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#81 - HPLC-DAD-MS/MS chemical characterization and evaluation of poisoning by Vernonia rubricaulis in sheep and mice
Abstract in English:
Vernonia rubricaulis is a plant responsible for poisoning cattle living in areas subject to flooding in the Pantanal biome of Brazil. Because V. rubricaulis causes acute hepatic necrosis and clinical signs and lesions similar to other hepatotoxic plants, its action pathways are probably similar. However, the potentially toxic components of V. rubricaulis remain unknown. Our study aims to determine the chemical profiles of aqueous and ethanolic extracts of the leaves of V. rubricaulis in the budding stage, which is known to be toxic, and in the mature stage. Experimental trials using mice and sheep investigated the presence of toxic substances in the extracts. Three groups of mice received different doses of V. rubricaulis extract. Another four groups were carried out with sheep that received: (1) aqueous extract of immature leaves, (2) aqueous extract of mature leaves, (3) ethanolic extract of mature leaves, and (4) ethanolic extract of immature leaves. Intoxication was reproduced in sheep only with the aqueous extract of V. rubricaulis buds; ethanol was not a suitable solvent for extracting toxic compounds. This finding suggests that toxic components are not present in considerable amounts in the mature plant. Swiss mice proved not to be suitable experimental models for reproducing intoxication because none of the extracts was toxic to the animals, including the one that was toxic in sheep. The chemical profile of the extracts revealed the presence of sugars, flavonoids, sphingolipids, and chlorogenic acids. Chemical profiles determined by HPLC-DAD-MS of the aqueous and ethanolic extracts of the buds and mature leaves of V. rubricaulis did not reveal compounds with known toxic potential. We demonstrated that the aqueous extraction method of V. rubricaulis was efficient at extracting toxic components from the plant’s leaves in the budding stage.
Abstract in Portuguese:
Vernonia rubricaulis é uma planta responsável por causar surtos de intoxicação em bovinos que vivem em áreas sujeitas a alagamento no bioma Pantanal do Brasil. Por causar necrose hepática aguda e quadro anatomopatológico semelhante a outras plantas hepatotóxicas, como Xanthium spp., era suposto que seu princípio ativo fosse semelhante ao desta planta. No entanto, os potenciais componentes tóxicos permanecem desconhecidos. Este estudo buscou determinar o perfil químico dos extratos aquoso e etanólico das folhas de V. rubricaulis, na fase de brotação, sabidamente tóxica, e na fase adulta. Para investigar a presença das substâncias tóxicas nos extratos, estudos experimentais utilizando camundongos e ovinos foram realizados. Ensaios experimentais utilizando ratos e ovinos investigaram a presença de substâncias tóxicas nos extratos. Três grupos de camundongos receberam diferentes doses do extrato de V. rubricaulis. Outros quatro grupos foram formados com ovinos que receberam: (1) extrato aquoso de folhas imaturas, (2) extrato aquoso de folhas maduras, (3) extrato etanólico de folhas maduras, e (4) extrato etanólico de folhas imaturas. A intoxicação foi reproduzida em ovinos apenas com o extrato aquoso dos brotos de V. rubricaulis, revelando que o etanol não é um bom solvente extrator dos compostos tóxicos e corroborando com achados prévios que sugerem que estes componentes não estão presentes em quantidades tóxicas na planta adulta. Camundongos Swiss não foram classificados como modelos experimentais adequados para a reprodução da intoxicação, uma vez que nenhum dos extratos foi tóxico, nem mesmo aquele que foi tóxico para ovinos. O perfil químico dos extratos revelou a presença de compostos das classes dos açúcares, flavonoides, esfingolipídeos e ácidos clorogênicos. Assim, os perfis químicos determinados por HPLC-DAD-MS dos extratos aquoso e etanólico das folhas em fase de brotação e das folhas adultas, não revelaram compostos com potencial tóxico conhecido, indicando que outras estratégias de determinação do perfil químico ou outras técnicas de caracterização estrutural devem ser empregadas para tal finalidade. Entretanto, o estudo demonstrou que o método de extração aquosa de V. rubricaulis foi eficiente na extração dos componentes tóxicos das folhas em fase de brotação.
