Resultado da pesquisa (70)

Termo utilizado na pesquisa Proteína

#1 - ELISA of amyloid A in paired bronchoalveolar lavage fluid and serum samples of healthy horses

Abstract in English:

Pulmonary disorders are common in horses, and treatment efficiency depends on an adequate diagnosis. Amyloid A is the most sensitive indicator of pathology in horses. The objective of this study was to establish the concentration of amyloid A of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in healthy horses. Health condition of horses was considered normal based on physical examination, complete blood count, biochemical parameters, and BALF cytology. Blood and BALF were collected from thirty adult female horses. Amyloid A concentrations in serum and BALF were measured using commercial ELISA tests. Amyloid A was detected in serum (mean ± SD = 3.71±2.51) and BALF (mean ± SD = 0.000745±0.000785) of all horses. In conclusion, SAA can also be measured in bronchoalveolar fluid, affording early detection of respiratory infections or inflammatory conditions.

Abstract in Portuguese:

Distúrbios pulmonares são comuns nos cavalos e a eficiência do tratamento depende de um diagnóstico adequado e precoce. A amilóide A é um biomarcador sensível na deteccção de patologias inflamatórias e infecciososa em cavalos. O objetivo deste estudo foi estabelecer a concentração de amilóide A no líquido broncoalveolar (LBA) em cavalos saudáveis. Os cavalos foram considerados saudaveis baseado nos achados de normalidade do exame físico, hemograma, parâmetros bioquímicos e citologia do LBA. Sangue e LBA foram coletados de 30 fêmeas equinas adultas. Os níveis de Amilóide A no soro e no LBA foram mensurados por meio do teste de ELISA. A amilóide A foi detectada no soro (média ± DP = 3,71±2,51) e no LBA (média ± DP = 0,000745±0,000785) de todos os animais. Conclui-se que a amilóide A também pode ser mensurada no LBA, auxiliando no diagnóstico precoce de processos inflamatórios e infecciosos pulmonares.


#2 - Concentrations of matrix metalloproteinase-2 and interleukin-1 β in the aqueous humor of dogs with normal and cataractous eyes

Abstract in English:

We aimed to determine the concentration of MMP-2 and IL-1β in the aqueous humor of dogs with healthy eyes (n=8) and in those with mature (n=8) and hyper mature cataracts (n=8). Correlations between cytokines, cytokines, and intraocular pressure (IOP), as well as cytokines with ages of patients of each group, were also assessed. In patients with cataract, aqueous humor was collected at the end of the electroretinographic procedure. In healthy dogs, aqueous humor was collected before elective surgeries. Cytokine levels were determined using ELISA. IOP was assessed by applanation tonometry. IOP of patients with mature and hyper mature cataracts were lower than the ones measured in normal eyes (P=0.158). MMP-2 aqueous humor concentration was higher in patients with hyper mature cataracts, in comparisons with healthy patients (P=0.04). Average IL-1 β aqueous concentration was higher in patients with cataracts (P<0.0001). Significant higher values of IL-1 β were observed in patients with hyper mature, than in the ones with mature cataracts (P=0.0085). Correlations between MMP-2 and IL-1 β (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 and IOP (r=-0.149, P=0.484), and IL-1 β and the ages of patients were not observed (P>0.05). IL-1 β and IOP correlated negatively (r=-0.42, P=0.04). MMP-2 and the ages of patients correlated only in dogs with mature cataracts (r=0.772, P=0.02). It can be concluded that the increment in the aqueous humor concentration of IL-1 β found in dogs with mature and hyper mature cataracts, in addition to the negative relationship of this cytokine with IOP, suggests that IL-1 β is involved in the pathogenesis of LIU. Despite dogs with hypermature cataracts presented significant higher concentrations of MMP-2 in the aqueous humor, such cytokine did not correlate with IL-1 β and IOP. In our study, a relationship between aqueous humor cytokines and the ages of patients was only confirmed between MMP-2 and the ages of dogs with mature cataracts.

