PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

This study aimed at performing cytometric phenotyping of the blood samples from free-living, young white-eyed parakeets (Psittacara leucophthalmus), stained with 3,3-dihexyloxacarbocyanine [DiOC6(3)]. DiOC6(3)-stained whole blood samples from 19 free-living, young white-eyed parakeets were analyzed by flow cytometry and cell types were distinguished by their typical fluorescence in blue laser channel (FL-1) and SSC (side scatter). It was possible to differentiate erythrocytes (58.3±13.6) from leukocytes (32.4±13.1) and some of the leucocyte subpopulations: lymphocytes/thrombocytes (29.7±7.7), monocytes (30.6±8.5), and granulocytes (5.9-26). However, lymphocytes and thrombocytes could not be sorted in the plots. Our study determined that the predominant population in white-eyed parakeet (P. leucophthalmus) was lymphocytes, thrombocytes, and monocytes in the leucocytes gates in comparison to the granulocyte population. The cytometry method and use of DiOC6(3) stain was available for parakeets blood samples and can be studied and applied to other species of parrots.

• White-eyed parakeet Psittacara leucophthalmus Psittaciformes avian flow cytometry blood cell phenotyping leukocytes DiOC6(3) wildlife animals

Abstract in Portuguese:

Este estudo teve como objetivo realizar a fenotipagem citométrica com 3,3-di-hexiloxacarbocianina [DiOC6 (3)] de amostras de sangue de maritacas jovens de vida-livre (Psittacara leucophthalmus). As amostras de sangue total, coradas com DiOC6(3) de 19 maritacas de vida livre, foram analisadas por citometria de fluxo e os tipos de células foram distinguidos por sua fluorescência típica no canal laser azul (FL-1) e SSC (dispersão lateral). Foi possível diferenciar eritrócitos (58,3±13,6) de leucócitos (32,4±13,1) e algumas subpopulações de leucócitos: linfócitos/trombócitos (29,7±7,7), monócitos (30,6±8,5) e granulócitos (5,9-26), entretanto, linfócitos e trombócitos não puderam ser diferenciados em duas populações distintas. Nosso estudo determinou que a população predominante P. leucophthalmus foi mononuclear agranulocítica em comparação com a taxa de aquisição da população granulocítica. A metodologia de citometria de fluxo com uso da coloração de DiOC6(3) foi aplicável a amostras sanguíneas das maritacas e pode ser estudado e aplicado para outras espécies de psitacídeos.

• Maritacas Psittacara leucophthalmus Psittaciformes aves citometria de fluxo fenotipagem leucócitos DiOC6(3) animais selvagens

Abstract in English:

Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the “Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis” (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.

• Bovine tuberculosis Brazil Mycobacterium bovis zoonosis PCR deer wildlife animals

Abstract in Portuguese:

A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.

• Tuberculose bovina Brasil Mycobacterium bovis zoonose PCR cervídeos animais selvagens

Abstract in English:

Like canids, crab-eating foxes may probably be predisposed to similar orthopedic diseases of domestic dogs, such as hip dysplasia. However, for the adequate hip dysplasia diagnosis in wild animals, the normality characteristics of each species must be determined. This study aimed to estimate radiographic and computed tomographic (CT) values of hip joint laxity in healthy crab-eating foxes. Fifteen intact crab-eating foxes, eight males and seven females, ages 1 to 5 and mean body mass of 6.66kg were used. Norberg angle (NA) was calculated from ventrodorsal hip-extended radiographs. To calculate the dorsolateral subluxation (DLS) score, the center distance (CD) index, the lateral center edge angle (LCEA), and the dorsal acetabular rim angle (DARA), measurements obtained from transverse CT images were used. No statistically significant differences were observed between the right and left sides in the radiographic and tomographic parameters. The mean NA was 107.57°. The mean DLS score, the CD index, the LCEA, and the DARA were 60.79%, 0.16, 98.25° and 13.47°, respectively. The data obtained are helpful in characterizing mean values of the hip joint in healthy crab-eating foxes, and can contribute to the knowledge of the species.

