Resultado da pesquisa (1202)
Termo utilizado na pesquisa TIC
#61 - Detection of paratuberculosis in dairy cows from southern Brazil
Abstract in English:
Bovine paratuberculosis causes chronic, incurable diarrhea and weight loss, resulting in decreased cattle production. The disease is caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), an obligate intracellular mycobactin-dependent mycobacterium that replicates slowly in the host and has heightened environmental resistance. In countries where the disease is found and the damage has been quantified, direct and indirect economic losses are extremely high. Local epidemiological data is of paramount importance for the implementation of control programs. Our objective was to verify whether paratuberculosis is present in commercial dairy herds in different mesoregions of RS. Therefore, a prospective, cross-sectional and observational study was performed on dairy cattle from five mesoregions of the RS state, Brazil. Milk samples taken from individual cows on commercial farms were tested using indirect ELISA tests and classified as negative, suspicious, or positive. In herds containing at least one positive cow, we conducted convenience sampling of feces directly from the rectal ampulla to identify MAP through PCR. Of the 362 cows tested, 20 were seroreactive for paratuberculosis from two mesoregions. The PCR tests were all positive; cows with a negative ELISA and positive PCR results probably indicate that the MAP was ingested and eliminated without causing infection. We found that paratuberculosis is likely endemic in the northwest and northeast mesoregions.
Abstract in Portuguese:
A paratuberculose bovina causa diarreia crônica e incurável, perda de peso e resulta em diminuição da produção. A doença é causada pelo Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), micobactéria intracelular obrigatória, dependente de micobactina, que se replica lentamente no hospedeiro e possui elevada resistência ambiental. Nos países onde a doença é encontrada e os danos foram quantificados, as perdas econômicas diretas e indiretas são extremamente altas. Os dados epidemiológicos locais são de suma importância para a implementação de programas de controle. Nosso objetivo foi verificar se a paratuberculose está presente em rebanhos leiteiros comerciais em diferentes mesorregiões do RS. Para tanto, foi realizado um estudo prospectivo, transversal e observacional em bovinos leiteiros de cinco mesorregiões do estado do RS, Brasil. Amostras de leite individuais, provenientes de vacas leiteiras de fazendas comerciais foram testadas com ELISA indireto e classificadas como negativas, suspeitas ou positivas. Em rebanhos contendo pelo menos uma vaca positiva, realizamos amostragem por conveniência, em que foram coletadas fezes diretamente da ampola retal, para identificar MAP por meio da PCR. Das 362 vacas testadas, 20 foram sororreativas para paratuberculose, oriundas de duas mesorregiões. Os testes de PCR foram todos positivos. Vacas com resultado negativo no teste ELISA e PCR positivo provavelmente indicam que o MAP foi ingerido e eliminado sem causar infecção. Sugere-se que a paratuberculose é provavelmente endêmica nas mesorregiões noroeste e nordeste.
#62 - Use of smartphone messaging applications to increase diagnostic efficiency in veterinary diagnostic laboratories
Abstract in English:
Many inconclusive diagnoses have been reported in studies carried out in veterinary diagnostic laboratories (VDLs). These inconclusive diagnoses are often associated with field veterinarians sending tissue samples and carcasses for histopathological examination. The use of social media in care has the potential as a tool for improvements in animal health. We evaluated the improvement in the rate of conclusive diagnoses in the VDL when using a messaging application for smartphones as a guidance tool for field veterinarians to refer animals and sample tissues for necropsy and histopathology. Veterinarians contacted the VDL team via a messaging app and forwarded videos, images, and clinical-epidemiological history. Based on this information, guidelines were created in real-time for contacting professionals about methods for collecting samples during necropsy and making diagnoses and scheduling visits to properties. The data obtained showed that smartphone messaging applications could be useful tools to expand the performance of VDLs and improve their diagnostic efficiency, especially when sending samples of animals that died is impossible due to certain sanitary conditions.