Abstract in Portuguese:

Objetivou-se determinar as concentrações da metalloprotease-2 (MMP-2) e de interleucina-1 β (IL-1 β) em cães com olhos saudáveis (n=8) e naqueles com catarata madura (n=8) e hipermatura (n=8). Correlações entre ambas as citocinas, entre as citocinas e a pressão intraocular (PIO), assim como entre as citocinas e a idade dos pacientes dentro de cada grupo foram averiguadas. Nos pacientes com catarata, o humor aquoso foi colhido ao final da eletrorretinografia. Nos cães saudáveis, o humor aquoso foi colhido antes do início de cirurgias eletivas. Os níveis das citocinas foram determinados por ELISA e a PIO por tonometria de aplanação. A PIO dos pacientes com catarata madura e hipermadura foram mais baixas que aquelas dos pacientes controle (P=0.158). A concentração de MMP-2 no humor aquoso foi maior nos pacientes com catarata hipermtura, comparativamente aos pacientes saudáveis (P=0.04). A concentração de IL-1 β no humor aquoso foi mais elevada nos cães com catarata (P<0.0001). Nos pacientes com catarata hipermatura, os valores de IL-1 β foram significativamente mais altos que aqueles dosados nos pacientes com catarata madura (P=0.0085). Correlações entre MMP-2 e IL-1 β (r=-0.38, P=0.06), MMP-2 e PIO (r=-0.149, P=0.484) e IL-1 β e as idades dos pacientes não foram observadas (P>0.05). A IL-1 β se correlacionou negativamente com a PIO (r=-0.42, P=0.04). Correlação entre MMP-2 e a idades dos pacientes foi observada apenas nos cães com catarata madura (r=0.772, P=0.02). Conclui-se que o aumento na concentração de IL-1 β no humor aquoso de cães com catarata madura e hipermatura, associado à correlação negativa entre essa citocina e a PIO, sugerem que a mesma está envolvida na patogênese da uveíte induzida pela lente. Apesar dos cães com catarata hipermadura apresentarem concentrações significativamente maiores de MMP-2 no humor aquoso, essa citocina não se correlacionou com a IL-1 β e a PIO. Em nosso estudo, correlação entre as citocinas dosadas no humor aquoso e a idade dos pacientes foi confirmada apenas entre MMP-2 e a idade dos cães com catarata madura.


#3 - Determination of the reference interval of the C-reactive protein/albumin ratio and its efficiency, CRP and albumin as prognostic markers in dogs

Abstract in English:

The objective of this research was to creates a reference interval for C-reactive protein (CRP)/albumin ratio (CAR) in the canine species and to analyze the potential of CRP, albumin and the relationship between both, to serve as indicators of disease severity, length of hospital stay (LoS) and mortality in this species. For this, an outcome study was conducted in a Veterinary Teaching Hospital in southern Brazil. One hundred ninety dogs were included randomly, without distinction of gender, age, or breed, from June 2013 to November 2016. Plasma was collected from them and analyzed for assessment of CRP and albumin. The reference range stipulated for CAR in dogs was 0.36-0.60, as determined by the confidence interval of mean resamplings (in percentiles). The frequencies mean, and standard deviations of the variables, correlation analysis, and comparative analysis (Kruskal-Wallis in α = 5%) were calculated. Elevation (above reference) of CAR was determined to be proportional to the severity of the underlying disease, and CRP means were reasonable. Besides, hypoalbuminemia was indicative of systemic disease, but not of severity. Thus, CAR was a better marker of disease severity than were CRP and albumin, analyzed separately. Concerning LoS, there was a positive correlation with CAR (p<0.01) in patients, and the same was not observed with CRP and albumin. Concerning mortality, hypoalbuminemia was the only marker valid in animals with a critical illness (p=0.04). In conclusion, CAR is a better marker of disease severity and LoS in dogs than are CRP and albumin analyzed separately.

