PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Flores E.F., Weiblen R., Botton S.A., Medeiros M., lrigoyen L.F., Driemeier D., Schuch L.F. & Moraes M.S. 2000. A retrospective search for bovine respiratory syncytial virus (BRSV) antigens in histological specimens by immunofluorescence and immunohistochemistry. [Pesquisa retrospectiva de antígenos do Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) em cortes histológicos por imunofluorescência e imunohistoquímica.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(4): 139-143. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97105-900 Santa Maria, RS, Brazil. Bovine respiratory syncytial vírus (BRSV) has been only sporadically identified as a causa tive agent of respiratory disease in Brazil. This contrasts with frequent reports of clinical and histopathological findings suggestive of BRSV-associated disease. In order to examine a possible involvement of BRSV in cases of calf pneumonia, a retrospective search was performed for BRSV antigens in histological specimens submitted to veterinary diagnostic services from the states of Rio Grande do Sul and Minas Gerais. Ten out of 41 cases examined (24.4%) were positive for BRSV antigens by immunohistochemistry (IPX). Eight of these cases (19.5%) were also positive by indirect immunofluorescence (IFA), and 31 cases (75.6%) were negative in both assays. In the lungs, BRSV antigens were predominantly observed in epithelial cells of bronchioles and less frequently found in alveoli. In one case, antigens were detected only in the epithelium of the alveolar septae. The presence of antigen-positive cells was largely restricted to epithelial cells of these airways. In two cases, positive staining was also observed in cells and cellular debris in the exudate within the pulmonary airways. The clinical cases positive for BRSV antigens were observed mainly in young animals (2 to 12 month-old) from dairy herds. The main microscopic changes included bronchointerstitial pneumonia characterized by thickening of alveolar septae adjacent to airways by mononuclear cell infiltrates, and the presence of alveolar syncytial giant cells. In summary, the results demonstrate the suitability of the immunodetection of viral antigens in routinely fixed tissue specimens as a diagnostic tool for BRSV infection. Moreover, the findings provide further evidence of the importance of BRSVas a respiratory pathogen of young cattle in southeastern and southern Brazil.

• Bovine respiratory syncytial virus BRSV immunohistochemistry immunofluorescence diagnosis Vírus respiratório sincicial bovino imunohistoquímica imunofluorescência diagnóstico.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Flores E.F., Weiblen R., Botton S.A., Medeiros M., lrigoyen L.F., Driemeier D., Schuch L.F. & Moraes M.S. 2000. A retrospective search for bovine respiratory syncytial virus (BRSV) antigens in histological specimens by immunofluorescence and immunohistochemistry. [Pesquisa retrospectiva de antígenos do Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) em cortes histológicos por imunofluorescência e imunohistoquímica.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(4): 139-143. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria, 97105-900 Santa Maria, RS, Brazil. O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) tem sido raramente identificado como agente etiológico de doença respiratória em bovinos no Brasil. Isso contrasta com freqüentes relatos clínicos e histopatológicos sugestivos de enfermidade associada ao BRSV. Com o objetivo de investigar o possível envolvimento do BRSV em casos de pneumonia em bovinos jovens, realizou-se uma pesquisa retrospectiva para antígenos do BRSV em cortes histológicos de materiais submetidos a quatro serviços de diagnóstico nos Estados do Rio Grande do Sul e Minas Gerais. Dez entre 41 casos examinados (24,4%) foram positivos para antígenos do BRSV por imunohistoquímica (lPX). Oito desses casos (19,5%) também foram positivos por imunofluorescência (lFA) e 31 casos (75,6%) foram negativos em ambos os testes. Nos pulmões, antígenos virais foram detectados predominantemente nas células epiteliais dos bronquíolos e menos freqüentemente nos alveólos. Em um caso, antígenos virais foram detectados exclusivamente no epitélio alveolar. A presença de células positivas restringiu-se ao epitélio dessas vias aéreas. Em dois casos, antígenos virais foram detectados em células descamativas e em restos celulares no exsudato das vias aéreas. Os casos positivos para antígenos do BRSV eram oriundos principalmente de animais jovens (2 a 12 meses de idade) de rebanhos leiteiros. As principais alterações histológicas observadas foram pneumonia bronco-intersticial caracterizada por espessamento dos septos alveolares adjacentes às vias aéreas, infiltrados de células mononucleares e presença de células gigantes multinucleadas nos alveólos. Os resultados obtidos demonstram a utilidade dos métodos de detecção de antígenos em cortes histológicos para o diagnóstico da infecção pelo BRSV. Além disso, esses resultados confirmam evidências anteriores sobre a importância do BRSV como patógeno respiratório no sudeste e sul do Brasil.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Abreu S.R.O., Castro R.S., Nascimento S.A. & Souza M.G. 1998. [CAEV nucleoproteic antigen production and comparison with Maedi-Visna antigen in the immunodiffusion test.] Produção de antígeno nucleoprotéico do vírus da artrite-encefalite caprina e comparação com o do vírus Maedi-Visna para utilização em teste de imunodifusão em ágar gel. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):57-60. Depto Med. Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua D. Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-030, Brazil. A comparison of Maedi-Visna virus (MW) and Caprine Arthritis-encephalitis virus (CAEV) antigens for detection of antibodies to CAEV was performed using sera from 120 goats. The sensitivity and specificity of the immunodiffusion test using MW antigen compared to that of CAEV antigen was 77.3% and 100%, respectively (X2, p < 0.01). These results suggested that only CAEV antigen should be used in immunodiffusion tests for CAEV diagnosis.