• Hip joint laxity crab-eating foxes Cerdocyon thous radiography computed tomography wildlife animals

Abstract in Portuguese:

Como canídeos, os cachorros-do-mato podem estar predispostos a doenças ortopédicas semelhantes aquelas de cães domésticos, tais como a displasia coxofemoral. No entanto, para o diagnóstico adequado da displasia coxofemoral em animais selvagens, os padrões de normalidade de cada espécie precisam ser determinados. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo estimar os valores radiográficos e tomográficos (TC) da lassitude da articulação coxofemoral em cachorros-do-mato hígidos. Foram utilizados quinze cachorros-do-mato não castrados, oito machos e sete fêmeas, com idades entre 1 e 5 anos e massa corporal média de 6,66kg. O ângulo de Norberg (NA) foi calculado a partir de radiografias na projeção ventrodorsal com os membros estendidos. Para calcular o escore de subluxação dorsolateral (DLS), o índice de distância central (CD), o ângulo da margem central lateral (LCEA) e o ângulo da borda dorsal acetabular (DARA), foram utilizadas as mensurações obtidas a partir de imagens transversais da TC. Não foram observadas diferenças estatísticas entre os lados direito e esquerdo nos parâmetros radiográficos e tomográficos. A média do NA foi de 107,57°. As médias do escore do DLS, do índice de CD, e dos ângulos LCEA e DARA foram, respectivamente, 60,79%, 0,16, 98,25° e 13,47°. Os dados obtidos são úteis para a caracterização dos valores médios referentes à articulação coxofemoral de cachorros-do-mato e podem contribuir para o conhecimento da espécie.

• Lassitude articulação coxofemoral cachorro-do-mato Cerdocyon thous radiografia tomografia computadorizada animais selvagens

Abstract in English:

The aim of this study was the ultrasonographic evaluation of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of healthy snakes in the Boidae family. For such, 15 adult snakes from five species were evaluated: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi and Epicrates crassus. The animals were physically restrained for examination. After the application of acoustic gel over the scales the transducer was positioned in the frontal plane of the coelomic cavity. Microconvex and linear transducers at 10MHz were used. The ultrasound examination was conducted in the craniocaudal direction, with longitudinal and transversal sections to assess syntropy, echogenicity and echotexture of the organs. The liver was bilobulated, hyperechoic, homogeneous echotexture, hyperechoic capsule, with a hepatic lobe measuring 1.15±0.64cm wide, and the presence of a central hepatic vein, measuring 0.44±0.21cm in diameter. The gallbladder was characterized as an anechoic structure with echogenic walls and dimensions of 2.91±1.18cm x 1.38±0.84cm (length x width). The stomach showed a pleated and linear texture, echogenic, with hypoechoic walls measuring 0.3±0.07cm wide. The splenopancreas was a circular and echogenic structure, homogeneous echotexture and measuring 1.18±0.62cm in width and 1.56±0.88cm in length. The kidneys were characterized by elongated, lobulated, hypoechoic structures, an echogenic capsule and an echogenic central line, measuring 1.05±0.7cm in width. The testis were characterized by fusiform, hypoechoic structures, homogeneous echotexture, measuring 2.31±0.79cm in length and 0.6±0.23cm in width. Ovarian follicles were seen in different stages, 0.67±0.39cm wide and 0.73±0.38cm long. No differences were found between species of syntropy, echogenicity and echotexture of the organs of the coelomic cavity. The ultrasound examination proved to be a safe, non-invasive and efficient technique for characterizing the organs of the coelomic cavity of snakes.

• Ultrasonography coelomic cavity snakes Boidae family Boa constrictor Epicrates spp. Eunectes murinus diagnostic imaging Squamata wildlife animals

Abstract in Portuguese:

O objetivo do estudo foi realizar a avaliação ultrassonográfica de órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes hígidas da família Boidae. Para isto, foram avaliadas 15 serpentes adultas de cinco espécies: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi e Epicrates crassus. Os animais foram contidos fisicamente para a realização do exame. Após aplicação de gel acústico sobre as escamas, o transdutor foi posicionado no plano frontal da cavidade celomática. Foram utilizados transdutores microconvexo e linear em 10MHz. O exame ultrassonográfico foi conduzido no sentido craniocaudal, com cortes longitudinais e transversais para avaliar sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. O fígado se apresentou bilobulado, hiperecoico, ecotextura homogênea, cápsula hiperecoica, com lobo hepático medindo 1,15±0,64cm de largura, e presença de uma veia central hepática, medindo 0,44±0,21cm de diâmetro. A vesícula biliar foi caracterizada como uma estrutura anecoica de paredes ecogênicas e dimensões de 2,91±1,18cm x 1,38±0,84cm(comprimento x largura). O estômago apresentou-se com o aspecto pregueado e linear, ecogênico, com paredes hipoecoicas medindo 0,3±0,07cm de largura. O esplenopâncreasse apresentou como uma estrutura circular e ecogênica, ecotextura homogênea e medindo de 1,18±0,62cm de largura e 1,56±0,88cm de comprimento. Os rins se caracterizaram por estruturas alongadas, lobuladas, hipoecoicas, cápsula ecogênica e uma linha central ecogênica, medindo 1,05±0,7cm de largura. Os testículos foram caracterizados por estruturas fusiformes, hipoecoicas, ecotextura homogênea, medindo 2,31±0,79cm de comprimento e 0,6±0,23cm de largura. Foram visualizados folículos ovarianos em diferentes estágios, de 0,67±0,39cm de largura e 0,73±0,38cm de comprimento. Não foram encontradas diferenças entre espécies de sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos da cavidade celomática. O exame ultrassonográfico demonstrou-se uma técnica segura, não invasiva e eficiente para caracterização dos órgãos da cavidade celomática de serpentes.

• Ultrassonografia cavidade celomática serpentes Boidae boídeos celoma diagnóstico por imagem ofídios animais selvagens

Abstract in English:

The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neospora spp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.

• Molecular detection Apicomplexa protozoa Alouatta guariba clamitans brown howler monkey Sarcocystis Toxoplasma genotyping wildlife animals

Abstract in Portuguese:

O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.

• Detecção molecular protozoários Apicomplexa Alouatta guariba clamitans bugio ruivo Sarcocystis Toxoplasma genotipagem animais selvagens

Abstract in English:

Amphisbenians are limbless reptiles that belong to the order Squamata. Due to their fossorial and secrevie habits, little is known about their morphology, ecology and pathological conditions that may affect them. In this manuscript, we present a brief guide for identification of normal structures as well as traumatic injuries on radiography and necropsy of Amphisbaena alba. From April to September 2019, three cases of A. alba with suspected trauma were referred to the Veterinary Hospital of the Federal University of Paraíba (UFPB). In the clinical evaluation, traumatic injuries were observed, and support therapy was instituted, but they did not resist and died shortly after. Bone fractures and organ ruptures, in addition to specific structures of this species were identified on radiography. A systematic necropsy was performed of all amphisbaenians in order to evaluate external and internal structures, not only to identify lesions but also to investigate the morphological aspects of amphisbenids. Macroscopically, multiple organ fractures and ruptures observed in radiographs were confirmed, in addition to the presence of the cestodes Semenoviella amphisbaenae in the large intestine. Histologically, it was possible to identify normal characteristics and microscopic lesions in the tissues. This is the first study to incorporate morphological, clinical, and pathological aspects of A. alba. This manuscript brings essential information for wildlife veterinarians and pathologists who may have to treat or perform a necropsy on these unique reptiles.

• White worm lizards Amphisbaena alba Brazil morphology pathology radiography Squamata reptiles wildlife diseases trauma Semenoviella amphisbaenae wildlife animals

Abstract in Portuguese:

Anfisbenas são répteis desprovidos de membros que pertencem a ordem Squamata. Devido a seus hábitos fossoriais e reclusos, pouco se conhece sobre sua morfologia, ecologia e condições patológicas que possam afetá-las. Neste artigo, um guia sucinto para a necropsia, identificação de tecidos e órgãos e lesões encontradas em Amphisbaena alba, é apresentado. Durante março e dezembro de 2019, três casos de A. alba com suspeita de trauma foram encaminhados ao Hospital Veterinário da Universidade Federal da Paraíba. Na avaliação clínica foram observadas lesões traumáticas e instituído um suporte terapêutico, porém não resistiram e morreram em seguida. Foram realizadas projeções radiográficas onde identificaram fraturas e ruptura de órgãos, além de identificar estruturas específicas dessa espécie. Uma avaliação completa de estruturas externas e internas foi conduzida para investigar aspectos morfológicos dos anfisbenídeos. Macroscopicamente foram confirmadas múltiplas fraturas e rupturas de órgãos observadas anteriormente nas radiografias, além disso evidenciou no intestino grosso presença de parasitos anoplocéfalos denominados Semenoviella amphisbaenae. Na histologia foi possível identificar características normais e lesões microscópicas nos tecidos. Esse é o primeiro estudo a incorporar aspectos morfológicos, clínicos e patológicos de A. alba. Esse manuscrito traz informações essenciais para clínicos e patologistas de animais selvagens que podem se deparar com casos clínicos ou de necropsia de Amphisbaena alba.