Abstract in Portuguese:

O objetivo desta pesquisa foi determinar um intervalo de referência para a relação proteína C reativa (PCR)/albumina (R:PCR/ALB) na espécie canina e analisar o potencial de PCR, albumina e a relação entre ambas como indicadores de gravidade de doença, tempo de internação (TI) e mortalidade nesta espécie. Para isso, um estudo foi realizado em um Hospital Veterinário Escola no sul do Brasil. Cento e noventa cães foram incluídos aleatoriamente, sem distinção de sexo, idade ou raça, de junho de 2013 a novembro de 2016. O plasma foi coletado e analisado para avaliação da PCR e albumina. O intervalo de referência estipulado para o R:PCR/ALB em cães foi de 0,36-0,60, conforme determinado pelo intervalo de confiança da média das reamostragens (em percentis). Foram calculadas as frequências, médias e desvios-padrões das variáveis, análises de correlação e análises comparativas (Kruskal-Wallis em α = 5%). Notou-se elevação (acima da referência) da R:PCR/ALB proporcional à gravidade da doença de base, sendo normais as médias da PCR. Adicionalmente, a hipoalbuminemia foi indicadora de doença sistêmica, mas, não de gravidade. Dessa forma, a R:PCR/ALB foi melhor indicadora de gravidade de doença do que a PCR e albumina, analisadas separadamente. Em relação ao TI, houve correlação positiva com a R:PCR/ALB (p<0,01) em doentes, não sendo observado o mesmo com a PCR e albumina. Em relação à mortalidade, a hipoalbuminemia foi a única marcadora válida em animais com doenças críticas (p=0,04). Conclui-se, portanto, que a R:PCR/ALB é melhor marcadora de gravidade de doença e TI em cães do que a PCR e albumina analisadas separadamente.


#4 - Serum amyloid A and muscle activity biomarkers in horses submitted to equestrian show jumping

Abstract in English:

The aim of this study was to evaluate the serum amyloid A (SAA) and biomarkers of muscle activity of horses submitted to show jumping activity. To do this, the variables SAA, glucose, lactate and the biomarkers creatine kinase (CK) and aspartate amino transferase (AST) were evaluated in 10 horses submitted to the show jumping exercise in a tournament for beginners. The evaluations occurred before exercise (T0), immediately after (T1), 30 minutes (T2), 60 minutes (T3) and 24 hours after the end (T4). Data were evaluated using analysis of variance for repeated measures. The statistical software SAEG 9.1 was used to verify the level of significance between the moments for P<0.05. Glucose presented a difference between the moments T0 (97.7±13.3mg/dL) and T1 (79.7±14.1mg/dL). Lactate presented elevation in T1 (15.3±6.1mmol/L) compared to the others T0 (3.8±0.8mmol/L), T2 (6.5±3.9mmol/L), T3 (5.3±2.2mmol/L) and T4 (5.1±1.6mmol/L). The CK showed a significant difference between T0 (82.8±51.2U/L) and T1 (140.1±58.5U/L) and between T4 (74.4±43.1U/L) with T1 (140.1±58.5U/L). The AST presented no difference between moments. The show jumping activity with one-meter obstacles did not induce changes in the SAA protein between the moments

Abstract in Portuguese:

O objetivo deste estudo foi avaliar a amilóide sérica A (SAA) e biomarcadores de atividade muscular de equinos submetidos a atividade de salto, ou hipismo clássico. Para tanto, foram avaliadas as variáveis SAA, glicose, lactato e os biomarcadores creatina quinase (CK) e aspartatoaminotransferase (AST) em 10 equinos submetidos ao exercício de saltos em torneio para iniciantes. As avaliações ocorreram antes do exercício (T0), imediatamente após (T1), 30 minutos (T2), 60 minutos (T3) e 24 horas após o término (T4). Os dados foram avaliados utilizando análise de variância para medidas repetidas. O software estatístico SAEG 9.1 foi utilizado para verificar o nível de significância entre os momentos para P<0,05. A glicose diferenciou-se entre os momentos T0 (97.7±13.3mg/dL) e T1 (79.7±14.1mg/dL). O lactado apresentou elevação comparada com o momento T1(15.3±6.1mmol/L) e os demais T0 (3.8±0.8mmol/L), T2 (6.5±3.9mmol/L), T3 (5.3±2.2mmol/L) e T4 (5.1±1.6mmol/L). A CK mostrou diferença significativa entre T0 (82.8±51.2U/L) e T1 (140.1±58.5U/L) e entre T4 (74.4±43.1U/L) com T1 (140.1±58.5U/L). A AST não apresentou diferença entre os momentos. A atividade de hipismo clássico com obstáculos de um metro não induziu alterações na proteína SAA entre os momentos.