#82 - Analysis of cross-sectional studies of leptospirosis in donkeys: A systematic review and meta-analysis
Abstract in English:
Leptospirosis is a neglected zoonosis that infects donkeys and other animal species, with economic and public health concerns. Donkeys have an important role in the development of societies, the reduction of their effective population in recent years, and the little attention given to the diseases that affect them, reducing their productivity and performance. This study aimed to investigate the pooled prevalence of Leptospira spp. infection in donkeys worldwide through a systematic review and meta-analysis. Overall, 21 surveys met the eligibility criteria, with an overall combined prevalence of 34.90% (95% CI = 23.58% – 48.23%). Cochran’s Q test (p<0.01) was used to identify heterogeneity between studies, classified as high heterogeneity by the Higgins and Thompson test (I2 = 95.4%). Egger’s test did not identify the presence of publication bias (p=0.9892). This scenario suggests the need for standardization of epidemiological studies for leptospirosis in this species, such as the use of probabilistic sampling, collection of minimal information on the animals used, and the establishment of a cutoff point for the serological diagnostic test (microscopic agglutination test – MAT) and essential serogroups to be used in serology to determine reliable epidemiological indicators. In addition, there is a need for molecular studies and isolation of Leptospira spp. in donkeys for better elucidation of the disease epidemiology.
Abstract in Portuguese:
A leptospirose é uma zoonose negligenciada que infecta asininos e outras espécies animais, com preocupações econômicas e de saúde pública. Motivado pela importância dos asininos no desenvolvimento das sociedades, pela redução de sua população efetiva nos últimos anos e pela pouca atenção dada às doenças que os acometem, reduzindo sua produtividade e desempenho, este estudo teve como objetivo investigar a prevalência agrupada da infecção por Leptospira spp. em asininos em nível mundial através de uma revisão sistemática e meta-análise. No geral, 21 inquéritos preencheram os critérios de elegibilidade, com prevalência global combinada de 34,90% (IC 95% = 23,58% – 48,23%). O teste Q de Cochran (p<0,01) foi utilizado para identificar a heterogeneidade entre os estudos, classificada como alta pelo teste de Higgins e Thompson (I2 = 95,4%). O teste de Egger não identificou presença de viés de publicação (p=0,9892). Esse cenário sugere a necessidade de padronização dos estudos epidemiológicos para leptospirose nessa espécie, como a utilização de amostragem probabilística, coleta de informações mínimas sobre os animais utilizados, além do estabelecimento de um ponto de corte para o teste diagnóstico sorológico (teste de aglutinação microscópica – SAM) e sorogrupos essenciais a serem utilizados em sorologia para determinar indicadores epidemiológicos confiáveis. Além disso, há necessidade de estudos moleculares e isolamento de Leptospira spp. em asininos para melhor elucidação da epidemiologia da doença.
#83 - AST/ALT ratio: A new approach over old biochemistry tools
Abstract in English:
This study aimed to evaluate the aspartate transaminase/alanine transaminase (AST/ALT) ratio in healthy dogs and dogs with hepatic and extrahepatic diseases. Twelve different groups of animals were considered in the study: Control, patients with Acute hepatopathy, and Chronic hepatopathy and patients with extrahepatic diseases such as Pyometra, Fractures/trauma, Intoxication/poisoning, Leishmaniosis, Hemoparasitosis, Oncologic, Gastrointestinal, Skin problems and Nephropathy. A retrospective study was made with 509 exams. Hematological and serum biochemical results correlated to the ratio at time zero (M0) and 48 hours (M48) after the first care, allowing for the prediction of the outcome. Animals with Acute hepatopathy showed AST/ALT ratios 84% above the upper limit of the ranges obtained from Control animals. Animals with Chronic hepatopathy showed higher averages than acute. Animals from Pyometra, Fractures/trauma, and Intoxication/poisoning groups showed higher averages of the AST/ALT ratio (2.67, 2.54, 2.21) than those from other groups. The correlation between the AST/ALT ratio in serial assessments showed that when animals double the value of the ratio in 48 hours, they tend to have a 2.5 greater probability of dying.
