PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Araújo ER., Madruga C.R., Soares e.o. & Kessler R.H. 2003. [Progresses in immunization against Anaplasma marginale] Progressos na imunização contra Anaplasma marginale. Pesquisa Veterinária Brasileira23(3):139-148. Embrapa Gado de Corte, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. E-mail: flabio@cnpgc.embrapa.br The current immunization against anaplasmosis in cattle is derived from the blood of infected animais, as live or dead organisms. Nevertheless, efforts have been made to develop a new generation of vaccines. Toe outer membrane of Anaplasma marginale induces a protective immune response against challenge with homologous isolates and a partially protective response against heterologous challenge. ln this membrane, six major surface proteins (MSPs) have been identified, which · have been targeted for the development of immunogens against anaplasmosis. From those proteins, MSP1 a and MSP2 have shown the greatest potential as immunogens, protecting cattle against challenge with virulent homologous and heterologous isolates of A. marginale, despite the size polymorphism of the former protein and the variability of the gene that encodes the latter protein. Another alternative of immunogen is the in vitro culture of A. marginale. lnactivated organisms originating from Dermacentor variabilis IDE8 cell culture were tested as immunogen. Cattle immunized with cell culture-derived A. marginale had a significantly lower reduction in the packed cell volume after challenge exposure and did not display clinical anaplasmosis. Besides the protection afforded by this type of immunogen, cell culture derived organisms are free from bovine cells and pathogens, what is a major advantage as compared with traditional immunization procedures.

• Anaplasma marginale Ehrlichiae immunization bovine major surface proteins culture imunização bovino proteínas principais de superfície cultura.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Araújo ER., Madruga C.R., Soares e.o. & Kessler R.H. 2003. [Progresses in immunization against Anaplasma marginale] Progressos na imunização contra Anaplasma marginale. Pesquisa Veterinária Brasileira23(3):139-148. Embrapa Gado de Corte, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. E-mail: flabio@cnpgc.embrapa.br Até o presente momento, as imunizações contra anaplasmose em rebanhos bovinos utilizam organismos vivos ou mortos. No entanto, esforços têm sido realizados nos últimos anos com o objetivo de desenvolver uma nova geração de vacinas. A membrana externa de Anaplasma marginale é capaz de induzir reposta imune protetora contra desafio homólogo e parcialmente protetora contra desafio heterólogo. Nela foram identificadas seis proteínas principais de superfície (MSPs), as quais têm sido alvo de estudos para o desenvolvimento de imunógenos contra a anaplasmose. Destas proteínas, MSPla e MSP2 têm demonstrado maior potencial como imunógenos, protegendo os animais contra desafio com isolados virulentos homólogos e heterólogos de A margina/e, apesar do polimorfismo de tamanho da primeira proteína e variabilidade do gene que codifica a segunda. Uma outra alternativa para a imunização contra A. margina/e é o cultivo in vitro dessa riquétsia. Organismos inativados provenientes de cultivo em células IDE8 de Dermacentor variabilis foram testados como imunógeno. Os animais apresentaram uma significativa diferença na redução do volume globular após desafio e não apresentaram sinais clínicos de anaplasmose. Além da proteção conferida por este tipo de imunógeno, os organismos provenientes de cultura de células de carrapato são livres de células. e patógenos de bovinos, o que é uma vantagem significativa quando comparado aos processos tradicionais de imunização.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Melo V.S.P., Passos L.M.F, Facuri-Filho E.J., Saturnino H.M. & Ribeiro M.F.B. 2001. Natural infection of calves by Anaplasma marginale in dairy herds of the Metalúrgica Region, Minas Gerais. [Infecção natural por Anaplasma marginale em bezerras de fazendas leiteiras da região Metalúrgica de Minas Gerais] Pesquisa Veterinária Brasileira 21(4):146-150. Depto Parasitologia, Universidade Federal de Minas Gerais, Cx. Postal 486, Belo Horizonte, MG 31270-910, Brazil. The dynamic of natural infections by Anaplasma marginale in calves was evaluated during a period of one year on two farms located in the Metalúrgica Region, State of Minas Gerais, Brazil. Blood samples were collected weekly for rickettsemia and packed cell volume (PCV) determination. The animals born from March to July suffered the infection in October and November, independently of their age, whilst calves born from September to December acquired the infection during the first days of life. These animals presented patent rickettsemia from 30 days of life. During the patent period PCV decreased after one week of infection, ranging from 20 to 23%. It was concluded, that in the region studied, the transmission of A. marginale is influenced by climatic conditions, and that calves born during the dry season are more likely to acquire the infection when they are exposed to high transmission leveis during the subsequent raining season.

