PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Molina L.R., Costa H.N., Leão J.M., Malacco V.M.R., Facury Filho E.J., Carvalho A.U. & Lage C.F.A. 2017. Efficacy of an internal teat seal associated with a dry cow intramammary antibiotic for prevention of intramammary infections in dairy cows during the dry and early lactation periods. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(5):465-470. Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Campus Pampulha, Belo Horizonte, MG 31270-901, Brazil. E-mail: lmolina@vet.ufmg.br The present study aimed to evaluate the use of an internal dry period teat seal containing bismuth subnitrate (Teatseal®, Zoetis®, Florham Park, Nova Jersey, USA) associated with a long-acting cloxacilin preparation (Orbenin® Extra dry cow, Zoetis®, Florham Park, Nova Jersey, USA), in preventing new infections during the dry-off and early postpartum period. A total of 150 Holstein cows (average production of 9,000 kg of milk per lactation), with four functional udder quarters without clinical mastitis was included in the study. All animals were dried-off 60 days before the expected calving date. Two teats positioned diagonal-contralaterally received only dry cow antibiotic, control group C (n=300) and the other two teats, treatment group T (n=300) received dry cow antibiotic and infusion with an internal teat seal. Data from SCC variable were transformed by log base-10 transformation. Duncan’s test was used accepting 5% as the level of statistical significance. The occurrence of intramammary infection (IMI) and chronicity rate, and frequency of microorganisms isolated at drying and immediately postpartum in teats of group C and group T were evaluated using a non-parametric Chi-square Test, accepting 10% as the statistical significance level. There was a decrease in the occurrence of new infections in the early postpartum in cows which the sealant was used (C=19.6%, T=11.4%). In the postpartum period, Gram-negative bacteria were isolated from 16 teats in C and seven in T. The greatest reduction was observed for Escherichia coli (8 vs 1) in group T. There was no effect using the internal sealant on the frequency of isolation of environmental Streptococus. The use of sealant reduced the prevalence of subclinical mastitis cows between drying-off and the early postpartum period (C=51% versus T=42%) and resulted in a lower somatic cell count (SCC) in the treatment group when compared with the control group (T=1,073x103, C=1,793x103). The use of the internal teat seal combined with dry cow antibiotic is effective in the prevention of IMI during the dry period and early lactation and results in the reduction of SCC in immediate postpartum period. The treatment is effective in reducing infection between dry-off and the immediate postpartum caused by major and minor pathogens. However, no effect on infections caused by contagious pathogens was observed.

• Teat seal antibiotic lactation periods mastitis dry cow selante de tetos antibiótico vaca seca período seco lactação matite

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Molina L.R., Costa H.N., Leão J.M., Malacco V.M.R., Facury Filho E.J., Carvalho A.U. & Lage C.F.A. 2017. Efficacy of an internal teat seal associated with a dry cow intramammary antibiotic for prevention of intramammary infections in dairy cows during the dry and early lactation periods. [Eficácia de um selante interno de tetos associado a antibiótico de vaca seca na prevenção de infecções intramamárias no período seco e início de lactação em vacas leiteiras.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(5):465-470. Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Cx. Postal 567, Campus Pampulha, Belo Horizonte, MG 31270-901, Brazil. E-mail: lmolina@vet.ufmg.br Objetivou-se avaliar o uso de um selante interno de tetos contendo subnitrato de bismuto (Teatseal®, Zoetis®, Florham Park, Nova Jersey, EUA) associado a um antibiótico de longa ação contendo cloxacilina (Orbenin® Extra dry cow, Zoetis®, Florham Park, Nova Jersey, EUA) em prevenir novas infecções durante o período seco e pós-parto imediato. Foram utilizadas 150 vacas Holandesas (produção média de 9,000 kg de leite por lactação), com os quatro quartos mamários funcionais e sem mastite clínica, que foram secas 60 dias antes da data prevista para o parto. O teto constituiu a unidade experimental. O grupo controle (C) foi representado por dois tetos diagonais-contralaterais (n=300), que receberam somente o antibiótico de vaca seca. Os outros dois tetos (n=300) constituíam o grupo tratado (T) e recebiam o antibiótico de vaca seca associado ao selante interno. Dados da variável contagem de células somáticas (CCS) passaram por transformação logarítmica na base 10 e foram submetidos ao teste de Duncan, aceitando-se nível de 5% de significância estatística. A ocorrência de infecções intramamárias (IIM), taxa de cronicidade e frequência de microrganismos isolados na secagem e imediatamente pós-parto nos tetos do grupo controle e tratados com selante interno foram avaliados utilizando o teste não paramétrico qui-quadrado, aceitando 10% de nível de significância. Houve redução na ocorrência de novas infecções no pós-parto imediato nos animais em que se utilizou o selante (C=19,6%, T=11,4%). No período pós-parto, foram isolados microrganismos Gram-negativo de 16 tetos no C e sete no T. A maior redução ocorreu para Escherichia coli, (8 versus 1) no grupo T. Não houve efeito da utilização do selante interno na frequência de isolamento de Streptococcus ambientais. O uso do selante reduziu a prevalência de mastite subclínica das vacas no pós-parto imediato (C=51% versus T=42%) e resultou em menor CCS no grupo tratado (T = 1.073 x 103) quando comparado com o grupo controle (C=1.793x103). O uso do selante interno combinado com antibiótico de vacas secas é eficaz na prevenção de infecções intramamárias no período seco e início de lactação e resulta na redução da CCS no período pós-parto imediato. O tratamento é eficaz na redução de infecção entre a secagem e o pós-parto imediato causada por patógenos maiores e menores. Entretanto, não tem efeito sobre infecções causadas por patógenos contagiosos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Albinati A.C.L., Soares P.C., Albinati R.C.B., Moreira E.L.T., Lira A.D. & Carvalho J.V. 2017. [Toxicity of Thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri).] Toxicidade do inseticida Tiametoxam para o Pacamã (Lophisiolurus alexandri). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):307-312. Colegiado de Medicina Veterinária, Universidade do Vale do São Francisco, Rodovia BR-407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: catarina.albinati@gmail.com This research evaluated acute and chronic toxicity of a thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri), assessing the LC50 and liver histopathological changes in animals exposed for 96 hours and 15 days. Therefore, were used 120 fingerlings subjected to five different concentrations (30, 60, 120, 240 and 480mg/L) for 15 days with two sampling times, 96 hours and 15 days. There was no significant mortality during the experimental period, however the animals showed changes as vacuolation, congestion and necrosis. The LC50 was determined as greater than 100mg/L, considered practically non-toxic. Necrosis was the more significant change in exposed animals, with increasing occurrence in chronic toxicity test.