#5 - Concentrations of acute-phase proteins and immunoglobulins in serum and synovial fluid in clinically healthy heifers and steers

Abstract in English:

The aim of the study was to determine the concentration pattern of intra-articular acute phase proteins (APPs) and immunoglobulins in healthy crossbred cattle. Synovial fluid (SF) samples were collected from the radiocarpal joint of 25 heifers and 25 steers. Concentrations of APPs were measured by SDS-PAGE. The results were submitted to analysis of variance using the SAS statistical program, and means were compared by the Student-Newman-Keuls test (P<0.05). Thirty-seven proteins with molecular weights ranging from 7 to 37kDa were identified in SF of all animals. Eight were nominally identified with immunoglobulin A (IgA) and G (IgG), ceruloplasmin (Cp), transferrin (Tf), albumin (Ab), α1-antitripsin (AAT), α1-acid glycoprotein (AGP), and haptoglobin (Hp). The α1-antitripsin was only identified in the Sf of the heifers. The SF values of Cp, Hp, AGP and IgA were significantly higher in heifers than in steers. In sera, 34 proteins with molecular weights between 7 and 244kDa were identified in heifers and steers. Similar proteins were nominally identified in the sera, however the α1-antitrypsin was identified only in SF. The serum values Tf, AGP and IgG were significantly higher in heifers compared with steers. In conclusion, the physiological acute-phase proteins concentrations in synovial fluid of healthy ruminants can be useful in the interpretation of samples from animals with joint diseases. The SF electrophoretic profile of healthy ruminants differs depending on gender. Similar proteins were nominally identified in the sera, but only the SF of α1-antitrypsin.

Abstract in Portuguese:

O objetivo do estudo foi determinar o padrão de concentração de proteínas de fase aguda e de imunoglobulinas intra-articulares (APPs) em bovinos mestiços saudáveis. As amostras de fluido sinovial (SF) foram coletadas da articulação radiocárpica de 25 novilhas e 25 novilhos. As concentrações de APPs foram mensuradas por SDS-PAGE. Os resultados foram submetidos à análise de variância usando o programa estatístico SAS, e os meios foram comparados pelo teste Student-Newman-Keuls (P<0,05). Trinta e sete proteínas com pesos moleculares variando de 7 a 37kDa foram identificadas no SF de todos os animais. Oito foram nominalmente identificadas como imunoglobulina A (IgA) e G (IgG), ceruloplasmina (Cp), transferrina (Tf), albumina (Ab), a1-antitripsina (AAT), glicoproteína a1-ácido (AGP) e haptoglobina (Hp). A α1-antitripsina foi identificada apenas no SF das novilhas. Os valores de Cp, Hp, AGP e IgA no SF foram significativamente maiores em novilhas do que em novilhos. No soro, 34 proteínas com pesos moleculares entre 7 e 244kDa foram identificadas nas novilhas e novilhos. Proteínas similares foram identificadas nos soros, mas apenas o SF das novilhas apresentou a α1-antitripsina. Os valores séricos de Tf, AGP e IgG foram significativamente maiores em novilhas em relação aos novilhos. Conclui-se que a mensuração das concentrações das proteínas da fase aguda no líquido sinovial de animais saudáveis pode ser útil na avaliação de amostras oriundas de bovinos com afecções articulares. O perfil eletroforético do SF de ruminantes saudáveis difere em função do gênero e as diferenças devem ser levadas em consideração na interpretação dos achados.


