PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Monteavaro, C.E., Soto P., Echevarría H.M., Catena M.C., Portiansky E.L. & Gimeno E.J. 2000. Immunohistochemical detection of Tritrichomonas foetus in experimentally infected mice. [Detecção imunohistoquímica de Tritrichomonas foetus em camundongos experimentalmente infectados.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(1):43-46. Institute of Pathology, Veterinary School, UNLP, P.O.Box 296, 1900 La Plata, Argentina. The need to intensify knowledge of the pathogenesis of bovine genital trichomoniasis (BGT) led to the use ofalternative animal models such as the mouse. Nevertheless, it is necessary to elucidate the dynamics of the infection in this animal species, evaluating different stages of the colonization and evolution of the pathological alterations. The immunohistochemistry (IHC) of fers advantages over the routine histopathological staining techniques for the detection of the protozoan in tissues, cellular detritus and inside the macrophages. The goal of the present study was to demonstrate the presence of Tritrichomonas foetus in the reproductive tract of infected mice using an IHC technique. Female BALB/c mice were infected with a suspension of T. foetus by intravaginal route, in the estrum phase, detected by exfoliative vaginal cytology. After 10 weeks, the animais were sacrificed; uterus and vagina were fixed and histologically processed. Some slides were stained with HE. The rest of the slides were processed for IHC. An immunoadsorbed polyclonal serum against T. foetus was used. The. avidine-biotine technique (HistoMouse, Zymed ™) was employed. The histopathological studies showed a dilation of the uterine glands, presence of macrophages in the lumen of the organ and inner part of the endometrial glands. No T. foetus was identified tísing this method. The IHQ allowed additionally the identification of the protozoan in the endometrium, endometrial glands, uterine lumen and inside neutrophils and macrophages. The cytological studies stained with IHC showed either isolated T. foetus adhered to epithelial cells or inside macrophages. This technique proves to be a useful tool for the study of the pathogenesis of bovine genital trichomoniasis (BGT) in an experimental model.

• Tritrichomonas foetus bovine genital trichomoniasis immunohistochemistry mouse tricomoníase genital bovina imunohistoquímica camundongo.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Monteavaro, C.E., Soto P., Echevarría H.M., Catena M.C., Portiansky E.L. & Gimeno E.J. 2000. Immunohistochemical detection of Tritrichomonas foetus in experimentally infected mice. [Detecção imunohistoquímica de Tritrichomonas foetus em camundongos experimentalmente infectados.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(1):43-46. Institute of Pathology, Veterinary School, UNLP, P.O.Box 296, 1900 La Plata, Argentina. A necessidade de aumentar o conhecimento da patogenia da tricomoníase genital bovina (BGT) conduziu ao uso de modelos experimentais alternativos como o camundongo. Não obstante, é necessário elucidar a dinâmica da infecção nesta espécie e avaliar as diferentes fases da colonização e evolução das alterações patológicas. A imunohistoquí-mica (IHQ) oferece vantagens sobre as técnicas histoquímicas de rotina para a observação do protozoário em tecidos, detritos celulares e dentro de macrófagos. O objetivo do presente trabalho foi demonstrar pelo uso de uma técnica de IHQ a presença de Tritrichomonas foetus no sistema reprodutivo de camundongos infectados. Camundongos BALB/c fêmeas foram infectados pela via intravaginal, com uma suspensão de T. foetus, na fase de estro, detectado com citologia exfoliativa vaginal. Depois de 10 semanas, os animais foram sacrificados; útero e vagina forma fixados e processados para histologia. Alguns cortes foram corados com HE. O restante dos cortes foi processado para IHQ. Foi usado um soro policlonaf imunoadsorvído anti-T.foetus. A técnica de avidina biatina (HistoMouse, Zymed™) foi empregada. Os estudos histopatológicos mostraram uma dilatação das glândulas uterinas, presença de macrófagos no lúmen do órgão e parte interna das glândulas endometriais. T. foetus não foi identificado por esse método. A IHQ permitiu identificar as mesmas lesões observadas e a presença do protozoário no endométrio, nas glândulas endometriais, no lúmen uterino e dentro de neutrófilos e macrófagos. O estudo citológico em lâminas coradas por IHQ, mostrou T.foetus aderido a células epiteliais, ou dentro de macrófagos. Esta técnica demonstra ser uma ferramenta útil para o estudo da patogenia da tricomoníase genital bovina (BGT) utilizando-se o camundongo como modelo experimental.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fernández P.E., Sanguinetti H.R., Portiansky E.L, Barbeito C.G. & Gimeno E.J. 1999. Detection of illegal estrogen administration through immunohistochemical markers in the bovine prostate. [Verificação da administração ilegal de estrógenos através de marcadores imunohistoquímicos na próstata de bovinos] Pesquisa Veterinaria Brasileira 19(3/4):133-138. Institute of Pathology "Prof. Dr. Bernardo Epstein", School of Veterinary Sciences, National University of La Plata, P.O.Box 296, (1900) La Plata, Argentina. The immunodetection of diverse cell markers was evaluated in prostatic samples from bullocks, and bullocks showing epithelial hyperplasia-metaplasia, with oestrogen-induced changes, and in experimental samples from bullocks inoculated with dietylstilbestrol (DES). Antigen-retrieval procedures allowed the use of tissues that had been fixed in formalin for long periods. Three tissue markers were chosen for the study: cytokeratins 13 and 16, vimentin and desmin. Monoclonal antibody K8.12 (specific for cytokeratins 13 and 16) stained basal cells and hyperplastic-metaplastic epithelium; monoclonal antivimentin, and desmin, allowed the definition of fibromuscular changes.