• Toxicity thiamethoxam insecticide pacamã Lophisiolurus alexandri fish toxicidade tiametoxam inseticida pacamã peixe

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Albinati A.C.L., Soares P.C., Albinati R.C.B., Moreira E.L.T., Lira A.D. & Carvalho J.V. 2017. [Toxicity of Thiamethoxam insecticide for Pacamã (Lophisiolurus alexandri).] Toxicidade do inseticida Tiametoxam para o Pacamã (Lophisiolurus alexandri). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):307-312. Colegiado de Medicina Veterinária, Universidade do Vale do São Francisco, Rodovia BR-407 Km 12, Lote 543, Projeto de Irrigação Senador Nilo Coelho s/n, C1, Petrolina, PE 56300-990, Brazil. E-mail: catarina.albinati@gmail.com Este estudo avaliou a toxicidade aguda e crônica de um inseticida a base de tiametoxam para peixes da espécie Pacamã (Lophisiolurus alexandri), avaliando a CL50%, além de alterações histopatológicas hepáticas em animais expostos por 96 horas e 15 dias ao inseticida. Para tanto foram utilizados 120 alevinos submetidos a cinco diferentes concentrações do inseticida (30, 60, 120, 240 e 480mg/L) por 15 dias, com dois tempos amostrais, 96 horas e 15 dias. Não houve mortalidade significativa durante todo o período experimental, no entanto os animais apresentaram alterações como vacuolização citoplasmática, congestão e necrose. A CL50% foi determinada como superior a 100mg/L, considerada praticamente não tóxico. A necrose foi a alteração melhor evidenciada nos animais expostos, com o aumento da ocorrência nos animais do teste de toxicidade crônica.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Carvalho A.P.M., Carvalho E.C.Q., De Nardi A.B. & Silveira L.S. 2017. [Comparison of two histopathological classifications with pattern of immunostaining KIT, evaluation of cell proliferation and the presence of mutations in c-KIT canine cutaneous mast cell tumors.] Comparação de duas classificações histopatológicas com o padrão de imuno-marcação para KIT, a avaliação da proliferação celular e com a presença de mutações no c-KIT de mastocitomas cutâneos caninos. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):359-367. Laboratório de Morfologia e Patologia Animal, Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes, RJ 28013-602, Brazil. E-mail: annapmcarvalho@gmail.com Histopathological classification is the method of choice to predict the biological behavior of mast cell tumor. Currently, the methods of Patnaik and Kiupel are used to divide them into degrees of malignancy. The objective of this study was to compare the two histological grades with clinical, immunohistochemical markers and the presence of mutations to evaluate the characteristics that are more related to each other and with the worst prognosis. Sixty-one dogs were evaluated, taking into account sex, race, age, tumor location, tumor grade by grades Patnaik and Kiupel, infiltration of eosinophils, pattern KIT, Ki-67 and the presence of mutation . The variables were correlated using the chi-square test, Fisher’s exact test, verisimilitude test and relative risk test. The older dogas were the most affected, while animals mixed breed, Boxer breeds, Labrador and Pinscher were those with greater predisposition to tumor development. The tumor location and age are associated with tumor grade. The tumors in the head, neck and genital area are 10 times more likely to be classified as high-grade (RR=10,667; 95% CI 1.909 to 59.615, p=0.004) grau and old-aged eight times more likely (RR=8.00, 95% CI 0.955 to 67.009, p=0.029). The grade II tumors and the low degree were the most frequent and the two histological scores showed very significant correlation (p<0.001). The concentration of eosinophilic infiltration showed no significant correlation with any of the histological scores. The standard KIT was dependent on tumor location (p=0.015), genital tumors, head and neck had 18 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR=18.571, 95% CI 1.954 to 176.490, p=0.003), and Patnaik (p=0.001) and Kiupel (p<0.001) ratings. The high grade tumors are 36 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR 36.00, 95% CI 4.35-297.948 p<0.001). The marking of the Ki-67 showed a dependence on the location (p=0.024). The presence of mutation in exon 11 of the juxtamembrane domain showed no association with any of the clinical variables of the histological scores, the concentration of eosinophils and KIT standard. The presence of the mutation was significantly correlated only to the Ki-67 (p=0, 010). The results suggest that the location is the clinical variable most related to prognosis and that only Kiupel classification associated with immunohistochemistry are efficient to assess tumor behavior.