#6 - Serum proteinogram and biochemistry of Holstein cows in the peripartum period

Abstract in English:

In face of the few reports found in national literature analyzing the potential influence of parturition number in serum proteinogram and biochemical profile in the peripartum period of high yielding dairy cows, the aim of the present study was to comparatively evaluate the dynamics of these serum constituents’ concentrations in blood samples obtained from primiparous and multiparous Holstein cows, 60 and 30 days prepartum and in the day of parturition. Data were analyzed by repeated measures variance analysis (ANOVA) and differences between groups and moments were analyzed by Tukey’s test. Results were considered significant when P<0.05. Parity influenced levels of total protein, albumin, globulins, magnesium, cholesterol, which were higher in multiparous cows, as well as concentrations of ceruloplasmin, total calcium, chloride and alkaline phosphatase activity, which were higher in primiparous cows. Parturition influenced serum concentrations of ceruloplasmin (+58%), transferrin (-25%), haptoglobin (+33%), total protein (-17%), globulins (-25%), immunoglobulin A (-43%), immunoglobulin G (-24%), total calcium (-12%), inorganic phosphorus (-10%), chloride (+5%), sodium (+4%), cholesterol (-23%), triglycerides (-38.6%), as well as activities of aspartate aminotransferase (+14%) and alkaline phosphatase (+28%). A decrease in serum levels of total calcium, inorganic phosphorus, cholesterol and triglycerides was more pronounced in multiparous than in primiparous cows. These results demonstrate that the interpretation of proteinogram and serum constituents should take into consideration lactation number and the moment of parturition as relevant factors in high yielding dairy cows in the transition period.

Abstract in Portuguese:

Diante da escassez de relatos encontrados na literatura nacional quanto à potencial influência do número de parições sobre o proteinograma sérico e perfil bioquímico no período periparto de vacas leiteiras de alta produção, o objetivo do presente estudo foi avaliar comparativamente a dinâmica de constituintes séricos em amostras de sangue obtidas de vacas da raça Holandesa primíparas e pluríparas, 60 e 30 dias pré-parto e no dia do parto. Os resultados foram avaliados por análise de variância (ANOVA) com medidas repetidas no tempo e as diferenças entre grupos e entre momentos foram analisadas pelo teste de Tukey, sendo os resultados considerados significativos quando P<0,05. O número de parições influenciou os teores de proteína total, albumina, globulinas, magnésio e colesterol, que foram maiores em vacas pluríparas, bem como as concentrações de ceruloplasmina, cálcio total, cloreto e atividade de fosfatase alcalina, que foram maiores em vacas primíparas. O número de parições influenciou as concentrações séricas de ceruloplasmina (+58%), transferrina (-25%), haptoglobina (+33%), proteína total (-17%), globulinas (-25%), imunoglobulina A (-43%), imunoglobulina G (-24%), cálcio total (-12%), fósforo (-10%), cloretos (+5%), sódio (+4%), colesterol (-23%), triglicérides (-38.6%), bem como as atividades de aspartato aminotransferase (+14%) e fosfatase alcalina (+28%). A diminuição do teor sérico de cálcio total, fósforo, colesterol e triglicérides foi mais acentuada em vacas pluríparas do que em vacas primíparas. Esses resultados mostram que a interpretação do proteinograma e dos constituintes séricos deve levar em consideração o número de lactações e a ocorrência do parto como fatores relevantes em vacas leiteiras de alta produção no período de transição.


