group C (control I) received 0.5 mL of an oily adjuvant; and the individuals of the group D (control II) received 0.5 mL of saline solution. Following 30 days of sensitization, comparative skin reactions were measured by the variation in skin thickness with a caliper at 0h, 24h, 48h an 72h after applications of tuberculins. In the comparative test measured at 48 or 72h, the reaction was considered negative when the difference of the reactions between bovine PPD and avian PPD was less than 6.7 mm; suspected or inconclusive, when the difference stood in the range of 6.7 to 7.5 mm; and positive according to the type of PPD, considering tuberculosis the M. bovis PPD and mycobacteriosis the M. avium PPD, when the difference of the reaction was greater than 7.5 mm.

• Mycobacterium bovis Mycobacterium avium tuberculosis tuberculin tuberculose tuberculinização

Abstract in Portuguese:

RESUMO- Oliveira F.C.S., Pinheiro S.R., Azevedo S.S., Santos C.S.A.B., Lilenbaum W., Soto F.R.M., Roxo E. & Vasconcellos S.A. 2014. [Standardization of the immunoallergic skin test applied for the diagnosis of tuberculosis and mycobacterioses in swine (Sus scrofa) experimentally sensitized with oil suspensions of inactivated Mycobacterium bovis or M. avium.] Padronização do teste imunoalérgico aplicado ao diagnóstico da tuberculose e micobacterioses em suínos (Sus scrofa) experimentalmente sensibilizados com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(2):123-128. Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: savasco@usp.br Foi investigado o valor diagnóstico da resposta alérgica cutânea em leitões experimentalmente sensibilizados, pela via intramuscular, com suspensões oleosas de Mycobacterium bovis ou M. avium inativados pelo calor. Foram utilizados 91 animais, divididos em quatro grupos: grupos A e B, cada um com 25 indivíduos, grupos C e D com 21 e 20 indivíduos respectivamente, balanceando-se as características de raça, linhagem, faixa etária e sexo. Aos 30 dias de idade, todos os animais foram submetidos a uma triagem com a aplicação de tuberculina PPD bovina, pela via intradérmica na base da orelha e não houve qualquer tipo de reação. Decorridos 60 dias do teste tuberculínico de triagem, o grupo A recebeu injeção intramuscular de 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. avium estirpe D4; o grupo B recebeu 0,5 mL de uma suspensão oleosa de M. bovis estirpe AN5; o grupo C (controle I), recebeu 0,5 mL do adjuvante oleoso; e o grupo D (controle II), recebeu 0,5 mL de solução fisiológica. Após 30 dias da sensibilização foi realizada a prova de tuberculinização comparativa com reação medida pela variação da espessura da pele com cutímetro de mola às 0h, 24h, 48h e 72h, após a aplicação das tuberculinas. No teste comparativo, lido às 48 ou 72 horas, a reação foi considerada negativa quando a diferença das reações entre o PPD bovino e o PPD aviário foi menor que 6,7 mm; suspeito ou inconclusivo quando a diferença se situou na faixa de 6,7 a 7,5 mm; e positiva de acordo com o tipo de PPD, considerando-se tuberculose para PPD M. bovis e micobacteriose para PPD M. avium, quando a diferença da reação foi superior a 7,5 mm.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Romano L.A., Sampaio L.A. & Tesser M.B. 2012. [Micobacteriosis by Mycobacterium marinum in Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus and barber goby Elacatinus figaro: Histopathological and imunohistochemical diagnosis.] Micobacteriose por Mycobacterium marinum em linguado Paralichthys orbignyanus e em “barber goby” Elacatinus figaro: diagnóstico histopatológico e imuno-histoquímico. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(3):254-258. Laboratório de Imunologia Patologia de Organismos Aquáticos, Instituto de Oceanografia, Universidade Federal do Rio Grande, Av. Itália Km 8, Bairro Carreiros, Rio Grande, RS 96201-900, Brazil. E-mail: dcluis@yahoo.com Mycobacteriosis affects various species of fish, including those cultured with commercial purposes. It is a chronic systemic with granuloma forming disease known as fish mycobacteriosis. In the last few years the interest of fish culture has been increasing due to the reduction of the natural fish stocks. However the intensification of fish culture has collaborated to the development of diseases such as mycobacteriosis, causing losses due to the chronic characteristics and difficult diagnosis. This study is to report two cases of mycobacteriosis observed at “Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha of the Universidade Federal do Rio Grande (FURG)”, one for Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus and another for barber goby Elacatinus figaro. The Fite-Faraco staining protocol was used. Membranes of mycobacterial cells contain a waxy substance composed of mycolic acids. These are ß-hydroxy carboxylic acids with chain lengths of up to 90 carbon atoms. The property of acid fastness is related to the carbon chain length of the mycolic acid found in any particular species. The fish mycobacterium is much less acid and alcohol fast than the tubercle bacillus and the classic Ziehl-Neelsen Staining Protocol may give false results. The presence of mycobacterial antigen lesions was studied by immunohistological methods using monoclonal antibodies to Mycobacterium marinum. Humans may be infected by these bacteria and develop cutaneous granuloma. In this paper the necessity is stressed for a correct diagnosis of the disease, contributing to the prevention of its establishment in aquatic facilities, and thus, preserving cultured fish as well as human beings from infection.