• Mast cell tumors immunohistochemistry mutation mastocitomas cutâneos caninos imuno-histoquímica mutação

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Carvalho A.P.M., Carvalho E.C.Q., De Nardi A.B. & Silveira L.S. 2017. [Comparison of two histopathological classifications with pattern of immunostaining KIT, evaluation of cell proliferation and the presence of mutations in c-KIT canine cutaneous mast cell tumors.] Comparação de duas classificações histopatológicas com o padrão de imuno-marcação para KIT, a avaliação da proliferação celular e com a presença de mutações no c-KIT de mastocitomas cutâneos caninos. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):359-367. Laboratório de Morfologia e Patologia Animal, Centro de Ciências e Tecnologias Agropecuárias, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes, RJ 28013-602, Brazil. E-mail: annapmcarvalho@gmail.com A graduação histopatológica é o método de eleição para prever o comportamento biológico do mastocitoma e, atualmente, são utilizados os métodos de Patnaik e de Kiupel para dividi-los em graus de malignidade. O objetivo do presente trabalho foi comparar as duas classificações histológicas com as variáveis clínicas, os marcadores imuno-histoquímicos e com a presença de mutações para verificar as características que estão mais relacionadas entre si e com os piores prognósticos. Foram avaliados 61 animais, levando em consideração o sexo, a raça, a idade, a localização tumoral, o grau tumoral pelas classificações de Patnaik e Kiupel, a infiltração de eosinófilos, a marcação do KIT e do Ki-67 e a presença de mutação. As variáveis foram correlacionadas utilizando os testes de qui-quadrado, teste de Fisher, teste de verossimilhança e o teste de risco relativo. Os animais idosos foram os mais acometidos, enquanto os animais sem raça definida e os das raças Boxer, Labrador e Pinscher foram aqueles com maior predisposição ao desenvolvimento tumoral. A localização e a idade estão associadas ao grau tumoral. Os tumores em cabeça, pescoço e região genital têm 10 vezes mais chance de serem classificados como de alto grau (RR=10,667; IC95% 1,909-59,615, p=0,004) e os idosos oito vezes mais chance (RR=8,00; IC95% 0,955-67,009; p=0,029). Os tumores de grau II e os de baixo grau foram os mais encontrados e as duas classificações histológicas demonstram correlação muito significativa entre si (p<0,001). A concentração do infiltrado eosinofílico não demonstrou correlação significativa com nenhuma das classificações histológicas. O padrão KIT foi dependente da localização tumoral (p=0,015), já que os tumores genitais, na cabeça e no pescoço possuíam 18 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=18,571; IC95% 1,954-176,490; p=0,003), e das classificações de Patnaik (p=0,001) e Kiupel (p<0,001), sendo que os tumores de alto grau têm 36 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=36,00, IC95% 4,35-297,948; p<0,001). A marcação do Ki-67 demonstrou dependência da localização (p=0,024). A presença de mutação no exon 11 do domínio justamembrana não demonstrou associação com nenhuma das variáveis clínicas, das classificações histológicas, da concentração de eosinófilos e do padrão KIT. A presença da mutação foi correlacionada significativamente apenas ao Ki-67 (p=0,010). Os resultados obtidos sugerem que a localização é a variável clínica mais relacionada ao prognóstico e que apenas a classificação de Kiupel associada à imuno-histoquímica são eficientes para avaliar o comportamento tumoral.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Andrade G.M., Marchiori Filho M., Brunini M., Leonelo Neto A., Ré R.A., Matos A.T.S., Silva C.R. & Carvalho F.S.R. 2017. [Efficacy of the ivermectin tablet for treatment of sarcoptic mange in naturally infested dogs.] Eficácia da ivermectina comprimido no tratamento da sarna sarcóptica em cães naturalmente infestados. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):385-388. Departamento de Pesquisa e Desenvolvimento, UCBVET Saúde Animal, Praça Dr. Joaquim Batista 150, Centro, Jaboticabal, SP 14870-090, Brazil. E-mail: gisele@ucbvet.com.br The aim of this study was to evaluate the efficacy of the ivermectin tablet administered orally for treatment of Sarcoptes scabiei in naturally infested dogs. Fourteen 1 to 5 year-old Mongrel dogs presenting positive skin scrapings for S. scabiei mites, distributed into two groups with equal proportions of both sexes, containing seven animals per group were used in this study. All dogs were treated every 7 days, totaling four treatments in each dog (days 0, +7, +14 and +21). Group I was administered the ivermectin5 tablet at a dose of 0.2mg/kg and positive control group II as given an ivermectin commercial product at the same dose of group I. Skin scrapings, clinical and laboratorial parameters analysis were performed during the experimental period. Clinically there were no significant differences between the two groups evaluated prior and after treatments. Negative skin scrapings were observed in both groups from day +14, remaining negative until the end of the experimental period. The initial skin lesions observed in clinical evaluation regressed from day +14, and clinical improvement was evident in both groups. The ivermectin tablet (Ivermectan Pet, UCBVET Saúde Animal) administered orally was effective to treat S. scabiei infection in naturally infested dogs.