Abstract in Portuguese:
Este estudo objetivou avaliar a razão AST/ALT em cães saudáveis e cães apresentando doenças hepáticas e extra-hepáticas. Doze grupos diferentes de animais foram considerados no estudo, como um grupo Controle, pacientes com Hepatopatia aguda e Hepatopatia crônica, e grupos com doenças extra-hepáticas como Piometra, Fraturas/trauma, Intoxicação/envenenamento, Leishmaniose, Hemoparasitose, Oncológico, Gastrointestinal, Afecções de pele e Neuropatia. Um estudo retrospectivo foi realizado utilizando 509 exames. Exames hematológicos e bioquímicos foram correlacionados com a razão no tempo zero (M0) e 48 horas (M48) depois do primeiro atendimento, permitindo predizer a consequência. Animais com Hepatopatias agudas apresentaram razão AST/ALT 84% acima do limite inferior das médias observadas nos animais do grupo Controle. Animais com Hepatopatias crônicas apresentaram médias maiores do que Hepatopatias agudas. Animais presentes nos grupos Piometra, Fraturas/trauma e Intoxicação/envenenamento apresentaram as maiores médias da razão AST/ALT (2,67; 2,54; 2,21) quando comparado aos outros grupos. A correlação entre a razão AST/ALT em avaliações seriadas mostraram que, quando o valor da razão dobra em 48 horas, aumenta em 2,5 vezes a probabilidade de morte.
#84 - Straightforward identification of structures of the striatum in bovine and equine forebrains: Guidance to trimming
Abstract in English:
Standardizing trimming the brain for histological diagnosis of neurological diseases is challenging for veterinary pathologists. The striatum is a set of subcortical nuclei of the forebrain, formed by bundles of nerve fibers and gray matter, which consist of the internal and external capsules, caudate, lentiform, and claustrum nuclei. The striatum is related to motricity, which refers to the neural circuits of the extrapyramidal pathways. In domestic animals, the extrapyramidal pathways are of great importance in gait. From the ventral surface of the brain, they are located deep in a strip of the telencephalon corresponding to the olfactory trigone. Bovine and equine brains were routinely formalin-fixed, weighed and measured. Herein, we report a guide for bovine and equine brains’ neuroanatomic trimming and striatum histomorphology. Trimming was performed, and the sections were routinely processed for histology. We used the cross-section rostral to the optic chiasm as the site of choice for histologic sampling to identify the striatum structures. The forebrains were sectioned, and the standard histologic cassette was positioned horizontally or vertically to frame a greater diversity of structures. The histologic slides were labeled with structures of the striatum (caudate nucleus, internal capsule, lentiform nucleus, external capsule and claustrum). Regarding the brain size, handing the cassette orientation over to the forebrain allows the verification to shift the position or collect a second striatum sample for histology.
Abstract in Portuguese:
Padronizar a clivagem do encéfalo para diagnóstico histológico de doenças neurológicas é um desafio para os patologistas veterinários. O corpo estriado é um conjunto de núcleos subcorticais do prosencéfalo, formado por feixes de fibras nervosas e substância cinzenta, que consistem nas cápsulas interna e externa, núcleos caudado, lentiforme e claustro. O corpo estriado está relacionado à motricidade, que se refere aos circuitos neurais das vias extrapiramidais. Nos animais domésticos, as vias extrapiramidais são de grande importância na marcha. Da superfície ventral do cérebro, eles estão localizados profundamente em uma faixa do telencéfalo correspondente ao trígono olfatório. Encéfalos de bovinos e equinos foram rotineiramente fixados em formalina, pesados e medidos. Neste trabalho, relatamos um guia para a clivagem neuroanatômica e histomorfológica do corpo estriado dos cérebros de bovinos e equinos. A clivagem foi realizada e as seções foram processadas rotineiramente para histologia. Utilizamos o corte rostral e tangente ao quiasma óptico como local de escolha para amostragem histológica para identificar as estruturas do corpo estriado. Os prosencéfalos foram seccionados e o cassete histológico padrão foi posicionado horizontal ou verticalmente para enquadrar uma maior diversidade de estruturas. As estruturas do corpo estriado foram identificadas nas lâminas histológicas (núcleo caudado, cápsula interna, núcleo lentiforme, cápsula externa e claustro). Conforme o tamanho do encéfalo, o manuseio do cassete sobre o prosencéfalo permite orientar a necessidade de alterar a posição ou a coleta de uma segunda amostra do corpo estriado para histologia.