Abstract in Portuguese:
Muitos diagnósticos inconclusivos têm sido relatados em estudos realizados em laboratórios de diagnóstico veterinário (LDVs). Esses diagnósticos inconclusivos são frequentemente associados a veterinários de campo que enviam amostras de tecidos e carcaças para exame histopatológico. O uso das mídias sociais com cuidado tem potencial como ferramenta para melhorias na saúde animal. Avaliamos a melhora na taxa de diagnósticos conclusivos no LDV ao utilizar um aplicativo de mensagens para smartphones como ferramenta de orientação para veterinários de campo encaminharem animais e amostras de tecidos para necropsia e histopatologia. Os veterinários entraram em contato com a equipe do L por meio de um aplicativo de mensagens e encaminharam vídeos, imagens e histórico clínico-epidemiológico. Com base nessas informações, foram criadas orientações em tempo real para contato dos profissionais sobre métodos de coleta de amostras durante a necropsia e realização de diagnósticos, além do agendamento de visitas às propriedades. Os dados obtidos mostraram que os aplicativos de mensagens para smartphones podem ser ferramentas úteis para ampliar o desempenho dos VDLs e melhorar sua eficiência diagnóstica, principalmente quando o envio de amostras de animais que morreram é impossível devido a determinadas condições sanitárias.
#63 - Evaluation of infection by Borrelia sp. in domestic and wild mammals and ticks from the Catimbau National Park, Pernambuco
Abstract in English:
Spirochetes in the genus Borrelia (Spirochaetes) are the etiological agents of two zoonotic diseases that have rodents as reservoirs: the Lyme disease, transmitted by ixodid ticks (Ixodidae), and tick-borne relapsing fever, which is transmitted mostly by argasid ticks (Argasidae). The information on the epidemiology of pathogens that affect animals is scarce, especially in places that have been barely studied, such as the Caatinga biome. Thus, in the present study, we aimed to detect DNA of Borrelia in the blood of wild and domestic mammals, as well as in ticks collected in the Catimbau National Park, State of Pernambuco, Northeast Brazil. Blood was collected from 77 captured wild animals belonging to Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2), and Dasypodidae (2) families. Additionally, blood samples from 120 sheep, 119 goats, 70 dogs, and 47 cattle were obtained. A total of 286 ticks were collected in the environment and identified as Ornithodoros cf. tabajara (188) and Ornithodoros rietcorreai (98); in addition, larvae of Ornithodoros spp. were collected on Thrichomys laurentius (4 specimens) and Monodelphis domestica (1); larvae of O. rietcorreai on Didelphis albiventris (2) and T. laurentius (1); Amblyomma parvum on T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) on dogs (121) and Rhipicephalus microplus on cattle (47). All blood samples, 120 free-living ticks, 46 O. rietcorreai and 74 O. cf. tabajara, and 12 R. sanguineus s.l. were submitted to DNA extraction to perform a polymerase chain reaction (nested PCR), aiming at amplifying a fragment of the flaB gene present in all species of Borrelia. Only one free-living specimen of O. cf. tabajara (1.3%) was positive. Negative detections in mammals may be related to the absence of infection or the low concentration of the spirochetes in the hosts. The low prevalence of Borrelia found in ticks can be explained by the low infection rates that these spirochetes depict in their vectors. New studies focusing on the detection of antibodies, as well as on the sequencing and isolating Borrelia spp. should be encouraged for a better understanding of the epidemiology of these bacterial agents in the region.