• Anfisbenas cobra-de-duas-cabeças Amphisbaena alba Brasil morfologia patologia radiografia Squamata répteis doenças de vida livre trauma anfisbena Semenoviella amphisbaenae animais selvagens

Abstract in English:

Skin and cartilage have been the main source for the recovery of somatic cells to be used in conservation strategies in wild mammals. In this sense, an important step for the cryopreservation of these samples is to recognize the properties of the skin and cartilage. Thus, knowing that the skin may differ among species and aiming to contribute to the establishment of cryobanks, the study examined the differences in the ear skin and cartilage of wild rodents from South America, agouti (Dasyprocta leporina) and spix’s yellow-toothed cavy (Galea spixii). Ultrastructural and quantitative methods were used to measure skin and cartilage thickness, density of collagen and elastic fibers, cell type number and distribution, and proliferative activity. Although ultrastructural analysis revealed a similar pattern between species, morphometric analysis of the skin and cartilage showed differences between agoutis and cavies regarding thickness of epidermis layers (corneum: 5.3±2.5µm vs. 3.9±0.6µm; intermediate: 16.4±6.2µm vs. 23.4±8.1µm; basal: 9.9±2.1µm vs. 4.8±0.5µm), dermis (183.1±44.0µm vs. 258.2±22.9µm), total skin (211.8±46.0µm vs. 290.3±23.7µm) and perichondrium (27.6±6.1µm vs. 10.5±1.8µm). A greater number of epidermal cells (61.7±15.2 vs. 24.8±7.6) and chondrocytes (32.7±9.0 vs. 27.5±4.7) were observed in agouti, while the cavy presented a greater number of melanocytes (12.6±4.7 vs. 29.9±6.2), keratinocytes (14.7±4.2 vs. 29.8±7.6), and fibroblasts (103.6±24.7 vs. 112.2±11.3). Moreover, a higher percentage of collagen fibers and proliferative activity was observed in the skin of cavies, when compared to the skin of agoutis. Therefore, there are differences between agouti and cavy for ear skin and cartilage, requiring the establishment of species-specific cryopreservation protocols.

• Wild rodents Dasyprocta leporina Galea spixii ultrastructure morphology morphometry ear skin cartilage cryobanks wildlife animals

Abstract in Portuguese:

A pele e cartilagem têm sido uma importante fonte de recuperação de células somáticas a serem utilizadas em estratégias de conservação em mamíferos silvestres. Nesse contexto, uma importante etapa para criopreservação é conhecer, inicialmente, as propriedades que compõem a pele e cartilagem. Sabendo, então, que a pele pode diferir-se entre espécies e com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de criobancos, o estudo evidenciou as diferenças da pele e da cartilagem do pavilhão auricular apical de cutias (Dasyprocta leporina) e preás (Galea spixii) que são roedores silvestres presentes na América do Sul. Para tanto, métodos ultraestruturais e quantitativos foram utilizados para mensurar a espessura da pele e da cartilagem, densidade de fibras colágenas e elásticas, número e distribuição dos tipos celulares e atividade proliferativa. Embora as propriedades ultraestruturais em cutias e preás tenham se mostrado semelhantes, avaliações acerca da morfometria da pele e da cartilagem demonstrou diferenças, especialmente nas camadas epidérmicas (córnea: 5,3±2,5µm vs. 3,9±0,6µm; espinhosa: 16,4±6,2µm vs. 23,4±8,1µm; basal: 9,9±2,1µm vs. 4,8±0,5µm), derme (183,1±44,0µm vs. 258,2±22,9µm), pele total (211,8±46,0µm vs. 290,3±23,7µm) e pericôndrio (27,6±6,1µm vs. 10,5±1,8µm). Além disso, um número maior de células epidérmicas (61,7±15,2 vs. 24,8±7,6) e condrócitos (32,7±9,0 vs. 27,5±4,7) foram observados em cutias, enquanto em preás um maior número de melanócitos (12,6±4,7 vs. 29,9±6,2), queratinócitos (14,7±4,2 vs. 29,8±7,6) e fibroblastos (103,6±24,7 vs. 112,2±11,3) foram evidenciados. Ainda, em preás, uma maior porcentagem de fibras colágenas e da atividade proliferativa foram observadas quando comparadas a pele de cutias. Portanto, existem diferenças entre cutias e preás para pele e cartilagem do pavilhão auricular, exigindo desta forma um estabelecimento de protocolos de criopreservação específica para cada uma destas espécies.