#7 - Protein-to-creatinine urinary in the early diagnosis of renal injury in canine pyometra

Abstract in English:

Kidney disease that affects bitches with pyometra may lead patients to develop chronic renal failure even after pyometra treatment. Therefore, several studies have sought to clarify the gaps in the understanding of the pathogenesis of renal injury in pyometra. Identification of early detection markers for renal damage, which can predict and identify the prognosis of the disease, is very important. Proteinuria analysis can diagnose kidney damage, since proteins such as albumin are not filtered through the glomerulus and those that undergo glomerular filtration are almost completely reabsorbed by tubular cells. The objective of this study was to evaluate whether the urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) can detect renal injury in bitches with pyometra before development of azotemia. For this, 44 bitches with pyometra were divided into two groups: bitches with azotemic piometra (A, n=15, creatinine >1.7) and bitches with non-azotemic pyometra (NA, n=29). The two groups were compared to the control group (CG, n=12), which had no signs of systemic disease. All animals underwent blood and urine tests. Leukocytosis was more evident in bitches in the A group than in the other groups. This shows that the inflammatory response may be associated with the pathogenesis of renal injury. The median UPC in bitches with pyometra was significantly higher than in the CG, with a median above the reference values. In conclusion, the UPC can be used in bitches with pyometra to detect renal damage before the development of azotemia. It has been suggested that the UPC of bitches with pyometra should be followed through during the postoperative period so that permanent renal lesions secondary to pyometra can be diagnosed and treated properly before the development of azotemia.

Abstract in Portuguese:

A doença renal que afeta cadelas com piometra pode levar a insuficiência renal crônica mesmo após o tratamento. Portanto, vários estudos procuraram esclarecer as lacunas na compreensão da patogênese da lesão renal na piometra. A identificação de marcadores de lesão renal precoce, que podem prever e identificar o prognóstico da doença é muito importante. A análise da proteinúria pode diagnosticar lesão renal, uma vez que proteínas como a albumina não são filtradas através do glomérulo e aquelas que sofrem filtração glomerular são quase completamente reabsorvidas pelas células tubulares. O objetivo deste estudo foi avaliar se a relação proteína-creatinina urinária (UPC) pode detectar lesão renal em cadelas com piometra antes do desenvolvimento de azotemia. Para isso, 44 cadelas com piometra foram divididas em dois grupos: cadelas com piometra azotêmica (A, n=15, creatinina >1,7) e cadelas com piometra não azotêmica (NA, n=29). Os dois grupos foram comparados ao grupo controle (CG, n=12), que não apresentaram sinais de doença sistêmica. Todos os animais foram submetidos a exames de sangue e urina. A leucocitose foi mais evidente nas cadelas do grupo A do que nos outros grupos. Isso mostra que a resposta inflamatória pode estar associada à patogênese da lesão renal. A mediana da UPC em cadelas com piometra foi significativamente maior que no CG, com uma mediana acima dos valores de referência. Em conclusão, a UPC pode ser usada em cadelas com piometra para detectar lesões renais antes do desenvolvimento de azotemia. Sugeriu-se que a UPC de cadelas com piometra deve ser acompanhada durante o pós-operatório, de modo que as lesões renais permanentes secundárias à piometra possam ser diagnosticadas e tratadas adequadamente antes do desenvolvimento de azotemia.


#8 - Use of different fixation times and application of two immunohistochemical methods for detection of KIT and Ki67 proteins in canine cutaneous mast cell tumors

Abstract in English:

Due to the high prevalence of mast cell tumors (MCTs) in the diagnostic routine, several factors, especially prognostic, have been sought to determine the biological behavior of these neoplasms. Immunohistochemistry (IHC) is one of the main tools utilized to biologically differentiate more aggressive tumors from less aggressive ones. However, some immunostainings are influenced by formalin fixation, interfering with the results. This is both a retrospective and prospective study of MCTs diagnosed in laboratory routine. A total of 25 samples, without knowledge about fixation time, were analyzed in the retrospective study, whereas 12 samples, with known fixation times, were assessed in the prospective study. Two histologic grading systems (Patnaik and Kiupel), special staining of toluidine blue, and IHC for KIT and Ki67 proteins were applied in both studies. Additionally, two amplification systems (biotinylated and non-biotinylated) for Ki67 protein and counting of the argyrophilic nucleolar organizing regions (AgNOR method) were tested in the prospective study. In the retrospective study, greater agreement between the evaluating pathologists was observed when the Kiupel system was used. IHC staining for KIT protein was effective in both studies, regardless of fixation time. IHC staining for Ki67 protein was highly sensitive to formaldehyde, and staining failure was observed in 56% of the cases in the retrospective study. In the prospective study, samples fixed for longer than 24 hours showed a reduction in the number of stained cells (altering the determination of the cell growth fraction) or showed absence of IHC staining in both amplification systems. The use of the AgNOR method to evaluate the rate of cell proliferation may be an alternative when the fixation time of the neoplasm is unknown or longer than 24 hours.