Abstract in Portuguese:
No gênero Borrelia (Spirochaetes) encontram-se dois grupos de agentes responsáveis por duas doenças zoonóticas, que têm roedores como reservatórios e acometem humanos: o grupo de Lyme, transmitido por carrapatos ixodídeos, e a febre recorrente, que pode ser transmitida por carrapatos argasídeos ou piolhos. Poucas são as informações sobre epidemiologia e agentes patogênicos que acometem animais, podendo representar uma riquíssima fonte de informações, principalmente em locais nunca estudados, pois podem ser bioindicadores de qualidade do ambiente e saúde. Desta forma, no presente estudo foi realizada a pesquisa de Borrelia spp. em amostras de sangue de mamíferos silvestres e domésticos, assim como de carrapatos, do Parque Nacional do Catimbau, Pernambuco. Foi realizada a captura e colheita sanguínea de 77 animais pertencentes às famílias Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2) e Dasypodidae (2). Adicionalmente, amostras de sangue foram obtidas de 120 ovinos, 119 caprinos, 70 cães e 47 bovinos. Foram coletados 286 carrapatos no ambiente, identificados como Ornithodoros cf. tabajara (188) e Ornithodoros rietcorreai (98); além de carrapatos coletados nos animais: Ornithodoros spp. em Thrichomys laurentius (4 espécimes) e Monodelphis domestica (1); O. rietcorreai em Didelphis albiventris (2) e T. laurentius (1); Amblyomma parvum em T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) em cães (121) e R. microplus em bovinos (47). Todas as amostras sanguíneas, 120 carrapatos de vida livre, sendo 46 O. rietcorreai e 74 O. cf. tabajara, e 12 R. sanguineus s. l. foram submetidos à extração de DNA para realização da reação em cadeia da polimerase (nested-PCR), visando amplificação de um fragmento do gene flaB presente em todas as espécies de Borrelia. Não houve amplificação nas amostras sanguíneas dos animais, no entanto em um espécime de O. cf. tabajara de vida livre (1,3%) foi detectado o DNA de Borrelia. A não detecção nos mamíferos pode estar relacionada com a ausência de infecção ou à baixa concentração do agente nos hospedeiros. A baixa prevalência encontrada nos carrapatos pode ser justificada devido à baixa infecção nos vetores. Novos estudos focando na determinação de anticorpos, assim como no sequenciamento e isolamento de Borrelia devem ser estimulados para uma melhor compreensão da epidemiologia do agente na região.
#64 - Retrospective evaluation of canine anal sac carcinoma (260 cases) in Brazil: late detection and failures in lymph node evaluation
Abstract in English:
Anal sac neoplasms are common in companion animals, and the epidemiological profile has been extensively described in international studies; however, national data are still lacking. Data on the Brazilian reality of anal sac carcinoma cases’ diagnosis and treatment are also scarce. The purpose of this study was to retrospectively evaluate cases of canine anal sac carcinoma and assess the profile of involvement, tumor size, and lymphatic invasion at the time of diagnosis. Information was obtained from Vetpat laboratory database, from 260 cases spanning a 12-year period (2010-2021). In histopathological evaluation at the time of diagnosis, data on sex, age, and race were described, as well as tumor size and lymphatic invasion. The presence of metastasis was also assessed in cases where lymph nodes were sampled. Simple descriptive statistical analysis was used to evaluate the data. Adult and elderly, female, and mixed-breed animals were more involved, indicating differences from international studies that can be attributed to sociocultural factors. In terms of tumor size, it was observed that 93% of the cases had the largest diameter above 2.5cm. Only 7% of the cases had the largest diameter below 2.5cm, demonstrating the often late diagnosis and the importance of rectal palpation examination during the general physical assessment of canine patients, particularly at an advanced age. Regarding lymphatic invasion and affected lymph nodes, 50% of the cases had lymphatic invasion described in the histopathological examination. However, only 5% of the lymph nodes were sent along with the primary tumor, indicating the disease’s aggressive behavior but with possible metastases underdiagnosed.