• Ivermectin Sarcoptes scabiei sarcoptic mange Ivermectina sarna sarcóptica

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Andrade G.M., Marchiori Filho M., Brunini M., Leonelo Neto A., Ré R.A., Matos A.T.S., Silva C.R. & Carvalho F.S.R. 2017. [Efficacy of the ivermectin tablet for treatment of sarcoptic mange in naturally infested dogs.] Eficácia da ivermectina comprimido no tratamento da sarna sarcóptica em cães naturalmente infestados. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):385-388. Departamento de Pesquisa e Desenvolvimento, UCBVET Saúde Animal, Praça Dr. Joaquim Batista 150, Centro, Jaboticabal, SP 14870-090, Brazil. E-mail: gisele@ucbvet.com.br O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia da ivermectina comprimido administrada por via oral no tratamento de Sarcoptes scabiei em cães naturalmente infestados. Foram selecionados 14 cães com raspados cutâneos positivos para o ácaro S. scabiei, idade de 1-5 anos, sem raça definida, distribuídos na mesma proporção de ambos os sexos, em dois grupos experimentais, compondo 7 animais por grupo. Todos os animais foram tratados a cada 7 dias, totalizando quatro tratamentos em cada cão (Dias 0,7,14 e 21). No grupo I foi administrada a ivermectina5 comprimido na dosagem de 0,2mg/kg e no grupo controle positivo (Grupo II) foi administrado um produto comercial a base de ivermectina comprimido na mesma dosagem do grupo I. Raspados cutâneos, avaliações clinicas e laboratoriais complementares dos cães foram realizadas durante o período de estudo. Clinicamente, não houve diferença significativa entre as avaliações antes e após o tratamento entre os dois grupos. Raspados negativos foram observados em ambos os grupos a partir do dia D+14, mantendo-se negativos até o final do período experimental. As lesões dermatológicas iniciais observadas no acompanhamento clínico regrediram e a partir do dia D+14 a melhora clínica era evidente em ambos os grupos. A ivermectina (Ivermectan Pet, UCBVET Saúde Animal) administrada por via oral foi eficaz no tratamento de S. scabiei em cães naturalmente infestados.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Falcão M.S.A., Monteiro R.V., Carvalho C.M., De Andrade H.H. & Galera P.D. 2017. Reference values for select ophthalmic tests of the blue-and-yellow macaw (Ara araruna). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):389-394. Departamento de Cirurgia de Pequenos Animais, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Campus Universitário Darcy Ribeiro, Avenida L4 Norte, Asa Norte, Brasília, DF 70910-900, Brazil. E-mail: dra.paulagalera@gmail.com The aim of this study was to establish reference values for selected ophthalmic diagnostic tests in healthy blue-and-yellow macaws. We investigated a total of 35 adult macaws (70 eyes) of undetermined sex and with an average weight of 1 kg, who were living in captivity in the Federal District, Brazil. Tear production using the Schirmer tear test (STT), normal conjunctival flora, intraocular pressure (IOP) using a rebound tonometer and horizontal palpebral fissure length (HPFL) were evaluated. In this study, 84.1% of samples were positive for microbial growth. Bacteria, fungi and yeasts were isolated, and Staphylococcus spp. (21.9%) and Bacillus spp. (26.8%) were the most frequently isolated microorganisms. The mean value for STT was 7.6±4.6mm/min in the right eye (OD) and 6.6±4.4mm/min in the left eye (OS) (median = 7,11±0,76mm/min). Mean IOP was 11.4±2.5mm Hg OD and 11.6±1.8mm Hg OS (median = 11.49±0.22mm Hg), prior to anesthesia, and 7.6±2.4mm Hg OD and 7.8±1.8mm Hg OS (median 7.71±0.08mmHg) after anesthesia. The IOP was significantly lower when the animals were under anesthesia as compared to when they were conscious (p&#8804;0.05). Horizontal palpebral fissure length was 11.7±0.1mm OD and 11.8±0.1mm OS (median = 11.72±0.07mm). The STT showed a positive correlation with palpebral fissure measurement for this species. These selected ophthalmic reference values will be particularly useful in diagnosing pathological changes in the eyes of blue-and-yellow macaws.