• Caprine arthritis-encephalitis Maedi/Visna antigen immunodiffusion Artrite-encefalite caprina antígeno imunodifusão.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Abreu S.R.O., Castro R.S., Nascimento S.A. & Souza M.G. 1998. [CAEV nucleoproteic antigen production and comparison with Maedi-Visna antigen in the immunodiffusion test.] Produção de antígeno nucleoprotéico do vírus da artrite-encefalite caprina e comparação com o do vírus Maedi-Visna para utilização em teste de imunodifusão em ágar gel. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2):57-60. Depto Med. Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua D. Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-030, Brazil. Foi feita uma comparação entre os antígenos (Ag), preparados a partir dos vírus Maedi-Visna (MW) e Artriteencefalite Caprina (CAEV) para detecção de anticorpos contra o CAEV em 120 amostras de soro caprino. A sensibilidade e especificidade relativa da imunodifusão em ágar gel (IDAG) usando-se Ag MW em relação ao Ag CAEV, foi 77,3% e 100%, respectivamente (X2, p<0,01). Assim, para diagnóstico de infecção pelo CAEV recomenda-se apenas o uso de Ag preparado a partir do CAEV.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Botton S.A., Gil L.H.V.G., Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Pituco E.M., Roehe P.M., Moojen V. & Wendelstein, A.C. 1998. [Preliminary characterization of Brazilian isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV).] Caracterização preliminar de amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2)84-92. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Microbiologia e Parasitologia, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS 97015-900, Brazil. This article reports the preliminary characterization of 19 Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) isolates, regarding the biological, antigenic and molecular properties. Eleven viruses were isolated from bovine fetuses, six were obtained from blood of animals from herds with reproductive problems, and two were isolated from clinical cases of gastroenteric disease. The clinical cases atfected young animals and were characterized by diarrhea, oronasal and digestive erosions and ulceration, and occasional digestive bleeding and vulvar petechial hemorrhage. Sixteen isolates (84.2%), including those obtained from fetuses and clinical cases, were of the non-cytopathic (ncp) biotype. Replication ofthree isolates (15.8%) in tissue culture was characterized by appearance of cellular vacuolation and progressive destruction of the monolayers. Analysis of these isolates after cloning revealed a mixed population of cytopathic (cp) and non-cytopathic viruses. Analysis of viral polypeptides by SDS-PAGE followed by &quot;Western immunoblot&quot; revealed the production of the non-structural protein NS3/p80 in cells infected with the cp viruses. In contrast, generation of NS3/p80 was not observed in cells infected with the ncp isolates, which only expressed the precursor polypeptide NS23/p125. Analysis of reactivity with a panel of 15 monoclonal antibodies (MAbs) revealed a marked antigenic variability among the isolates, mainly in the envelope glycoprotein E2/gp53. Although one MAb to this glycoprotein recognized 18 isolates (94. 7%), the other nine E2/gp53 MAbs recognized zero to 57.9% of the isolates. The marked antigenic diversity observed among the brazilian BVDV isolates may have important implications on diagnosis and immunization strategies.