• Micobacteriosis Mycobacterium marinum Paralichthys orbignyanus Elacatinus figaro micobacteriose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Romano L.A., Sampaio L.A. & Tesser M.B. 2012. [Micobacteriosis by Mycobacterium marinum in Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus and barber goby Elacatinus figaro: Histopathological and imunohistochemical diagnosis.] Micobacteriose por Mycobacterium marinum em linguado Paralichthys orbignyanus e em “barber goby” Elacatinus figaro: diagnóstico histopatológico e imuno-histoquímico. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(3):254-258. Laboratório de Imunologia Patologia de Organismos Aquáticos, Instituto de Oceanografia, Universidade Federal do Rio Grande, Av. Itália Km 8, Bairro Carreiros, Rio Grande, RS 96201-900, Brazil. E-mail: dcluis@yahoo.com As micobacterioses afetam várias espécies de peixes, tanto comerciais como ornamentais. É uma enfermidade sistêmica com formação de granulomas, conhecida como micobacteriose de peixes. O desenvolvimento da aquicultura tem aumentado o número de casos com essa enfermidade que muitas vezes é de difícil diagnóstico. Neste trabalho apresentamos dois casos de micobacterioses em Paralichthys orbignyanus e Elacatinus figaro provenientes do Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande (FURG). As micobactérias de peixes possuem menos ácidos graxos que as de mamíferos, por isso foi utilizado o protocolo de coloração de Fite-Faraco, uma vez que o protocolo de coloração clássico de Ziehl Neelsen pode resultar em falsos negativos. Para determinar o tipo de micobactéria foi utilizada a imuno-histoquímica com a qual se pode diagnosticar a presença de Mycobacterium marinum. A enfermidade pode ser transmitida para o homem e com esse trabalho ressalta-se a necessidade de fazer o diagnóstico correto e implantar medidas de proteção para as pessoas que estão em contato com os peixes infectados.

Abstract in English:

An outbreak of mycobacteriosis (tuberculosis) caused by Mycobacterium marinum in a colony of Rana catesbeiana in the State of Rio de Janeiro is described. The disease was introduced in the froggery by infected animals and, in 3 months, about 50% of 160 animals became contaminated and died. The sick frogs had shown clinically progressive anorexia, apathy, adynamia, having the head lowered and lost weight with the evolution of the disease. The necropsy had shown nodular whitish caseous lesions in livers, spleens, kidneys, rarely in lungs, with variable number and size of the nodules. Microscopically, the lesions were characterized as granulomas in different evolutioning stages. These had origin in epithelioid cell agglomerations which became caseous necrosis later. The so initiated nodules were surrounded by some macrophage cells and by concentric connective tissue layers, limiting the nodules themselves and from the normal adjacent organ tissues. A great number of isolated or aggregated acid-fast bacteria was seen scattered in the nodule structure. The identification of M. marinum was based on the cultural and biochemical behaviour, with special regard to the photochromogenicity.