#85 - Avibacterium paragallinarum and Gallibacterium spp. coinfection in laying hens with sinusitis and rhinitis
Abstract in English:
Respiratory diseases are responsible for economic losses in the poultry sector. The occurrence of coinfections can aggravate the severity of clinical signs and lesions, such as coinfection with Avibacterium paragallinarum and Gallibacterium spp. The aim of this study is to describe the epidemiological, clinical and pathological aspects of an outbreak of respiratory disease in laying hens caused by a coinfection by A. paragallinarum and Gallibacterium spp. in the state of Sergipe, northeastern Brazil. High morbidity and mortality were observed, accompanied by apathy, anorexia, serous nasal discharge and a decrease in egg production (approximately 10%). Five laying hens were selected for general clinical examination and euthanized. Samples of nasal turbinates, infraorbital sinuses, trachea, liver and spleen were collected, fixed in 10% buffered formalin and routinely processed for histopathology. For the microbiological examination, the whole heads of the birds were collected, packed in Nasco® plastic bags, stored at -8°C then sent to a private laboratory for bacterial isolation on Petri dishes containing blood agar and incubated at 37°C in microaerophilic. Grossly, there was a bilateral increase of periorbital volume with complete obstruction of nasal turbinates due to the presence of caseous exudate. Microscopically, there was marked diffuse chronic necrocaseous and granulomatous rhinitis, marked diffuse chronic granulomatous and heterophilic necrotizing sinusitis, focally extense lymphohistiocytic and heterophilic tracheitis with epithelial hyperplasia, loss of cilia and atrophy of mucous glands. In the microbiological examination, A. paragallinarum and Gallibacterium spp. were identified, and it was concluded that these agents were responsible for the outbreak of rhinitis and sinusitis in the studied birds.
Abstract in Portuguese:
As doenças respiratórias são responsáveis por perdas econômicas no setor avícola. A ocorrência de coinfecções pode agravar a severidade dos sinais clínicos e das lesões, tais como a coinfecção por Avibacterium paragallinarum e Gallibacterium spp. Objetivou-se descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de um surto de doença respiratória em galinhas poedeiras causado por coinfecção de A. paragallinarum e Gallibacterium no estado de Sergipe, Nordeste do Brasil. Foram observadas elevada morbidade e mortalidade, acompanhada de apatia, anorexia, secreção nasal serosa e diminuição da produção de ovos (aproximadamente 10%). Cinco galinhas de postura foram selecionadas para exame clínico e eutanásia. Amostras de cornetos nasais, seios infraorbitários, traqueia, fígado e baço foram coletadas, fixados em solução de formalina 10% tamponada e processadas pelo protocolo de histopatologia de rotina. Para o exame microbiológico, foram coletadas as cabeças inteiras das aves, acondicionadas em sacos Nasco®, conservadas a -8°C e em seguida enviados para laboratório particular para isolamento bacteriano, em placas de Petri contendo ágar sangue e incubadas a 37°C em microaerofilia. Macroscopicamente, observou-se um aumento de volume periorbital bilateral com completa obstrução dos cornetos nasais devido a presença de exsudato caseoso. Microscopicamente observou-se rinite necrocaseosa e granulomatosa crônica difusa acentuada, sinusite necrotizante granulomatosa e heterofílica crônica difusa acentuada, traqueíte linfohistiocitária e heterofílica focalmente extensa com hiperplasia epitelial, perda de cílios e atrofia de glândulas mucosas. No exame microbiológico identificou-se A. paragallinarum e Gallibacterium spp. concluindo que esses agentes foram responsáveis pelo surto de rinite e sinusite nas aves estudadas.