• Anaplasma marginale anaplasmosis cattle epidemiology anaplasmose bovinos epidemiologia.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Melo V.S.P., Passos L.M.F, Facuri-Filho E.J., Saturnino H.M. & Ribeiro M.F.B. 2001. Natural infection of calves by Anaplasma marginale in dairy herds of the Metalúrgica Region, Minas Gerais. [Infecção natural por Anaplasma marginale em bezerras de fazendas leiteiras da região Metalúrgica de Minas Gerais] Pesquisa Veterinária Brasileira 21(4):146-150. Depto Parasitologia, Universidade Federal de Minas Gerais, Cx. Postal 486, Belo Horizonte, MG 31270-910, Brazil. Realizou-se um estudo da dinâmica de infecções naturais por Anaplasma marginale, durante o período de um ano, em duas propriedades localizadas na Região Metalúrgica do Estado de Minas Gerais. Foram realizados esfregaços sangüíneos e determinação do volume globular (VG). Os animais que nasceram no período de março a julho sofreram a infecção em outubro e novembro, independentemente da idade, enquanto os que nasceram no período de setembro a dezembro adquiriram a infecção nos primeiros dias de vida, com parasitemia patente a partir de 30 dias de idade. Durante o período patente, o VG reduziu na primeira semana de infecção, variando entre 20 a 23%. Concluiu-se que a ocorrência da primo-infecção sofre influência das estações do ano e que bezerros nascidos na estação seca apresentam maior risco de infecção, quando expostos às condições de elevada transmissão durante a estação chuvosa subseqüente.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Souza J.C.P., Soares C.O., Massard C.L., Scofield A. & Fonseca A.H. 2000. [Seroprevalence of Anaplasma marginale in cattle in the "Norte Fluminense" mesoregion.] Soroprevalência de Anaplasma marginale em bovinos na mesorregião Norte Fluminense. Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):97-101. Depto Parasitologia Animal, Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro, Km 47, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. Serumprevalence of antibodies againstAnaplasma marginale was evaluated by the indirect Enzyme-Linked lmmunosorbent Assay (ELISA). Sera samples from 532 bovines from nine municipalities in the "Norte Fluminense" mesoregion, Rio de Janeiro state, were analysed. The results showed that 485 (91.16%) were positive, of which 55.45% had a titre of 1 :500, 22.18% of 1 :1000, 6.77% of 1 :2000, 3.01% of 1 :4000, 1.50% of 1 :8000, 0.94% of 1 :16000, 0.75% of 1 :32000, 0.56% of 1 :64000, and 8.84% were negative. The prevalence analysis was done within three age groups: 1 to 3 years (n= 110), 3 to 6 years (n= 241) and > 6 years (n= 181), of which 91.82%, 92.95% and 88.95%were positive, respectively. According to the breed, 91.22% of beef cattle (n= 444) and 90.91% of dairy cattle (n= 88), were positive. Regarding the sex, 91.35% of the females (n= 497) and 88.57% of the males (n= 35), were positive. There were no significant differences between the age groups, breeding types and the sexes (P > 0.05); and between the prevalence in the municipalities (P > 0.000). The seroprevalence showed that the region has to be considered enzootically stable, and the infection by A. marginale in this area is high and homogeneous.