• Mycobacteriosis Mycobacterium marinum frog outbreak

Abstract in Portuguese:

Foi descrito um surto de micobacteriose causado por Mycobacterium marinum numa criação de rãs da espécie Rana catesbeiana no Estado do Rio de Janeiro. A doença foi introduzida no ranário através da compra de rãs infectadas e propagou-se em 3 meses a cerca de 50% das rãs de um lote de 160 animais que adoeceram e morreram. Clinicamente as rãs doentes demonstravam progressiva anorexia, apatia, adinamia e postura cabisbaixa, perdendo peso a medida que a doença evoluia. A necrópsia revelou lesões nodulares caseosas de cor esbranquiçada no fígado, baço e rins, raramente nos pulmões, variando o número e tamanho dos nódulos. Microscopicamente as lesões eram constituídas por granulomas, em vários estágios de evolução. Estes iniciavam-se por aglomerados de células epitelióides que posteriormente eram levados a necrose por caseificação. Os nódulos assim formados eram envoltos por alguns macrófagos e por camadas concêntricas de tecido conjuntivo que delimitavam os nódulos entre si e do tecido normal adjacente do órgão. Grande número de bastonetes isolados ou formando agregados bacterianos, álcool-ácido resistentes, encontravam-se entre as estruturas do nódulo. A identificação de M. marinum baseou-se no comportamento cultural e bioquímico, destacando-se a fotocromogenicidade.

• Micobacteriose Mycobacterium marinum rã surto

Abstract in English:

It was found that 90% of 1 to 9 year old cattle from southwestem Brazil had nodular intestinal lesions of Oesophagostomosis in the final portion of the ileum and in the cecum. The number of nodules varied from 1 to 53 and their diameter from l to 19 mm. The cut surface of the larger nodules showed a dry yellowish caseous material, and some times fragments of Oesophagostomum radiatum larvae could be observed. Bacteriological examination of 400 samples taken from the intestinal wall with and without lesions resulted in isolation of 42 (5,2%) cultures of atypical mycobateria. Thirty cultures originated (71,4%) from nodular material and 12 (28,6%) from the portion without lesion. Twenty three (54,8%) cultures belonged to the Runyon group IV and 19 (45,2%) to group II and III. There were 4 cultures of Mycobacterium scrofulaceum, 1 of the M. terrae-complex and 8 of M. intracellulare. Fifteen (78,9%) of these cultures were isolated from the nodular lesions and only 4 (21,0%) from the part without nodules. The present results suggest that the nodular lesion caused by Oesophagostomun radiatum larvae is a predisposing factor for the penetration and multiplication of atypical mycobateria in the intestinal wall. Consequently inespecific allergic reactions to tuberculinization may develop.

• Mycobacteriosis predisposition Oesophagostomosis cattle inespecific allergic reactions

Abstract in Portuguese:

Na região sudeste do Brasil foram encontrados nódulos de esofagostomose na mucosa intestinal da porção final do íleo e do ceco em 90% dos bovinos, variando a faixa etária de 1 a 9 anos de idade. O número de nódulos variou de 1 a 53, e o tamanho destes de 1 a 19 mm de diâmetro, tendo a maioria de 2 a 3 mm. Ao corte, os nódulos maiores continham massa caseosa, ressecada de coloração branco-amarelada, às vezes esverdeada. Em alguns foi observada a presença de larva de Oesophagostomum radiatum. A cultura de 400 materiais com nódulos e outros 400 sem, permitiram o isolamento de 42 (5,2%) culturas de micobactérias, sendo 30 (71,4%) oriundas de materiais com nódulos e 12 (28,6%) dos materiais sem nódulos. A identificação das culturas revelou que 23 (54,8%) pertenciam ao grupo IV de Runyon, consideradas saprófitas e 19 (45,2%) se enquadraram nos grupos II e III, consideradas facultativamente patogênicos, sendo 4 culturas Mycobacterium scrofulaceum, 1 do complexo M. terrae e 8 de M. intracellulare. Destas 19 culturas, 15 (78,9%) foram isoladas da porção da mucosa com nódulos e apenas 4 (21,0%) da mucosa sem nódulo. O presente resultado sugere que as larvas de O. radiatum predispõem a penetração e multiplicação de micobactérias atípicas nos nódulos da esofagostomose e, consequentemente, estas provocam sensibilização alérgica inespecífica observada na tuberculização.

• Micobacteriose predisposição esofagostomose bovinos