#86 - Acute spontaneous and experimental poisoning by Solanum pseudoquina in cattle
Abstract in English:
The epidemiology, toxic potential, and clinical and pathological presentation of acute spontaneous and experimental poisoning by Solanum pseudoquina are described. In the spontaneous form, the plant was ingested by cattle on two properties, one in the municipality of Canoinhas and the other in Painel, Santa Catarina. The outbreak in Canoinhas occurred after some trees were felled, five cattle ingested leaves of the plant and showed staring eyes and muscle tremors; four died, and one recovered. On the Painel property, the outbreak occurred after the pruning of two trees, and two adult cattle ingested the plant and died. The information was provided by the owners, and only one bovine was subjected to autopsy in each outbreak. No lesions were evident at autopsy, and no material was collected for histological evaluation. In the experimental form, green leaves of S. pseudoquina were collected in the municipalities of Canoinhas, Painel and Urubici, in Santa Catarina. The leaves were administered orally to four cattle. Two cattle received a single dose of 40g/kg, one received two doses of 35g/kg, and another received six doses of 20g/kg. One of the animals that received the 40g/kg dose died without showing any clinical signs. The other animals showed apathy, muscle tremors, ataxia, motor incoordination, and difficulty getting up. At necropsy, cardiac alterations were observed in the cattle that received repeated doses of 20g/kg, namely hydropericardium and ventricular dilation, and liver congestion was observed in all the cattle. Microscopic examination showed mononuclear infiltrates in the heart samples of the four cattle (stained with hematoxylin and eosin – HE), which were mild, perivascular and between fiber bundles. Cardiomyocytes had multifocal cytoplasmic hypereosinophilia and pyknotic nuclei. The livers of all four cattle showed moderate congestion between the sinusoids. The anti-troponin immunohistochemistry (IHC) technique was performed on three heart samples and showed cardiomyocytes with decreased troponin C expression in the areas that corresponded to cardiomyocyte hypereosinophilia of varying intensity. S. pseudoquina has been shown to be potentially toxic to cattle when doses of more than 20g/kg are ingested.
Abstract in Portuguese:
Descrevem-se a epidemiologia, potencial tóxico, quadro clínico e patológico da intoxicação espontânea e experimental aguda por Solanum pseudoquina. Na forma espontânea a planta foi ingerida por bovinos em duas propriedades, uma situada no município de Canoinhas e outra em Painel, Santa Catarina. O surto de Canoinhas ocorreu após a derrubada de exemplares da árvore e, cinco bovinos que ingeriram folhas da planta manifestaram olhar atento, tremores musculares; destes, quatro morreram e um se recuperou. Na propriedade de Painel o surto ocorreu após a poda de duas árvores, no qual dois bovinos adultos ingeriram a planta e foram encontrados mortos. As informações foram fornecidas pelos proprietários e apenas um bovino foi necropsiado em cada surto, não foram evidenciadas lesões na necropsia e não foi coletado material para avaliação histológica. Para reprodução experimental, folhas verdes de S. pseudoquina foram coletadas nos munícipios de Canoinhas, Painel e Urubici, localizados em Santa Catarina. As folhas foram administradas por via oral para quatro bovinos. Dois bovinos receberam dose única de 40g/kg, um recebeu duas doses de 35g/kg e outro recebeu seis doses de 20g/kg. Um bovino que recebeu 40g/kg morreu sem serem observados sinais clínicos. Os demais apresentaram apatia, tremores musculares, ataxia, incoordenação motora e, dificuldade para levantar. Na necropsia, foram observadas alterações cardíacas, caracterizadas por hidropericárdio e dilatação ventricular no bovino que recebeu doses repetidas de 20g/kg e em todos os bovinos foi observada congestão hepática. O exame microscópico revelou nas amostras cardíacas dos quatro bovinos que foram coradas com hematoxilina e eosina (HE), infiltrado mononuclear, leve, perivascular e por entre feixes das fibras. Cardiomiócitos com hipereosinofilia citoplasmática, multifocal e núcleos picnóticos. No fígado dos quatro bovinos havia congestão, moderada entre os sinusóides. A técnica de imunhistoquímica (IHQ) anti-troponina foi realizada em três amostras cardíacas, as quais apresentaram cardiomiócitos com diminuição da expressão da troponina C nas áreas que corresponderam com hipereosinofilia de cardiomiócitos de diferentes intensidades. S. pseudoquina demonstrou potencial de tóxico para bovinos quando ingeridas doses superiores a 20g/kg.