• Ophthalmic tests macaw Ara araruna Schirmer tear test intraocular pressure microflora testes oftálmicos arara canindé teste lacrimal de Schirmer pressão intra-ocular microflora

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Falcão M.S.A., Monteiro R.V., Carvalho C.M., De Andrade H.H. & Galera P.D. 2017. Reference values for select ophthalmic tests of the blue-and-yellow macaw (Ara araruna). [Valores de referência para selecionados testes oftálmicos para a arara canindé (Ara araruna).] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):389-394. Departamento de Cirurgia de Pequenos Animais, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Campus Universitário Darcy Ribeiro, Avenida L4 Norte, Asa Norte, Brasília, DF 70910-900, Brazil. E-mail: dra.paulagalera@gmail.com Objetivou-se determinar os valores normais para testes oftálmicos diagnósticos selecionados para a Arara Canindé. Trinta e cinco Ara ararauna (70 olhos), de sexo indeterminado, adultas, com peso médio de 1kg e provenientes de cativeiro no Distrito Federal, foram avaliadas. Aferiram-se a produção lacrimal pelo Teste lacrimal de Schirmer (TLS), a avaliação microbiológica da conjuntiva ocular, a pressão intra-ocular (PIO) utilizando a tonometria de rebote e o comprimento horizontal da rima palpebral Neste estudo 84.1% das amostras analisadas foram positivas para crescimento microbiológico. Bactérias, fungos e hifas foram isolados e Staphylococcus spp. (21.9%) e Bacillus spp. (26.8%) foram isolados mais frequentemente. Os valores médios do teste de Lacrimal de Schirmer (TLS) foram de 7.6±4.6 e 6.6±4.4mm/min para olhos direito (OD) e esquerdo (OE), respectivamente (média = 7,11±0,76mm/min). A pressão intraocular média foi de 11.4±2.5 (OD) e 11.6±1.8mmHg (OE) anteriormente à anestesia (média 11,49±0,22 mmHg) e 7.6 ± 2.4 mmHg (OD) e 7.8 ± 1.8 mm Hg (OE) (média 7,71±0,08mm Hg) após a anestesia, verificando-se que a PIO foi significativamente menor quando os animais se encontravam sob anestesia comparativamente ao momento em que não estavam anestesiados. O comprimento horizontal da rima horizontal palpebral foi de 11.7±0.1mm OD e de 11.8±0.1mm OE (média 11,72±0,07mm). Verificou-se correlação positiva do TLS com o comprimento da fissura palpebral para a espécie estudada. Estes valores de referencia serão úteis no diagnóstico de alterações oculares da Arara Canindé.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, are a painless and non-invasive source of MSC and can be used for stem cell banking.

• Cryopreservation stem cells amniotic mesenchymal layer umbilical cord fetuses cell banking criopreservação células tronco cordão umbilical

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. [Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. Apresentaram também capacidade de diferenciação in vitro nas três linhagens mesodermais e quando analisadas pós criopreservação por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram viabilidade de 80%. Estes resultados indicam que MA e TCU, obtidos tanto no momento de parto como em abatedouro, de fetos bovinos podem ser utilizados como fonte não invasiva e indolor de CTMs e possibilitam a formação de bancos de armazenamento de células.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Lisboa-Neto A.F.S., Mariano-Filho P.G., Carvalho J.R., Araújo M.S., Santos A.C., Machado F.C.F., Silva-Filho M.L. & Machado-Júnior A.A.N. 2017. Effect of racial crossing on the scrotum-testicular biometry in sheep submitted to scrotal insulation. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):291-294. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Avenida Prof. Doutor Orlando Marques de Paiva 87, Butantã, São Paulo, SP 05508-010, Brazil. E-mail: lisboaneto@usp.br The objective of this study was to evaluate the effect of the racial crossing on scrotum-testicular biometric characteristics of four sheep Santa Ines and four crossbred (Santa Ines x Dorper) submitted to scrotal insulation, following the return of these characteristics to values previously reported. For this, two measurements were made regarding the scrotal circumference (SC), length (L) and testicular width (W) before treatments. The testicular volume (V) was calculated by the formula V=2 [(r²) x &#960; x H]. The pouches were made with double-layer plastic, internally lined with cotton, and fixed around the spermatic funiculus and scrotum with adhesive tape and bandage remaining in this position for seven days. Measurements were made every seven days, totaling 15 measurements throughout the experiment. The data were submitted to analysis of variance (ANOVA) to a randomized block design with two blocks, 15 treatments and four replications. The variables analyzed were subjected to Dunnett test at 5% probability, to compare the values obtained before and after insulation. For comparison between the breeds, the variables were submitted to Tukey test at 5% probability. All animals studied suffered significant influence (P<0.05) after scrotal insulation, but Santa Ines returned to the values previously observed in a shorter period than the crossbred. In summary, sheep Santa Ines have a higher resistance than crossbred animals when subjected to thermal stress induced by scrotal insulation.