Abstract in Portuguese:

Devido a alta prevalência dos mastocitomas cutâneos caninos (MCCs) na rotina diagnóstica, vários fatores, especialmente fatores prognósticos, têm sido buscados para auxiliar na determinação do comportamento biológico desse neoplasma. A imuno-histoquímica é uma das principais ferramentas empregadas para diferenciar tumores biologicamente mais agressivos de tumores menos agressivos. Entretanto, algumas imunomarcações sofrem influência pela fixação em formol, interferindo nos resultados. Este estudo compreendeu avaliar através de uma etapa retrospectiva e uma etapa prospectiva casos de MCCs diagnosticados na rotina laboratorial. Um total de 25 amostras, sem conhecimento do tempo de fixação, foi analisado no estudo retrospectivo e 12 amostras, com tempos de fixação conhecidos, no estudo prospectivo. Foram aplicados nos dois estudos, dois sistemas de graduação histológica (Patnaik e Kiupel), a coloração especial de azul de toluidina e a imuno-histoquímica para as proteínas KIT e Ki67. Adicionalmente, no estudo prospectivo, foram testados dois sistemas de amplificação (biotinilado e não biotinilado) para a proteína Ki67 e a técnica de AgNOR (contagem das regiões organizadoras nucleolares argirofílicas). Na etapa retrospectiva, observou-se uma maior concordância entre os patologistas avaliadores quando o sistema Kiupel foi utilizado. A imunomarcação para KIT se manteve eficaz em ambos os estudos, independentemente do tempo de fixação. A imunomarcação para o Ki67 mostrou-se altamente sensível ao tempo de fixação em formol, sendo observada falha na imunomarcação em 56% dos casos do estudo retrospectivo. No estudo prospectivo, constatou-se que amostras fixadas por mais de 24 horas em formol apresentaram redução na quantidade de células imunomarcadas (alterando a determinação da fração de crescimento celular) ou apresentaram ausência de imunomarcação em ambos os sistemas de amplificação. A utilização do método AgNOR, para avaliar a taxa de proliferação celular, pode ser uma alternativa quando o tempo de fixação do neoplasma for desconhecido ou superior a 24 horas.


#9 - Expression patterns of mesenchymal stem cell-specific proteins in adipose tissue-derived cells: possible immunosuppressing agent in partial allograft for restoring the urinary bladder in rabbits

Abstract in English:

Adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) are an attractive source of mesenchymal stem cells (MSCs) for use in tissue engineering and clinical applications. This paper focuses on the characterization of ADSCs used as immunosuppressive agent in rabbits undergoing partial allograft for urine bladder restorage. For this study highlighted the characterization of the ADSCs used as immunosuppressive agents in rabbits submitted to partial allograft for restoration of the urinary vesicle, using 25 animals, six months old, New Zealand. ADSCs at the third peal were characterized by the MSC-specific CD105, CD73 and CD90 expression and by the absence of the hematopoietic marker CD45, as revealed by flow cytometry analysis. Moreover, ADSCs were efficient in preventing allograft rejection from the urinary bladder, as judged by biochemical, clinical and ultrasonography analysis. Together, these results compose characterization of protein expression profiles and immunosuppressive functionality of ADSCs in rabbits, which had undergone partial allografts of the urinary bladder, foreseeing future applications in clinical practice.