#87 - Evaluation of erythrocyte dysmorphism in dog urine
Abstract in English:
Glomerulopathy is an important cause of kidney disease in dogs. Diagnosis is based on anamnesis, clinical examination, and complementary tests and can be complex and costly depending on the stage of the disease. Morphological evaluation of erythrocytes observed during urinalysis is frequently conducted for humans, which may help identify kidney damage in animals with kidney disease – individuals with glomerular disease present with erythrocyte dysmorphism, particularly the presence of erythrocytes recognized as acanthocytes. Animal studies are limited, and their results are often contradictory. Thus, the objective of this study was to identify the different populations of isomorphic and dysmorphic red blood cells (RBCs) present in the urine of dogs and to compare the bright-field and phase-contrast optical microscopy techniques in identifying morphological changes in RBCs during urinalysis. A total of 40 samples were selected from dogs with microscopic or macroscopic hematuria from routine care at Federal Rural University of Pernambuco Veterinary Hospital and were sent to the hospital’s Veterinary Clinical Pathology Laboratory. Physical, chemical, and sediment examinations were conducted. Subsequently, RBCs were evaluated and differentiated using bright-field and phase-contrast microscopy. In dog urine samples, it was possible to identify all populations considered isomorphic and dysmorphic that are described in humans. Among those considered isomorphic, normal RBCs, annulocytes, and echinocytes were observed, whereas stomatocytes, acanthocytes, codocytes, ghost cells, knizocytes and cells with no defined names (other) were found among the dysmorphic forms. No significant difference was observed between the two microscopic techniques used to differentiate and classify erythrocytes. Therefore, it is possible to identify and differentiate the morphological alterations found in RBCs in dogs’ urine. Compared with a phase-contrast microscope, a conventional optical microscope can be used without any detrimental effects, thereby facilitating the use of this technique in the laboratory routine, as it is cost-effective. Further studies should be conducted to evaluate the sensitivity and specificity of the identification of erythrocyte dysmorphism as an early marker of glomerular lesions.