• Scrotum-testicular biometry thermoregulation biometria escroto-testicular termorregulação

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Lisboa-Neto A.F.S., Mariano-Filho P.G., Carvalho J.R., Araújo M.S., Santos A.C., Machado F.C.F., Silva-Filho M.L. & Machado-Júnior A.A.N. 2017. Effect of racial crossing on the scrotum-testicular biometry in sheep submitted to scrotal insulation. [Efeito do cruzamento racial sobre a biometria escroto-testicular em ovinos submetidos à insulação escrotal.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):291-294. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Avenida Prof. Doutor Orlando Marques de Paiva 87, Butantã, São Paulo, SP 05508-010, Brazil. E-mail: lisboaneto@usp.br Objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito do cruzamento sobre as características biométricas escroto-testiculares de carneiros da raça Santa Inês e mestiços (Santa Inês x Dorper), submetidos à insulação escrotal, acompanhando o retorno dessas características aos valores previamente observados. Para isso, foram realizadas duas mensurações referentes à circunferência escrotal (CE), comprimento (C) e largura testicular (L), antes da insulação. O volume testicular (V) foi calculado pela fórmula V=2 [(r²) x &#960; x h]. As bolsas de insulação foram fixadas ao redor do funículo espermático e escroto com fita adesiva e esparadrapo, permanecendo por sete dias. Após o período de insulação, as mensurações foram realizadas a cada sete dias, totalizando 15 mensurações durante todo o experimento. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) para um delineamento em blocos casualizados, com dois blocos, 15 tratamentos e quatro repetições. As variáveis analisadas foram submetidas ao teste de Dunnett a 5% de probabilidade, para comparar os valores obtidos antes e após a insulação. Para a comparação entre as raças, as variáveis foram submetidas ao teste de Tukey a 5% de probabilidade. Todos os animais estudados sofreram influência significativa (P<0,05) após a insulação escrotal, porém os carneiros da raça Santa Inês retornaram aos valores anteriormente observados em um espaço de tempo mais curto do que os mestiços. Conclui-se que carneiros da raça Santa Inês apresentam maior resistência do que animais mestiços quando submetidos ao estresse térmico induzido pela insulação escrotal.

Abstract in English:

Ingestion of Enterolobium contortisiliquum pods causes digestive disturbances, secondary hepatogenous photosensitization and abortions in ruminants. Pods were administered to sheep via a ruminal cannula to characterize acute poisoning. In Experiment 1, a single dose of 12g/kg of body weight (BW) was administered to three sheep in one experiment. One sheep died, and the other two recovered after presenting clinical signs. In Experiment 2, 10g/kg BW were administered daily to 15 sheep until the onset of clinical signs or for three consecutive days. Fourteen sheep showed mild to severe signs after the ingestion of 1-3 doses. Two sheep died, and the others recovered. Clinical signs in both experiments were diarrhea, anorexia, rumen atony, apathy, dehydration and tachypnea. The main macroscopic findings were an orange, frothy ruminal content witch contained pods fragments. The intestinal content was liquid. Detachment of the mucosa from the submucosa and ballooning degeneration of mucosal cells were observed histologically in the forestomachs. Evaluation of ruminal contents revealed acute lactic ruminal acidosis (ALRA). Bromatological analysis of E. contortisiliquum pods revealed 537.8g/kg DM (dry matter) of non-fibrous carbohydrates, which is sufficient to cause ALRA. Only one sheep in Experiment 2 had liver failure, characterized by jaundice, elevated serum activity of liver enzymes and histological lesions in liver biopsies. It is concluded that the administration of E. contortisiliquum pods in forage-fed sheep at doses of 10g/kg BW or higher may cause ALRA. The induction of liver failure in one sheep suggests that liver damage may occur in those sheep that do not develop acidosis.