Abstract in Portuguese:
As neoplasias de saco anal possuem incidência importante nos animais de companhia, tendo o seu perfil epidemiológico de acometimento amplamente descrito em estudos internacionais, entretanto dados nacionais ainda são escassos. De modo semelhante, dados acerca da realidade brasileira, associados ao diagnóstico e conduta desses casos, são inexistentes. O objetivo do presente trabalho foi avaliar, de forma retrospectiva, os casos de carcinoma de saco anal canino, avaliando o perfil de acometimento, o tamanho tumoral e a invasão linfática no momento do diagnóstico. Foi obtido informações de 260 casos, respectivo a um período de 12 anos (2010-2021), proveniente do banco de dados do laboratório Vetpat. Foram descritos os dados acerca do sexo, idade e raça, bem como o tamanho tumoral e presença de invasão linfática em avaliação histopatológica no momento do diagnóstico. Os casos que cursavam com envio dos linfonodos também foram avaliados quanto a presença de metástase. Os dados foram avaliados mediante análise estatística descritiva simples. Foi encontrado um maior acometimento em animais adultos a idosos, do sexo feminino e sem raça definida, evidenciando diferenças em relação a estudos internacionais, que podem ser atribuídas a fatores socioculturais. Em relação ao tamanho tumoral, observou-se que 93% dos casos apresentavam o maior diâmetro acima de 2,5cm e apenas 7% dos casos apresentavam o maior diâmetro abaixo de 2,5cm, evidenciando o diagnostico frequentemente tardio, bem como a importância do exame de palpação retal durante a avaliação física geral de pacientes caninos, principalmente em idade avançada. Quanto a avaliação da invasão linfática e linfonodos acometidos, 50% dos casos cursavam com invasão linfática descrita em exame histopatológico, entretanto em apenas 5% dos casos os linfonodos foram enviados junto ao tumor primário, evidenciando o comportamento agressivo da doença, porém com metástases possivelmente subdiagnosticadas.
#65 - A comparative analysis of anatomopathological features and COX-2 expression of mammary neoplasms with malignant mesenchymal components in female dogs
Abstract in English:
Canine mammary neoplasms with malignant mesenchymal components, such as carcinosarcomas and sarcomas, belong to an uncommon and histologically heterogeneous group. Little is known about the biological behavior of these histogenic variants. This study aimed to compare the clinicopathological characteristics and the COX-2 immunohistochemical expression of different histologic subtypes of carcinosarcomas and sarcomas. Samples of 23 carcinosarcomas and 15 sarcomas from the mammary glands of female dogs were studied. Medical records were reviewed to obtain clinical data. Subsequently, histology microscope slides were analyzed to assess for mesenchymal subtypes, necrosis, vascular invasion, histologic grades, and lymph node metastasis. Immunohistochemistry was used to assess the COX-2 expression. The malignant mesenchymal proliferation was categorized into osteosarcomas (23/40), fibrosarcomas (5/40), liposarcomas (6/40) and chondrosarcomas (4/40). The osteosarcomatous differentiation was the most predominant type among the sarcomas and carcinosarcomas and was associated with vascular invasion (P=0.010) and lymph node metastases (P=0.014). High COX-2 expression was detected in 14.3% of the carcinosarcomas (carcinoma and/or sarcoma cells) and 27.3% of the sarcomas. The carcinosarcomas and sarcomas had similar clinical and pathological characteristics and developed as large tumors, with intratumoral necrosis and a predominance of high histologic grades, although the frequency of vascular invasion and lymph node metastasis was low. Osteosarcoma subtypes presented more aggressive characteristics than non-osteosarcoma subtypes.