• Seroepidemiology Anaplasma marginale bovine anaplasmosis enzyme immunoassay "Norte Fluminense" mesoregion Brazil Soroepidemiologia anaplasmose bovina ensaio imunoenzimático mesorregião Norte Fluminense Brasil.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Souza J.C.P., Soares C.O., Massard C.L., Scofield A. & Fonseca A.H. 2000. [Seroprevalence of Anaplasma marginale in cattle in the "Norte Fluminense" mesoregion.] Soroprevalência de Anaplasma marginale em bovinos na mesorregião Norte Fluminense. Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):97-101. Depto Parasitologia Animal, Univ. Fed. Rural do Rio de Janeiro, Km 47, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. Avaliou-se a soroprevalência de Anaplasma marginale em bovinos de nove municípios na mesorregião Norte Fluminense do estado do Rio de Janeiro através do ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA) indireto. 532 amostras de soro de bovinos foram analisadas; dos quais, 497 eram fêmeas e 35 eram machos; e destes, 444 animais com aptidão zootécnica para corte e 88 com aptidão para leite. A avaliação sorológica revelou que 485 (91, 16%) foram positivas, dos quais: 55,45% com título de 1 :500, 22, 18% com título de 1:1000, 6,77% com título de 1:2000, 3,01% com título de 1 :4000, 1,50% com título de 1 :8000, 0,94% com título de 1:16000, 0,75% com título de 1:32000, 0,56% com título de 1 :64000 e 8,84% foram negativos. A análise da prevalência segundo a faixa etária foi realizada dividindo-se em três grupos etários: 1 a 3 anos (n= 110), 3 a 6 anos (n= 241) e > 6 anos (n= 181), onde 91,82%, 92,95% e 88,95% dos animais foram positivos, respectivamente. Segundo a aptidão zootécnica, 91,22% dos bovinos com aptidão para corte e 90,91% dos bovinos com aptidão para leite foram positivos. Em relação ao sexo, 91,35% das fêmeas e 88,57% dos machos foram positivos. Não houve diferença significativa (P>0,05) entre os grupos etários, entre os sexos e entre as aptidões zootécnicas. A prevalência entre os municípios não diferiu significativamente (P>0,000), demonstrando que a infecção por A. marginale em bovinos é alta e homogênea entre os municípios. A mesorregião estudada foi caracterizada como uma área de estabilidade enzoótica.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Madruga C.R., Marques A.P.C., Leal C.R.B., Carvalho C.M.E., Araújo F.R. & Kessler R.H. 2000. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay to detect antibodies against Anaplasma marginale. [Avaliação de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):109-112. Embrapa Gado de Corte, Rodovia BR 262 Km 4, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. A rapid indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for measuring antibodies against Anaplasma marginale using a partially soluble antigen prepared from semipurified initial bodies from erythrocytes with 80.0% of rickettsiaemia. This technique utilized alkaline phosphatase and p-nitrophenyl phosphate as reaction indicators. The high sensitivity (100.0%) was confirmed with sera from 100 calves experimentally-infected with A. marginale. All of these animals showed seroconversion before or at the same time of the first rickettsiaemia or even when it was not detected. Also the elevated specificity (94.0%) was confirmed by the low percentage of cross-reactions with sera from animals experimentally-infected with Babesia bigemina and Babesia bovis (1.4 and 6.6%, respectively). Performances of ELISA and indirect fluorescent antibody test (IFAT) with 324 sera from enzootically stable area did not show statistical difference (P>0.05), since the former showed 96.9% and the latter 97.2% of positive reactions. The advantage of this ELISA is a shorter execution time than others developed until now, allowing more samples to be analyzed.

• Anaplasma marginale ELISA serological tests cattle testes sorológicos bovino.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Madruga C.R., Marques A.P.C., Leal C.R.B., Carvalho C.M.E., Araújo F.R. & Kessler R.H. 2000. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay to detect antibodies against Anaplasma marginale. [Avaliação de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):109-112. Embrapa Gado de Corte, Rodovia BR 262 Km 4, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. Um ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA) indireto, foi desenvolvido para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale, utilizando um antígeno parcialmente solúvel preparado a partir de corpúsculos iniciais semipurificados de eritrócitos com 80,0% de parasitemia. Esta técnica utilizou a fosfatase alcalina e o p-nitrofenil fosfato como indicadores de reação. A alta sensibilidade (100,0%) foi comprovada com soros ele 100 bezerros experimentalmente infectados com A. marginale. Todos estes animais soroconverteram antes ou ao mesmo tempo que a primeira parasitemia foi detectada, ou mesmo quando não se obteve parasitemia. A elevada especificidade (94,0%) foi confirmada pela baixa percentagem ele reações cruzadas com soros de animais infectados experimentalmente com Babesia bigemina e Babesia bovis (1,4 e 6,6%, respectivamente). Os desempenhos do ELISA e da imunofluorescência indireta (IFI) com 324 soros de uma área de estabilidade enzoótica não diferiram estatisticamente (P>0,05), uma vez que o primeiro teste detectou 96,9% de reações positivas, enquanto o segundo, 97,2%. A vantagem deste ELISA foi um menor tempo ele execução do que outros desenvolvidos até o momento, permitindo a análise de um maior·número de soros.