Abstract in Portuguese:

As células mesenquimais derivadas de tecido adiposo (ADSCs) são uma fonte atraente de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso na engenharia de tecidos e suas aplicações clínicas. Este trabalho destacou a caracterização das ADSCs utilizadas como agentes imunossupressores em coelhos submetidos a aloenxerto parcial para restauração da vesícula urinária, sendo utilizados 25 animais, de seis meses de idade, Nova Zelândia. As ADSCs, após o terceiro repique, foram caracterizadas pela expressão específica de MSC CD105, CD73 e CD90 e pela ausência do marcador hematopoiético CD45, tal como revelado por análise de citometria de fluxo. Além disso, os ADSCs foram eficientes na prevenção da rejeição de aloenxertos da vesícula urinária, conforme avaliado por análises clínica, bioquímica e ultrassonográfica. Juntos, esses resultados compõem a caracterização dos perfis de expressão proteica e a funcionalidade imunossupressora de ADSCs em coelhos, que sofreram aloenxertos parciais da bexiga, prevendo futuras aplicações na prática clínica.


#10 - Acute phase proteins in bitches subjected to conventional and minimally invasive ovariohysterectomy

Abstract in English:

The aim of this study was to evaluate and to compare the possible inflammatory changes by screening acute phase proteins concentrations in healthy bitches subjected to ovariohysterectomy. Minimally invasive and conventional (laparotomy) ovariohysterectomies were performed in 17 client-owned adult female mixed breed dogs. Nine animals were subjected to minimally invasive and eight animals to conventional ovariohysterectomy. Blood samples were taken before surgery, 24, 48 hours, and seven days postoperatively. Serum C-reactive concentration was determined by a commercial ELISA kit and serum haptoglobin concentration was measured via hemoglobin binding assay, both previously validated for use in dogs. As the data did not meet the normal distribution criteria, the nonparametric Kruskall-Wallis was performed to compare quantitative variables between groups. One-way ANOVA and the Friedman test were used for multiple comparisons between time points, with a P<0.05 considered significant. C-reactive protein concentration was significantly different (P<0.0001) at 24 hours postoperatively between groups. There was no significant difference in haptoglobin concentration between groups. C-reactive protein and haptoglobin concentrations were significantly different at 24 and 48 hours postoperatively for minimally invasive and conventional ovariohisterectomies. These findings provided an overview of the short-term inflammatory effects produced by minimally invasive and conventional ovariohysterectomies.

Abstract in Portuguese:

O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar o efeito inflamatório, por meio da determinação de proteínas de fase aguda, produzido por dois protocolos cirúrgicos distintos de ovariohisterectomia em cadelas. Para tanto, foram determinadas as concentrações de proteína C reativa (CRP) e haptoglobina (Hp) de 17 cadelas, sem raça definida, adultas,, sendo nove animais submetidos à ovariohisterectomia pela técnica convencional por laparotomia e oito a ovariohisterectomia pela técnica minimamente invasiva. Para avaliar a resposta de fase aguda causada pelo trauma cirúrgico, amostras de sangue foram obtidas antes dos procedimentos cirúrgicos e em quatro momentos distintos após as cirurgias (24, 48 horas e sete dias) para as dosagens de CRP e Hp, com kit comercial ELISA e via ensaio de ligação com a hemoglobina, respectivamente, validados para o uso em cães. Como não houve distribuição normal dos dados, utilizou-se o teste de Kruskall-Wallis para comparação das variáveis quantitativas entre os dois grupos. Os testes de Friedman e One-way ANOVA foram usados para comparações múltiplas entre os momentos avaliados, sendo considerado P<0,05 como significante. Houve diferença significativa (P<0,0001) para as concentrações de CRP 24 horas após o procedimento cirúrgico entre os dois protocolos utilizados. Não houve diferença significativa para as concentrações de Hp entre os dois protocolos cirúrgicos. Foram evidenciadas alterações significativas para as concentrações de CRP e Hp 24 e 48 horas após as ovariohisterectomias, independentemente da técnica cirúrgica utilizada. As concentrações de CRP e Hp demonstraram o efeito inflamatório imediato induzido pela ovariohisterectomia convencional e minimamente invasiva.


Colégio Brasileiro de Patologia Animal SciELO Brasil CAPES CNPQ UNB UFRRJ CFMV