Abstract in Portuguese:
Neoplasias mamárias caninas com componentes mesenquimais malignos, como carcinossarcomas e sarcomas, são um grupo de neoplasias pouco frequentes e histologicamente heterogêneas e pouco se sabe sobre o comportamento biológico das variantes histogênicas. O objetivo desse estudo é comparar as características anatomopatológicas e a expressão imunoistoquímica de COX-2 de diferentes subtipos histológicos de carcinossarcomas e sarcomas. Foram estudados 23 carcinosarcomas e 17 sarcomas da glândula mamária de cadelas. Os prontuários médicos foram revisados para obtenção de dados clínicos. Posteriormente, as lâminas histológicas foram avaliadas para acessar os subtipos mesenquimais, necrose, invasão vascular, grau histológico, metástase linfonodal. A imunoistoquímica foi realizada para avaliar a expressão de COX-2. Os tipos encontrados de proliferação mesenquimal maligna foram osteossarcoma (23/40), fibrossarcoma (7/40), lipossarcoma (6/40) e condrossarcoma (4/40). A diferenciação osteossarcomatosa foi predominante entre os sarcomas e carcinossarcomas e foi associado com invasão vascular (P=0,006) e metástase linfonodal (P=0,014). Uma expressão alta de COX-2 foi detectada em 14,3% dos carcinossarcomas (células carcinomatosas e/ou sarcomatosas) e 27,3% dos sarcomas. Os carcinossarcomas e sarcomas apresentaram características clínicas e patológicas semelhantes e se desenvolveram como tumores grandes, com necrose intratumoral e predomínio de alto grau histológico, mas com baixa frequência de invasão vascular e metástase distante. Os subtipos osteossarcomatosos apresentaram características mais agressivas quando comparados com subtipos não osteossarcomatosos.
#66 - Sarcocystis spp. detection in cattle using different diagnostic methods
Abstract in English:
Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.
Abstract in Portuguese:
Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.
#67 - Evaluation of five parasitological techniques for diagnosing phylum Ciliophora cysts in fecal samples from free-living wild artiodactyls
Abstract in English:
A variety of laboratory techniques are used in parasitological diagnosis. However, studies that analyze their laboratory efficiency are very scarce, especially with regard to biological samples from wild animals that are little known, with little popular attachment, such as artiodactyls. These can be infected by different parasites, including protozoa of the phylum Ciliophora, which includes the parasites Balantioides coli and Buxtonella sulcata. In this light, the aim of this study was to compare the efficiency of five coproparasitological techniques for diagnosing protozoan cysts of the phylum Ciliophora in the feces of free-living artiodactyls. To this end, 101 fecal samples were collected from trails in Pedra Selada State Park, Rio de Janeiro state, from 2020 to 2021. All the samples were analyzed using the qualitative techniques of modified Sheather floatation, modified Ritchie sedimentation and Lutz, as well as the quantitative techniques of Mini-FLOTAC and McMaster. Cyst recovery was best achieved using the modified Ritchie technique, in which 62.5% positivity was detected, followed by Lutz (47.5%), modified Sheather (37.5%) and the quantitative techniques of Mini-FLOTAC (30%) and McMaster (17.5%). In most of the comparisons between the techniques, reasonable agreement regarding the diagnosis was observed (Kappa 0.21 to 0.40), which was statistically significant (p≤0.05). McMaster showed higher mean and standard deviation values for counts of cysts per gram of feces than Mini-FLOTAC. However, there was no significant difference in the estimates for cyst counts (Wilcoxon p>0.05). Sedimentation qualitative techniques were more indicated for diagnosing cysts of protozoa of the phylum Ciliophora in the feces of free-living wild artiodactyls. These techniques can therefore be used as laboratory tools for environmental parasite monitoring. In addition, between the two quantitative techniques, Mini-FLOTAC presented better performance, thus showing its potential as a tool for estimating the abundance of cystic forms of the phylum Ciliophora in environmental samples.