• Roedores silvestres Dasyprocta leporina Galea spixii ultraestrutura morfologia morfometria pele auricular cartilagem criobancos animais selvagens

Abstract in English:

Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.

• Molecular diagnosis avian virus passerines yellow cardinals Gubernatrix cristata Brazil conservation pampa sanitary profile thornbush threatened species wildlife animals

Abstract in Portuguese:

Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.

• Diagnóstico molecular vírus aviário passeriformes cardeal-amarelo Gubernatrix cristata Brasil conservação pampa perfil sanitário espinilho espécies ameaçadas animais selvagens

Abstract in English:

The morphology of the male reproductive tract of Tomodon dorsatus was described in the austral seasons of the year considering macroscopic and microscopic variables. For this purpose, 56 specimens from the herpetological collection of the “Instituto Butantan” were used. Fragments of the testes, kidneys and ductus deferens were collected and submitted to histological routine. The peak of the testicular volume was observed in the summer and the epithelium of the seminiferous tubules had higher height in the summer (p=0.001). The testes were active throughout the year, however, the spermiogenesis peaked in the summer. There were spermatozoa in the lumen of the ductus deferens in all seasons of the year. Renal length was higher in autumn (p=0.027), and renal width did not show a significant increase (p=0.237). The diameter and epithelial height of the sexual segment of the kidney (SSK) showed hypertrophy in winter and spring, coinciding with the mating period. Based on findings of this study, we can suggest that, at the population level, the reproductive cycle of T. dorsatus can be considered seasonal semi-synchronous, due to the peak of spermiogenic activity in the hot season, and discontinuous at the individual level.

• Reproduction Tomodon dorsatus Brazil snake sexual segment kidney testis wildlife animals

Abstract in Portuguese:

A morfologia do trato reprodutivo do macho de Tomodon dorsatus foi descrita nas estações climáticas do ano com base em variáveis macroscópicas e microscópicas. Para isto, foram usados 56 espécimes oriundos da coleção herpetológica do Instituto Butantan. Fragmentos dos testículos, rins e ductos deferentes foram coletados e submetidos à rotina histológica. O volume testicular foi maior no verão e o epitélio dos túbulos seminíferos mostrou uma maior altura no verão (p=0.001). Os testículos estavam ativos durante todo o ano, contudo, a espermiogênese foi maior no verão. Espermatozoides foram encontrados no lúmen do ducto deferente em todas as estações do ano. O comprimento renal foi maior no outono (p=0.027), e a largura renal não mostrou um aumento significativo (p=0.237). O diâmetro e a altura epitelial do segmento sexual do rim (SSR) mostrou hipertrofia nas estações inverno e primavera, coincidindo com o período reprodutivo. Com base nestes resultados, pode-se sugerir que, em nível populacional, o ciclo reprodutivo de T. dorsatus possa ser considerado semi-sincrônico sazonal, devido à atividade espermiogênica na estação quente, e descontínuo em nível individual.

• Reprodução Tomodon dorsatus serpentes segmento sexual rim testículo animais selvagens

Abstract in English:

This study assessed microscopic morphology of protozoan and metazoan parasites, as well as parasite-associated histopathologic changes in five Brazilian free-ranging armadillos. Three armadillos had intra sarcolemmal cysts of Sarcocystis sp. in skeletal muscles without microscopic changes. One Dasypus novemcinctus was found parasitized with a nematode morphologically compatible with an oxyurid in the small intestine. One Dasypus sp. had neutrophilic enteritis associated with adult and larval stages of Strongyloides sp. and one D. novemcinctus had multiple embryonated eggs free in the lumen of the small intestine with mild neutrophilic enteritis. These findings represent a contribution for expanding our knowledge on parasitic diseases of armadillos.