• Bovine viral diarrhea virus BVDV biotypes antigenic diversity Vírus da Diarréia Viral Bovina biotipos diversidade antigénica.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Botton S.A., Gil L.H.V.G., Silva A.M., Flores E.F., Weiblen R., Pituco E.M., Roehe P.M., Moojen V. & Wendelstein, A.C. 1998. [Preliminary characterization of Brazilian isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV).] Caracterização preliminar de amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil. Pesquisa Veterinária Brasileira 18(2)84-92. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Microbiologia e Parasitologia, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, RS 97015-900, Brazil. O presente artigo relata a caracterização inicial de 19 amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil, com relação a aspectos biológicos, antigênicos e moleculares. Onze amostras foram isoladas de fetos bovinos, seis foram obtidas do sangue de animais clinicamente saudáveis de rebanhos com problemas reprodutivos e duas amostras foram isoladas de casos clínicos de enfermidade gastrentérica. Os casos de doença entérica afetaram animais jovens e cursaram com diarréia, às vezes sanguinolenta, erosões e ulcerações na mucosa oronasal e do trato digestivo, e eventualmente hemorragias digestivas e petéquias na vulva. Dezesseis amostras (84,2%), incluindo aquelas isoladas de fetos e dos casos clínicos, pertencem ao biotipo não-citopático (ncp). A replicação de outras três amostras (15,8%), foi carac terizada pelo aparecimento de vacuolização e destruição progressiva do tapete celular. A análise das amostras que produziram citopatologia, após clonagem, revelou tratar-se de populações mistas composta de vírus citopáticos (cp) e nãocitopáticos. A análise de polipeptídeos virais através de SDSPAGE seguida de &quot;Western-immunoblót&quot; revelou a produção da proteína não-estrutural NS3/p80 em células infectadas com as amostras cp. Em contraste, não se evidenciou a geração da NS3/p80 em células infectadas com as amostras ncp que produziram apenas o polipeptídeo precursor NS23/p125. A subsequente análise de reatividade frente a um painel de 15 anticorpos monoclonais (AcMs) revelou uma diversidade antigénica marcante entre os isolados, sobretudo na glicoproteína E2/gp53. Embora um AcM contra essa glicoproteína reagiu com 18 isolados (94, 7%), outros nove AcMs anti-E2/gp53 reconheceram entre zero e 57,9% das amostras brasileiras. A grande variabilidade antigénica detectada entre as amostras brasileiras do BVDV pode ter importantes implicações para o diagnóstico e estratégias de controle e imunização contra o vírus.

Abstract in English:

Some antigenic differences of clones of Moraxella bovis recovered from a 6 months old bullock with infectious keratoconjunctivitis were studied through different techniques. The clones were classified biochemically by standard procedures. Seven polyclonal sera were produced in rabbits and tested against 12 clones by double immunodiffusion. Six monoclonal antibodies produced against M. bovis GF9 were used to quantify titles contained in five clones through the hemagglutination inhibition technique. Six clones were used in an ELISA with the panel of monoclonal antibodies. Immunodiffusion detected that only one clone was different from the others, while hemagglutination showed that the five clones studied were different. ELISA showed no clear cut differences among the clones. It can be concluded that the M. bovis population present in the animal studied is antigenically heterogeneous and that the hemagglutination inhibition technique may detect these differences.

• Antigenicity clones Moraxella bovis

Abstract in Portuguese:

Foram estudadas diferenças antigênicas de clones de Moraxella bovis recuperados de um terneiro com 6 meses de idade, acometido pela primeira vez de ceratoconjuntivite infecciosa bovina. Sete soros policlonais produzidos em coelhos foram testados contra 12 clones por imunodifusão dupla. Seis anticorpos nionoclonais produzidos a partir da amostra GF9 de M. bovis foram usados para verificar títulos de cinco clones através da técnica da inibição da hemoaglutinação. O teste ELISA foi utilizado para detectar reações de seis clones. Através da imunodifusão verificou-se que apenas um clone foi diferente dos outros. Contudo, pela técnica de inibição da hemoaglutinação observou-se que os cinco clones estudados eram diferentes. O teste ELISA não demonstrou diferenças claras entre os clones. Pode-se concluir que a população de M. bovis presente no globo ocular do animal estudado é antigenicamente heterogênea.

• Antigenicidade clones Moraxella bovis

Abstract in English:

Three strains of A/equi 2 virus isolated during outbreaks of equine influenza observed in Brazil during 1969, 1985 and 1987 were compared antigenically, performing hemagglutination inhibition (HI) and serum neutralization (SN) tests. Hyperimmune rooster sera and post-infeccion 21-day-old chicken sera were used. The results of the tests showed minor differences among the strains studied. The two more recent strains (1985 and 1987) are elosely related and both equally different from the 1969 one. This strain showed essentially no difference with the prototype strain (A/equi 2/Miami/1/63). The results suggest that a slight antigenic variation occurred in the hemagglutinin of A/equi 2 virus over the years 1969 to 1985.