Abstract in Portuguese:
Diversas são as técnicas laboratoriais utilizadas no diagnóstico parasitológico. No entanto, estudos que analisam a eficiência laboratorial das mesmas são muito escassos, principalmente quando se trata de amostras biológicas de animais silvestres, que possuem pouca divulgação e apego popular, como os artiodáctilos. Estes podem se infectar por diferentes parasitos, incluindo os protozoários do Filo Ciliophora, no qual se inclui Balantioides coli, bem como Buxtonella sulcata. Mediante o exposto, este estudo objetivou comparar a eficiência entre cinco técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de cistos de protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos em vida livre. Entre 2020 e 2021 foram coletadas 101 amostras fecais em trilhas do Parque Estadual da Pedra Selada localizado no estado do Rio de Janeiro. Todas as amostras foram analisadas pelas técnicas qualitativas de flutuação de Sheather modificada, sedimentação de Ritchie modificada e Lutz, bem como por meio das técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC e McMaster. Pode-se verificar uma superioridade na recuperação dos cistos por meio da técnica de Ritchie modificada, no qual foi detectado 62,5% de positividade, seguida pelo Lutz (47,5%), Sheather modificada (37,5%) e pelas técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC (30%) e McMaster (17,5%). Na maioria das comparações entre as técnicas foi possível verificar uma concordância razoável (Kappa 0,21 a 0,40) em relação ao diagnóstico entre as mesmas, sendo este estatisticamente significativo (p≤0,05). McMaster em comparação com o Mini-FLOTAC foi a que apresentou os maiores valores médio e de desvio padrão na contagem dos cistos por grama de fezes. No entanto, não foi evidenciado diferença significativa na estimativa de contagem dos cistos (Wilcoxon=p>0,05). Pode-se verificar que as técnicas qualitativas de sedimentação foram consideradas as mais indicadas para o diagnóstico de cistos do protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos silvestres em vida livre, podendo ser utilizadas como ferramentas laboratoriais de monitoramento parasitário ambiental. Além disso, dentre as técnicas quantitativas, o Mini-FLOTAC foi a que apresentou a melhor performance, denotando o seu potencial como uma ferramenta para se estimar a abundância de formas císticas do Filo Ciliophora em amostra ambiental.
#68 - Occurrence of Salmonella spp. in fecal samples from foals with and without diarrhea in the state of São Paulo: microbiological diagnosis, antimicrobial susceptibility profile, and molecular detection
Abstract in English:
The present study investigated Salmonella spp. in the feces of 200 foals up to one year of age (100 with clinical signs of diarrhea and 100 without clinical signs of diarrhea). Bacteriological culture, serotyping, antimicrobial susceptibility, and real-time PCR (qPCR SYBR® Green or a TaqMan®) for detecting the invA gene (with and without a selective pre-enrichment step in tetrathionate broth) were performed. Bacterial culture revealed 15% (n=30) of positive animals (21 animals with diarrhea and nine without diarrhea). Among the 30 isolates, 13 different serovars were identified: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multidrug resistance was found in 43.33% (n=13) of the isolates, with one isolate obtained from animals without diarrhea and 12 isolates from animals with diarrhea. All qPCR techniques used in the study classified more samples as positive for Salmonella spp. than the bacterial culture of feces. In addition, all qPCR techniques detected more positive animals in the diarrhea group than in the diarrhea-free group. The results confirm the utility of the qPCR method without the pre-enrichment step in tetrathionate as a rapid test for Salmonella spp. in carrier animals. In animals with clinical signs of diarrhea, it can be combined with bacterial culture (antimicrobial susceptibility testing and serotyping). The isolation of Salmonella spp. in nine animals without diarrhea confirms the importance of asymptomatic carrier animals in the epidemiology of the disease. The multidrug resistance observed highlights the importance of rational antimicrobial use in horses and adopting biosecurity protocols that are efficacious in controlling the spread of infections between animals and zoonotic transmission in farms.