• Poisonous plants Enterolobium contortisiliquum Leg. Mimosoideae sheep plant poisoning acute lactic ruminal acidosis sheep diseases photosensitivity

Abstract in Portuguese:

A ingestão das favas de Enterolobium contortisiliquum causa distúrbios digestivos, fotossensibilização hepatógena e abortos em ruminantes. Para caracterizar a intoxicação aguda, favas de E. contortisiliquum foram administradas a ovinos por meio de cânula ruminal. No Experimento 1, uma dose única de 12g/kg de peso corporal (pc) foi administrada a três ovinos. Um dos ovinos morreu e os outros dois se recuperaram após mostrar sinais clínicos. No experimento 2, 10g/kg/pc foram administradas diariamente a 15 ovinos, por três dias consecutivos ou até o parecimento dos sinais clínicos. Catorze ovinos mostraram sinais clínicos leves a acentuados após ingestão de 1-3 doses. Dois ovinos morreram e os outros se recuperaram. Observou-se nos ovinos dos experimentos 1 e 2, diarreia, anorexia, atonia ruminal, apatia, desidratação e taquipneia. Os principais achados macroscópicos incluíram conteúdo ruminal espumoso e alaranjado em meio ao qual se observavam fragmentos das favas de E. contortisiliquum, e conteúdo intestinal líquido. Histologicamente, havia degeneração balonosa e desprendimento do epitélio de revestimento dos pré-estomagos. A avaliação do conteúdo ruminal revelou acidose ruminal láctica aguda (ARLA). Análise bromatológica das favas de E. contortisiliquum revelou 537.8g/kg de matéria seca de carboidratos não fibrosos, quantidade suficiente para causar ARLA. Um ovino do Experimento 2 teve insuficiência hepática aguda, caracterizada por icterícia, elevação da atividade sérica das enzimas hepáticas e alterações histológicas observadas em biópsia hepática. Concluiu-se que a administração de favas de E. contortisiliquum na alimentação de ovinos, nas doses de 10g/kg pc ou maiores, pode causar ARLA. A ocorrência de insuficiência hepática num dos ovinos deste experimento sugere que a lesão hepática pode se desenvolver em ovinos que não apresentam ARLA.

• Plantas tóxicas Enterolobium contortisiliquum Leg. Mimosoideae ovinos intoxocação por planta acidose ruminal láctica aguda fotossensibilização

Abstract in English:

ABSTRACT.- Namazi F., Omidi A., Abbasi S., Afsar M., Honarmand M. & Nazifi S. 2016. Starvation and refeeding in rats: effect on some parameters of energy metabolism and electrolytes and changes of hepatic tissue. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):101-105. Department of Pathobiology, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. E-mail: fnamazi@shirazu.ac.ir Regarding the importance of starvation and refeeding and the occurrence of refeeding syndrome in various conditions, the present study was conducted to investigate the effects of refeeding on some parameters of energy metabolism and electrolytes and changes of hepatic tissue in male Wistar rats. Fifty-seven rats were divided into six groups, having 6 to 11 rats. Food was provided ad-libitum until three months and then the first group was considered without starvation (day 0). Other rats were fasted for two weeks. Group 2 was applied to a group immediately after starvation (day 14). Groups 3 to 6 were refed in days 16 till 22, respectively. At the end of each period, blood and tissue samples were taken and histopathological and serum analysis, including serum electrolytes (calcium, phosphorus, sodium, potassium), the energy parameters (glucose, insulin, cortisol) and the liver enzymes (ALT, AST, ALP) were determined. Insulin decreased by starvation and then showed an increasing trend compared to starvation period, which the highest amount of this parameter was observed eight days post-refeeding. Serum glucose level showed the opposite pattern of insulin. Histopathological examination of the tissue sections revealed clear vacuoles after starvation and refeeding, in which the severity of lesions gradually decreased during refeeding. The cortisol level decreased by starvation and then increased during refeeding. Also, potassium and phosphorus concentrations declined by refeeding and the serum sodium and potassium levels were changed in the relatively opposite manner. The calcium level decreased by starvation and then increased during refeeding. These results could help recognize and remedy the refeeding syndrome.