• Bovine prostate cell markers immunohistochemistry oestrogen Próstata bovina marcadores de celulares imunohistoquímica estrógenos.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fernández P.E., Sanguinetti H.R., Portiansky E.L, Barbeito C.G. & Gimeno E.J. 1999. Detection of illegal estrogen administration through immunohistochemical markers in the bovine prostate. [Verificação da administração ilegal de estrógenos através de marcadores imunohistoquímicos na próstata de bovinos] Pesquisa Veterinaria Brasileira 19(3/4):133-138. Institute of Pathology "Prof. Dr. Bernardo Epstein", School of Veterinary Sciences, National University of La Plata, P.O.Box 296, (1900) La Plata, Argentina. A imunodeteccão de marcadores celulares foi avaliada em amostras prostáticas de bovinos com hiperplasia ou hiperplasia-metaplasia epiteliais, induzidas por estrógenos administrados ilegalmente e em próstatas de bovinos inoculados com dietilstilbestrol (DES). A técnica de recuperação antigênica permitiu o uso de tecidos fixados em formalina, por longos períodos. Foram utilizados os anticorpos monoclonais K8.12, anti-vimentina e anti-desmina para determinação de células basais coradas/epitélio hiperplásico-metaplásico, células do estroma e células musculares, respectivamente. As alterações tissulares observadas nos casos de campo e nos experimentais foram semelhantes, através do que se concluiu que houve administração ilegal de estrógenos. O teste imunohistoquímico com esses marca-dores específicos foi útil ao exame histológico da próstata, uma vez que a análise das imagens permite maior e melhor quantificação das alterações observadas. Os testes bioquí-micos, entretanto, são necessários para uma avaliação mais precisa.

Abstract in English:

The etiology of actinomycotic-like lesions from 254 lymph nodes of cattle from southern Brazil was determined by histochemistry. The diagnosis of these lesions in hematoxylin-eosin (H-E) preparations was based upon the pyogranulomatous inflammatory reaction with centrally located sulphur grains. The lesions stained by the MacCallum-Goodpasture technique showed 60.36% Gram-positive coccoid bacteria (Staphylococcus), 36.62% Gram-negative cocco-bacillus (Actinobacillus lignieresz) and 2.72% Gram-positive filamentous branching elements (Actinomyces bovis). Fite-Faraco stain demonstrated the acid-fast properties and Gomori stain, the morphological features to distinguish between Actinomyces bovis .and Nocardia sp. Gram-positive cocei were diagnosed as botryomycosis which occurred predominantly in prescapular, parotid and femoral lymph nodes. The presence of Gram-negative coccobacillary elements indicated Actinóbacillus sp., whereas the finding of Gram-positive filamentous branching elements indicated Actinomyces sp. These latter two were more frequently found in retropharyngeal and sublingual lymph nodes. Small differences in the morphology of the bacterial colonies may help to establish the etiological diagnosis in H-E preparations. The Gram method, however, allows an accurate distinction between Actinobacillus lignieresi and Actinomyces bovis in cases where fresh material for bacteriological isolation is no longer available. Of 467 other cases originally diagnosed as tuberculosis in gross inspection at the slaughter house, 10.23% were histologically confirmed as actinomycotic-like granulomas. This certainly causes economic losses due to the condemnation of carcasses.

• Actinomycotic-like granuloma botriomycosis actinobacillosis actinomycosis granulomatous lymphadenitis histochemistry cattle pathology

Abstract in Portuguese:

Foi determinada a etiologia dos "granulomas actinomicóides" através da histoquímica em 254 materiais de linfonodos de bovinos do Rio Grande do Sul. O diagnóstico de granuloma actinomicóide foi baseado na inflamação piogranulomatosa, contendo, na porção central, os grânulos de enxofre, observados na coloração pela hematoxilina e eosina (H-E). Ao material com essa lesão foi aplicada a técnica de MacCallum-Ooodpasture que evidenciou uma incidência de 60,36% de bactérias cocoides Gram-positivas (Staphylococcus), 36,62% de coco-bacilos Gram-negativos (Actinobacillus lignieresz) e de 2,72% de elementos filamentosos, ramificados, Gram-positivos (Actinomyces bovis) como constituintes do grão de enxofre. Nos casos de actinomicose aplicaram-se as técnicas de Fite-Faraco e Prata de Gomori para a diferenciação entre Actinomyces bovis e Nocardia sp. Os casos de botriomicose foram vistos principalmente nos linfonodos pré-escapulares, parotídeos e femurais; os de actinobacilose e actinomicose nos retrofaringes e sublinguais. Pequenas diferenças do aspecto das colônias podem auxiliar no diagnóstico etiológico nas preparações coradas pela H-E, mas o emprego das técnicas de Gram permite a diferenciação entre Actinobacillus lignieresi e Actinomyces bovis quando não se dispõe de culturas. Adicionalmente observou-se pelo estudo histológico de outros 467 casos, que 10,23% deles foram diagnosticados como granuloma actinomicóide, porém interpretados macroscopicamente, na inspeção, como tuberculose o que certamente leva a prejuízos econômicos pela condenação das carcaças.

• Granuloma actinomicótico botriomicose actinobacilose actinomicose linfadenite granulomatosa histoquímica bovinos patologia