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo investigou a ocorrência de Salmonella spp. em fezes de 200 potros com até um ano de idade (100 com sinais clínicos de diarreia e 100 sem sinais clínicos de diarreia), utilizando as técnicas de cultivo bacteriológico e PCR em tempo real (qPCR) pelos métodos de corante fluorescente (SYBR® Green) e sonda específica (Taqman®) para a detecção do gene invA com e sem etapa de pré-enriquecimento seletivo em caldo de tetrationato. O cultivo bacteriológico revelou 15% (n=30) de animais positivos (21 animais com diarreia e nove animais sem diarreia). Dentre esses 30 isolados, 13 sorovares diferentes foram identificados: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multirresistência foi constatada em 43,33% (n=13) dos isolados, sendo um isolado obtido de animal sem diarreia e 12 isolados de animais com diarreia. Todas as técnicas de qPCR empregadas no estudo apresentaram maior número de amostras classificadas como positivas para Salmonella spp. comparadas ao cultivo bacteriológico de fezes. Adicionalmente, em todas as técnicas de qPCR houve maior número de animais detectados como positivos no grupo de animais com diarreia em relação aos animais sem diarreia. Os resultados confirmaram a utilidade do método qPCR sem a etapa de pré-enriquecimento em tetrationato, como um teste rápido para detecção de Salmonella spp. em animais portadores ou em animais com sinais clínicos de diarreia. O cultivo bacteriológico deve ser associado para a realização do teste de sensibilidade aos antimicrobianos e sorotipificação. O isolamento de Salmonella spp. em nove animais sem diarreia, confirma a importância dos animais portadores assintomáticos na epidemiologia da doença. A multirresistência observada evidencia a importância do uso racional de antimicrobianos em equinos e a importância da adoção de protocolos de biossegurança que sejam eficazes para controlar a disseminação de infecções entre animais e a transmissão zoonótica nas fazendas.
#69 - Real-time PCR quantification and histopathological findings of Mycoplasma hyopneumoniae infection in the lungs of pigs slaughtered in São Luís, Maranhão, Brazil
Abstract in English:
Porcine enzootic pneumonia (PES), mainly caused by the bacteria Mycoplasma hyopneumoniae, is the main cause of respiratory problems in pigs. Infection by M. hyopneumoniae leads to production losses and the predisposition of affected animals to secondary infections, which may result in the condemnation of carcasses and organs due to lung lesions at the time of slaughter. The objective of the research was to evaluate the infection by M. hyopneumoniae in pigs submitted to slaughter in São Luís Island/MA, using molecular and histopathological diagnostic methods. One hundred fifty lung samples were collected from inspected (n=65) and non-inspected (n=85) slaughter pigs on São Luís Island, Maranhão, from July 2019 to August 2021. Of the 150 DNA samples collected, 121 showed an amplified product for Cyt B in the PCR assay. Thus, 121 samples were submitted to qPCR of M. hyopneumoniae, of which 44 (36.36%) showed positive results. The mean amount of bacterial load ranged from 1.20 × 101 to 7.20 × 104, with a mean of 1.73 × 104 copies. Of the reagent samples, 81.81% (36 samples) were obtained from non-inspected slaughter, while 18.18% (8 samples) were obtained from slaughterhouses. In the histopathological analysis, 44 positive qPCR samples were evaluated, of which 28 (63.63%) presented results compatible with the main inflammatory process associated with the presence of M. hyopneumoniae, that is, bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia (BALT). Three samples that showed the highest bacterial load (qPCR: 5.63 × 10³, 2.19 × 104 and 7.23 × 104) showed more evident lesions in this study. The microscopic findings associated with the quantifications indicated a relationship between the amount of bacterial load and the presence of microscopic lesions; higher bacterial load in lung tissue is associated with increased histopathologic staining for BALT hyperplasia. In conclusion, the results point to the circulation of the etiological agent in the sampled animals and the need for preventive measures on pig farms in Maranhão with the involvement of producers, sanitary defense and inspection agencies.