• Equine influenza hemagglutination inhibition serum neutralization brazilian strains

Abstract in Portuguese:

Descreve-se um estudo comparativo das características antigênicas de três amostras de vírus de influenza equina (IE) A/equi 2, isoladas no Brasil em 1969, 1985 e 1987, utilizando-se as provas de inibição de hemoaglutinação (IHA) e soroneutralização (SN) em ovos embrionados. Soros de galos imunizados conforme técnica preconizada pela OMS e soros de pintos que sofreram infecção virai foram empregados. Os resultados dessas provas indicaram existir uma ligeira variação antigênica entre as amostras estudadas. As dilas amostras mais recentes (1985 e 1987) estão estreitamente relacionadas e ambas igualmente distanciadas da amostra de 1969 que por sua vez se apresentou mais próxima da cepa protótipo do vírus - A/equi 2/Miami/l/63. Os resultados das provas de IHA são melhor evidenciados com os soros de pintos, sangrados 21 dias pós infecção, que apresentam títulos inibidores mais elevados. As provas de SN confirmaram os achados obtidos com IHA e como seus resultados são expressos em valores maiores, sua análise e interpretação ficam mais fácil de serem demonstradas. Em ambos os tipos de prova, os resultados obtidos sugerem que uma ligeira variação antigênica da hemaglutinina do vírus A/equi 2 ocorreu entre os anos de 1969 e 1985.

• Influenza eqüina inibição de hemoaglutinação soroneutralização amostras de vírus autóctones

Abstract in English:

The macromolecules present in the Boophilus microplus saliva were separated by Electrophoresis on Polyacrylamide Gels and transferred to nitrocellulose paper. Some aspects were studied in both situations. Using Coomassie Brilliant Blue 250R to stain the proteins in the gel, 6 and 11 bands were detected on nondenaturing and denaturing systems respectively. Three glicoprotein and one lipoprotein bands were detected when Beta-mercaptoethanol was used (denaturing system). In this situation, three antigenic bands were observed in nitrocellulose paper after immunoenzymatic procedure when infested bovine or hyperimmune rabbit or mouse sera were used. All of these were glicoproteins.

• Boophilus microplus ticks saliva antigenicity

Abstract in Portuguese:

A saliva (pool) de Boophilus microplus foi submetida a eletroforese em gel de poliacrilamida e logo a seguir procedida a transferência para papel de nitrocelulose, a fim de que a antigenicidade pudesse ser observada. A eletroforese revelou a existência de seis bandas quando em condições de não desnaturação e 11 bandas em condições desnaturantes. Neste último caso, três bandas eram glicoprotefuas e uma lipoprotefua. A revelação imunoenzimática no papel de nitrocelulose evidenciou três bandas quando se usaram soros de bovinos infestados por esse ixodídeo ou soro de coelhos e camundongos imunizados com a citada saliva.

• Boophilus microplus ixodídeos antigenicidade da saliva

Abstract in English:

White Leghorn hens of two lines, selected as non-shedders of the group-specific antigen (gs-ag) of àvian lymphoid leukosis viroses (LLV) in the albumen of their fresh unincubated eggs, produced significantly more eggs (p < 0.01) during seven consecutive-laying periods of 28 days each, than hens of the sarne lines that had been selected as consistent shedders of the gs-ag of LLV. Eggs were obtained from all dams, incubated, and various parameters of productivity compared. Eggs obtained from non-shedder dams had better fertility (p < 0.01) than eggs obtainedfrom shedder dams of the sarne line. Superior embryo viability was observed in only one of the non-shedder lines. Fertile eggs of both non shedder lines had better hatchability (p < 0.01) and yielded a higher percentage of good quality chicks (p < 0.01) than eggs from correspondig shedder hens. Progeny obtained from non-shedder dams had lower non-specific mortality (p < 0.01) anda higher rate of body weight gain (p < 0.01) than the progeny obtained from shedder dams. It is concluded that inapparent infection of White Leghorn dams with avian LLV reduces egg production and affects the productivity of their progeny. Since the methodology available for reducing infection rates or eradicating LLV is relativiely simple, it is recommended that Brazilian poultry suppliers start programs to control exogenous LLV in thefr grandparental stocks.