Abstract in Portuguese:
As glomerulopatias são importantes causas de afecções renais em cães. Seu diagnóstico é baseado na anamnese, exame clínico e exames complementares e pode se tornar complexo e oneroso dependendo da fase da doença. Uma avaliação frequentemente utilizada na medicina humana e que pode auxiliar na localização da lesão renal em animais com doença renal é a avaliação morfológica dos eritrócitos observados na urinálise. Indivíduos com doença glomerular apresentam dismorfismo eritrocitário, especialmente com a presença de eritrócitos reconhecidos como acantócitos. Estudos em animais são escassos e seus resultados muitas vezes são contraditórios. Dessa forma, objetivou-se identificar as diferentes populações de hemácias isomórficas e dismórficas presentes na urina de cães e comparar as técnicas de microscopia óptica de campo claro e de contraste de fase na identificação de alterações morfológicas em hemácias durante a realização da urinálise. Foram selecionadas quarenta amostras de urina de cães com hematúria microscópica ou macroscópica, oriundas da rotina de atendimento do Hospital Veterinário da UFRPE e enviadas ao Laboratório de Patologia Clínica Veterinária desta instituição. As amostras passaram por exame físico, químico e do sedimento, sendo posteriormente as hemácias avaliadas e diferenciadas utilizando-se os métodos de microscopia de campo claro e de contraste de fase. Nas amostras de urina de cães, foi possível identificar todas as populações consideradas isomórficas e dismórficas já descritas em humanos. Dentre as consideradas isomórficas foram observadas hemácias normais, anulócitos e equinócitos e dentre as formas dismórficas foram encontradas estomatócitos, acantócitos, codócitos, células fantasmas, nizócitos e células ainda sem nomenclatura definida (outros). Não foi observada diferença significativa entre as duas técnicas microscópicas empregadas na diferenciação e classificação dos eritrócitos. Conclui-se que é possível identificar e diferenciar as alterações morfológicas encontradas nas hemácias de urinas de cães e que o uso de microscópio óptico tradicional convencional, quando comparado ao microscópio de contraste de fase, pode ser empregado sem grande prejuízo para o exame, facilitando a utilização dessa técnica na rotina laboratorial por ser um equipamento mais acessível. Outros estudos devem ser realizados para avaliar a sensibilidade e especificidade do uso da identificação do dismorfismo eritrocitário como um marcador precoce de lesões glomerulares.
#88 - ‘Beer yeast’ (liquid brewery waste) for sheep and pig feeding: epidemiological and clinical aspects of the poisoning, safety margin and prevention
Abstract in English:
Considering the practice of using ‘brewer’s yeast’ (BY) – liquid brewery yeast waste from the brewing industry – in animal feed in some establishments in the south of the State of Rio de Janeiro in Brazil, this study was conducted to establish safety margins and to determine epidemiological and clinical aspects. In addition, this study suggested prophylactic measures that can prevent or minimise alcohol intoxication due to BY in sheep and swine. The main characteristics of the clinical features in both natural poisoning and controlled spontaneous ingestion in swine as well as intoxication by controlled ingestion of BY using a ruminal probe in sheep were found to be staggering gait, tripping and falls. Overall, 3.8 and 8.875mL/kg of ethanol content in the BY caused mild-moderate and severe clinical conditions, respectively, in swine and sheep. The following prophylactic measures are suggested: 1. BY must be adequately diluted in water, whey, or with BY that has been previously stored in the property (old BY); 2. It must be administered in proportion to the animals’ weight and size. 3. It must be administered continuously, without interruptions, and with the provision of other food in the trough (such as soybean meal or cornmeal and water ad libitum). In conclusion, although BY is increasingly used in sheep and swine breeding properties – in the south of the State of Rio de Janeiro – many owners use one or more of the suggested prophylactic measures. Hence, ethanol intoxications because of BY are infrequent and rarely cause deaths; therefore, BY can be used provided adequate prophylactic measures are followed.
Abstract in Portuguese:
Considerando-se à prática de utilizar “levedo de cerveja” (LC) – resíduo líquido da indústria cervejeira – na alimentação de animais, em alguns estabelecimentos no sul do Estado do Rio de Janeiro, esse estudo foi realizado para estabelecer as margens de segurança e os quadros epidemiológico e clínico, bem como sugerir medidas profiláticas que impeçam ou minimizem esse tipo de intoxicação alcoólica para ovinos e suínos. Verificou-se que o quadro clínico na intoxicação por ingestão controlada de LC por sonda em ovinos e na intoxicação natural e ingestão espontânea controlada em suínos, caracterizou-se principalmente por andar cambaleante, tropeços e quedas. Concentrações de 3,8 e 8,875mL/kg de etanol contido no LC, causaram quadros clínicos leve a moderado e grave em suínos e ovinos, respectivamente. Como medidas profiláticas sugere-se: diluição adequada do LC com água, soro de leite ou com o LC já estocado na propriedade (LC antigo); administração do LC proporcional ao peso/tamanho dos animais, administração contínua, sem interrupções, disponibilizar outro alimento no cocho, como farelo de soja ou fubá de milho e água à vontade. Conclui-se que apesar de o LC ser cada vez mais utilizado nas propriedades criadoras de ovinos e suínos no sul do Estado do Rio de Janeiro já que, muitos proprietários aplicam uma ou mais medidas profiláticas aqui sugeridas, as intoxicações pelo etanol, contido no LC são pouco frequentes e raramente ocorrem mortes, de forma que esse produto deve ser utilizado, desde que as medidas profiláticas sejam observadas.