Abstract in Portuguese:
A pneumonia enzoótica suína (PES), causada principalmente pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae, é a principal causa de problemas respiratórios em suínos. A infecção por M. hyopneumoniae leva a perdas produtivas e a predisposição dos animais acometidos a infecções secundárias, o que pode resultar em condenação de carcaças e órgãos por lesões pulmonares no momento do abate. O objetivo da pesquisa foi avaliar a infecção por M. hyopneumoniae em suínos submetidos ao abate na Ilha de São Luís, por meio de métodos diagnósticos moleculares e histopatológicos. Para isso, foram coletadas 150 amostras de pulmão de suínos de abate inspecionado (n=65) e não inspecionado (n=85) na Ilha de São Luís/Maranhão, no período de julho de 2019 a agosto de 2021. Das 150 amostras de DNA coletadas, 121 apresentaram produto amplificado para Cyt B no ensaio de PCR. Assim, 121 amostras foram submetidas à qPCR de M. hyopneumoniae, das quais 44 (36,36%) apresentaram resultados positivos. A quantidade média de carga bacteriana variou de 1,20 × 101 a 7,20 × 104, com média de 1,73 × 104 cópias. Das amostras reagentes, 81,81% (36 amostras) foram obtidas de abate não inspecionado, enquanto 18,18% (8 amostras) foram obtidas em abatedouro. Na análise histopatológica, foram avaliadas 44 amostras positivas para qPCR, das quais 28 (63,63%) apresentaram resultados compatíveis com o principal processo inflamatório associado à presença de M. hyopneumoniae, ou seja, hiperplasia do tecido linfóide associado ao brônquio (BALT). Três amostras que apresentaram maior carga bacteriana (qPCR: 5,63 × 10³, 2,19 × 104 e 7,23 × 104) foram mais evidentes neste estudo. Os achados microscópicos associados às quantificações indicaram uma relação entre a quantidade de carga bacteriana e a presença de lesão microscópica; a maior carga bacteriana no tecido pulmonar está associada a maior alteração histopatológica para hiperplasia BALT. Em conclusão, os resultados obtidos sinalizam para a circulação do agente etiológico nos animais amostrados e a necessidade de medidas preventivas nas criações de suínos do estado do Maranhão com envolvimento dos produtores, órgãos de defesa sanitária e inspeção.
#70 - Evaluation of skin prick test, exclusion diet and dietary challenge in the diagnosis of food allergy in dogs with chronic pruritus
Abstract in English:
Allergic dogs are commonly sensitized to food allergens. We evaluated the use of the prick test to diagnose food allergies in dogs with pruritus and the efficacy of an exclusion diet based on the test. The prick test was performed in 10 healthy dogs and 34 dogs with pruritus, of which 25 received an exclusion diet for 60 days and was challenged with positive food on the test. pVAS and CADESI-4 were assessed on days 0, 30, and 60 after re-exposure. As a result, two control group dogs reacted to a single food allergen, milk and wheat. Of the 25 dogs with pruritus that reacted to food allergens, 24 (96%) reacted to more than one food allergen, and only one (4%) reacted to a single food protein: pork. In the test group (n=25), there was a significant improvement of pVAS and CADESI-4 after 30 and 60 days of dietary exclusion, with significant worsening of the scores with food allergen challenge. In conclusion, the prick test can be used for screening food allergens to make an exclusion diet.
Abstract in Portuguese:
Cães alérgicos são comumente sensibilizados a alérgenos alimentares. Nós avaliamos o uso do teste de puntura para o diagnóstico de alergias alimentares em cães com prurido e a eficácia de uma dieta de exclusão baseada no teste. O teste de puntura foi realizado em 10 cães saudáveis e em 34 cães com prurido, dos quais 25 receberam uma dieta de exclusão por 60 dias e depois desafiados com o alimento que foi positivo no teste. pVAS e CADESI-4 foram realizados nos dias 0, 30, 60 e depois da reexposição. Como resultados, dois cães do grupo controle reagiram a um único alérgeno alimentar, leite e trigo. Dos 25 cães com prurido que reagiram aos alérgenos alimentares, 24 (96%) reagiram a mais de um alérgeno alimentar e apenas um (4%) reagiu a uma única proteína, que foi porco. No grupo teste (n=25), houve uma significativa melhora do pVAS e CADESI-4 depois de 30 e 60 dias de dieta de exclusão, com significante piora dos scores com o desafio alimentar. Como conclusão, o teste de puntura pode ser usado para selecionar alérgenos alimentares para fazer uma dieta de exclusão.