• Energy metabolism electrolytes and changes hepatic tissue rat

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Namazi F., Omidi A., Abbasi S., Afsar M., Honarmand M. & Nazifi S. 2016. Starvation and refeeding in rats: effect on some parameters of energy metabolism and electrolytes and changes of hepatic tissue. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):101-105. Department of Pathobiology, School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran. E-mail: fnamazi@shirazu.ac.ir Regarding the importance of starvation and refeeding and the occurrence of refeeding syndrome in various conditions, the present study was conducted to investigate the effects of refeeding on some parameters of energy metabolism and electrolytes and changes of hepatic tissue in male Wistar rats. Fifty-seven rats were divided into six groups, having 6 to 11 rats. Food was provided ad-libitum until three months and then the first group was considered without starvation (day 0). Other rats were fasted for two weeks. Group 2 was applied to a group immediately after starvation (day 14). Groups 3 to 6 were refed in days 16 till 22, respectively. At the end of each period, blood and tissue samples were taken and histopathological and serum analysis, including serum electrolytes (calcium, phosphorus, sodium, potassium), the energy parameters (glucose, insulin, cortisol) and the liver enzymes (ALT, AST, ALP) were determined. Insulin decreased by starvation and then showed an increasing trend compared to starvation period, which the highest amount of this parameter was observed eight days post-refeeding. Serum glucose level showed the opposite pattern of insulin. Histopathological examination of the tissue sections revealed clear vacuoles after starvation and refeeding, in which the severity of lesions gradually decreased during refeeding. The cortisol level decreased by starvation and then increased during refeeding. Also, potassium and phosphorus concentrations declined by refeeding and the serum sodium and potassium levels were changed in the relatively opposite manner. The calcium level decreased by starvation and then increased during refeeding. These results could help recognize and remedy the refeeding syndrome.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fonseca L.A., Maia N.L., Girardi F.M.Carvalho Filho W.P., Pimentel F.G. & Braga F.R. 2016. [Evaluation of serum biochemical parameters in Amazon turtles (Podocnemis expansa) hatchlings kept in captivity.] Avaliação de parâmetros bioquímicos séricos em Tartarugas-da-Amazônia (Podocnemis expansa) mantidas em cativeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(12):1186-1189. Departamento de Veterinária, Universidade Federal de Viçosa, Avenida Peter Henry Rolfs s/n, Campus Universitário, Viçosa, MG 36570-000, Brazil. E-mail: leandroabreu@ufv.br Blood samples from the giant river turtle kept in captivity were analyzed in order to evaluate the serum biochemical constituents and relate to what has been reported by other researchers, beyond the purpose of generating further information, given the paucity of data involving this species. The turtle eggs were from the state of Tocantins and were obtained from direct sampling in their natural habitat. After being collected the eggs were kept in incubators and then the puppies were kept in tanks. Samples were collected after chemical restraint of these animals by intracardiac puncture or cardiocentesis. The samples were centrifuged to obtain serum. Biochemical analyzes were processed by kinetic and colorimetric methods, as described by the manufacturer, and the values obtained were: calcium 7.0+1.9mg/dL, phosphorus 2.8±1.2mg/dL, uric acid 1.8±0.8mg/dL, BUN 10.4+3.9mg/dL, alanine aminotransferase (AST) 75.5+33.6 IU/L, total protein 1.9±0.8g/dL, triglycerides 22.9+9.8mg/dL and cholesterol 45.3+19.7mg/dL. It was observed that the values of the evaluated blood components are similar to those found by other researchers in serum biochemical studies with samples of Podocnemis expansa. During this study we observed the paucity of published data on blood parameters of Podocnemis genus, especially P. expansa species, which confirmed the high relevance of the development of further research involving this topic.

• Podocnemis biochemistry giant river turtle bioquímica sérica Tartaruga-da-Amazônia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fonseca L.A., Maia N.L., Girardi F.M.Carvalho Filho W.P., Pimentel F.G. & Braga F.R. 2016. [Evaluation of serum biochemical parameters in Amazon turtles (Podocnemis expansa) hatchlings kept in captivity.] Avaliação de parâmetros bioquímicos séricos em Tartarugas-da-Amazônia (Podocnemis expansa) mantidas em cativeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(12):1186-1189. Departamento de Veterinária, Universidade Federal de Viçosa, Avenida Peter Henry Rolfs s/n, Campus Universitário, Viçosa, MG 36570-000, Brazil. E-mail: leandroabreu@ufv.br Amostras de sangue de Tartaruga-da-Amazônia mantidas em cativeiro foram analisadas com o propósito de avaliar os constituintes bioquímicos séricos e de relacionar ao que já foi relatado por outros pesquisadores, além de gerar mais informações, tendo em vista a escassez de dados envolvendo a espécie estudada. Foram utilizados 35 animais, com idade entre 3 e 7 meses, os quais foram contidos fisicamente para coleta de sangue em tubo sem anticoagulante. As análises bioquímicas foram processadas através de métodos cinéticos (enzimas) e colorimétricos (demais análises), e os valores médios obtidos foram: cálcio 7,0+1,9mg/dL, fóforo 2,8+1,2mg/dL, ácido úrico 1,8+0,8mg/dL, uréia 10,4+3,9mg/dL, alanina aminotransferase (AST) 75,5+33,6 UI/L, proteína total 1,9+0,8g/dL, triglicerídeos 22,9+9,8mg/dL e colesterol 45,3+19,7mg/dL. Observou-se que os valores dos componentes séricos avaliados assemelham-se aos que foram encontrados por outros pesquisadores em estudos bioquímicos séricos com Podocnemis expansa e outras tartarugas de água doce. Importante ressaltar que, no decorrer deste estudo observou-se a escassez de dados publicados sobre parâmetros sanguíneos de tartarugas do gênero Podocnemis, especialmente a espécie Podocnemis expansa, o que corroborou a alta relevância do desenvolvimento de mais pesquisas que envolvam a questão.