• Avian lymphoid leukosis vírus productivity eradication

Abstract in Portuguese:

Matrizes Leghorn brancas de duas linhagens que tinham sido selecionadas como não eliminadoras do antígeno específico de grupo (ag-gs) dos vírus da leucose linfóide (VLL) aviária na albumina de ovos frescos não incubados, produziram um maior número de ovos (p < 0,01) durante sete períodos consecutivos de postura de 28 dias cada um, que as matrizes das mesmas linhagens selecionadas como eliminadoras constantes de ag-gs dos VLL aviária. Ovos foram obtidos de todas as matrizes, incubados e vários parâmetros de produtividade foram comparados. Os ovos obtidos das matrizes não eliminadoras de ag-gs tiveram maior fertilidade (p < 0,01) que os ovos obtidos de matrizes eliminadoras da mesma linhagem. Uma melhor viabilidade embrionária foi somente observada em uma das linhagens não eliminadoras de ag-gs. Os ovos férteis derivados das duas linhagens não eliminadoras tiveram uma eclosão superior (p < 0,01) e percentagem maior de pintos eclodidos de boa qualidade (p < 0,01) que os ovos das matrizes eliminadoras correspondentes. As progênies obtidas das linhagens não eliminadoras acusaram menor mortalidade (p < 0,01) e maior ganho de peso corporal (p < 0,01) que as progênies obtidas das linhagens· eliminadoras. Conclui-se que a infecção inaparente de matrizes Leghorn brancas com os VLL aviária afeta tanto a produção de ovos, como a fertilidade, viabilidade e eclodibilidade dos mesmos, assim como o crescimento e a mortalidade observada durante as primeiras semanas de vida. Desde que, a metodologia disponível para reduzir as taxas de infecção ou erradicar os VLL aviária é relativamente simples, recomenda-se que as firmas fornecedoras de aves matrizes operando no Brasil, iniciem programas de controle dos VLL aviária nos seus plantéis de avós.

• Leucose linfóide aviária vírus produtividade erradicação

Abstract in English:

The biochemical behavior of 39 cultures of Salmonella gallinarum and S. pullorum, isolated from natural outbreaks in birds, revealed that 14 (35.9%) posessed characteristics of S. gallinarum, and 25 (64.1 %) of S. pullorum. Screening by the ammonium sulfate precipitation test did not reveal the gresence of "variant" cultures. The antigenic structure of the 39 cultures was characterized by a high concentration of specific factor 9, absence or only traces of partial factor 122 and moderate quantities of partial factor 123, indicating that all 39 cultures were of the standard type. The uniformity of the antigenic composition and small quantitative variation of the antigenic factors of each of the cultures, indicate that the outbreaks of pullorum disease and fowl typhoid; occurring in the last three years, most likely originated from native strains existing in Brazil for several years.

• Salmonella gallinarum S. pullorum antigenic composition biochemical behavior occurrence in Brazil

Abstract in Portuguese:

O comportamento bioquímico de 39 culturas de Salmonella gallinarum e S. pullorum, isoladas de fooos naturais em aves, revelou que 14 (35,9%) apresentaram as características de S. gallinarum e 25 (64,1 %) de S. pullorum. A triagem pelo teste de precipitação pelo sulfato de amônia não acusou a presença de culturas "variantes" entre elas. A estrutura antigênica das 39 culturas caracterizou-se pela alta concentração do fator específico 9, ausência ou apenas traços do fator parcial 122 e moderada quantidade do fator parcial 123, mostrando tratar-se tão somente de culturas "padrões". A uniformidade da fórmula antigênica e a pouca variação quantitativa dos fatores antigênicos de cada uma das culturas permitem supor que os focos de pulorose e de tifo aviário, ocorridos nos últimos três anos, procedem de culturas autóctones já existentes no país há muitos anos.

• Salmonella gallinarum e S. pullorum composição antigênica comportamento bioquímico ocorrência no Brasil

Abstract in English:

Egg albumens from hens belonging to nine commercial laying stocks and one broiler stock, obtained from five poultry breeders, were tested for the presence of the group-specific (gs) antigen oflymphoid leukosis viroses (LLV). The congenital transmission rates in the laying stocks ranged from 6.7 to 24.7 percent, while the rate in the broiler stock tested was found to be 1.3 percent. The significance of these findings in relation to the eradication of LLV is discussed.

• Avian leukosis vírus congenital transmission groupspecific antigen

Abstract in Portuguese:

Albuminas de ovos de galinhas, pertencentes a nove linhagens comerciais de postura e uma de corte, obtidas de cinco granjas de matrizes, foram testadas pela presença do antígeno específico de grupo (gs) dos vírus da leucose linfóide aviária (LLV). As taxas de transmissão congênita nas linhagens de postura variaram entre 6, 7 e 24, 7 por cento, enquanto que a taxa na linhagem de corte testada foi de 1,3 por cento. O significado destes achados em relação à erradicação dos LLV é discutido.

• Vírus da leucose aviária transmissão congênita antígeno específico de grupo