#89 - Clinical, histopathological, and hematological changes due to isoimmune thrombocytopenic purpura in piglets
Abstract in English:
Isoimmune thrombocytopenic purpura (ITP) is an immune-mediated disease that causes severe hemorrhagic lesions and high mortality in piglets. The disease can occur early in newborn piglets (EITP) or late in 2- to 3-week old piglets (LITP). In this study, we analysed the clinical, pathological, and hematological aspects of 391 ITP cases (312 with EITP and 79 with LITP). In LIPT cases, morbidity and mortality rates were higher, with rates of 60% (morbidity) and 53% (mortality). The main clinicopathological findings in ITP cases were different patterns of hemorrhages organs and tissues. In EITP, clinical signs were characterized by extensive subcutaneous hemorrhages and death occurred within a few days; however, in LITP, often sudden death occurred. In macroscopic analysis, hemorrhagic diathesis was observed in all affected animals. In EITP, the most severe hemorrhagic lesions were integumentary, mainly in the dermis and epidermis. In LITP, visceral lesions were predominant, mainly in the epicardium and intestines. Microscopic bone marrow analysis revealed mild cellular hyperplasia in EITP and bone marrow aplasia in LITP. hematological analyses revealed leucopenia, thrombocytopenia, and anemia in all ITP-affected animals. However, fostering by a different sow was only efficient in controlling EITP and had little effect in LITP-symptomatic piglets, due to more severe lesions. Further studies on the etiopathogenesis of LITP are required to improve our understanding of this disease form.
Abstract in Portuguese:
Púrpura trombocitopênica isoimune (PTI) é uma doença imunomediada que causa lesões hemorrágicas graves e alta mortalidade em leitões, que pode se apresentar através de uma forma precoce em leitões neonatos (PTIP) ou uma forma tardia em leitões com duas a três semanas de idade (PTIT). Neste trabalho analisamos aspectos clínicos, hematológicos e histopatológicos de 391 casos de PTI, sendo 312 de PTIP e 79 de PTIT. Observou-se maiores morbidade (60%) e mortalidade (53%) na PTIT. Os principais achados clínico-patológicos observado na PTI são hemorragias em diferentes graus de intensidade e nos diferentes órgãos e tecidos. Na PTIP observou-se predominantemente hemorragias subcutâneas extensas e morte em alguns dias, já na PTIT, observou-se além de grave hemorragia, morte súbita. Na análise macroscópica, observou-se diátese hemorrágica em todos os animais afetados. Na PTIP as lesões hemorrágicas mais graves foram tegumentares, principalmente em derme e epiderme, enquanto, na forma tardia, observou-se lesões predominantemente viscerais, em epicárdico e intestino. A análise microscópica de medula óssea revelou discreta hiperplasia celular na forma PTIP, enquanto, na PTIT observou-se aplasia medular. Na análise hematológica observou-se leucopenia, trombocitopenia e anemia em todos os animais com PTI. Os achados clínicos, histopatológicos e hematológicos para PTIP e PTIT da doença permitiram o diagnóstico de PTI. Entretanto, a troca de mãe se mostrou eficiente apenas para controle PTIP, uma vez que, esta estratégia apresenta pouco resultado para leitões sintomáticos com a PTIT, devido lesões mais severas. Estudos sobre a etiopatogênese da PTIT ainda são necessários para melhor entendimento desta forma da doença.
#90 - Viability of Toxoplasma gondii in cattle semen cryopreserved with different concentrations of cryoprotectant
Abstract in English:
Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.
Abstract in Portuguese:
Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.