• Histopathology microscopic morphology protozoan metazoan parasites armadillos Brazil Dasypus novemcinctus Sarcocystis sp. Strongyloides sp. parasitism

Abstract in Portuguese:

Este estudo avaliou a morfologia microscópica de parasitos protozoários e metazoários, bem como lesões associadas ao parasitismo em cinco tatus de vida livre no Brasil. Três tatus tinham cistos de Sarcocystis sp. Intra-sarcolemal em músculos esqueléticos sem alterações microscópicas. Um Dasypus novemcinctus estava parasitado com um nematodo morfologicamente compatível com oxiurideo no intestino delgado. Um Dasypus sp. apresentou enterite neutrofílica associada com estágios larvais de Strongyloides sp. e um D. novemcinctus apresentou múltiplos ovos embrionados livres no lúmen do intestino delgado, associado a enterite neutrofílica discreta. Estes achados representam uma contribuição para a expansão do conhecimento sobre doenças parasitárias de tatus.

• Histopatologia morfologia microscópica parasitos protozoários metazoários tatus Brasil Dasypus novemcinctus Sarcocystis sp. Strongyloides sp. parasitismo

Abstract in English:

Free-living wild animals can host a wide variety of endoparasites. When subjected to conditions of captivity, these animals can go through stressful situations and develop parasites. Therefore, the objective of this study was to identify parasitic infection in wild mammals, birds, and reptiles kept at the “Universidade de Caxias do Sul” Zoo, in Rio Grande do Sul state, Brazil. The population studied was based on 76 animals, divided into 50% (38/76) birds, 35.53% (27/76) mammals, and 14.47% (11/76) reptiles distributed in 33 different enclosures. Fecal samples were collected from the enclosures and analyzed in triplicate, using the centrifugal-flotation method with a zinc sulfate solution. Samples from the enclosures 31, 32, 33, (where snakes are located), and 15 (animal death), were not analyzed in triplicate, so the total number of analyses was 91 samples. The results showed that 41.76% (38/91) of the samples were positive for at least one class of endoparasites, such as Nematoda, Cestoda, or Coccidia. The positive samples showed the presence of at least one or more parasites from orders Strongylida (34.21%), Enoplida and Strongylida (23.68%), Enoplida only (23.68%), Cyclophyllidea and Oxyurida (5.26%), Ascaridida only (5.26%), Enoplida, Strongylida, and Ascaridida (5.26%), and Enoplida and Eucoccidiorida (2.63%). Considering the positive samples, 55.26% were collected from birds, 39.47% from mammals, and 5.27% from reptiles. Capillaria sp. eggs were the main structure found in birds, and eggs from the order Strongylida were the most found in samples from mammals. This study showed the order Strongylida as the most frequent parasite found in 63.16% of the total samples, established either in isolated or mixed infestations. Also, mammals and birds were those with a greater quantity of positive samples for endoparasites. Therefore, this study emphasizes the importance of carrying out research assessing the gastrointestinal parasitic fauna in wild animals, so one can determine the conditions under which these parasites become pathogenic to wild animals raised in captivity.

• Birds mammals reptiles wild animals zoo captivity endoparasites parasitic analysis

Abstract in Portuguese:

Os animais silvestres de vida livre podem albergar uma grande variedade de endoparasitas. Esses animais, quando submetidos a condições de cativeiro podem passar por situações de estresse e desenvolver parasitoses. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi identificar a infecção parasitária em mamíferos, aves e répteis silvestres mantidos no Zoológico da Universidade de Caxias do Sul, no Rio Grande do Sul/Brasil. A população estudada foi de 76 animais, nos quais 50% (38/76) eram aves, 35,53% (27/76) mamíferos e 14,47% (11/76) répteis, distribuídos em 33 recintos diferentes. Amostras de fezes foram coletadas dos recintos e analisadas em triplicata pelo método de centrífugo-flutuação com solução de Sulfato de Zinco. Como não foi possível analisar em triplicata o material dos recintos 31, 32, 33 os quais alojam as serpentes e o recinto 15 pois o animal veio a óbito, o total de análises foi de 91 amostras. Os resultados demonstraram que 41,76% (38/91) das amostras foram positivas para, pelo menos, um endoparasita da classe Nematoda, Cestoda ou Coccidia. As amostras positivas indicaram a presença de um ou mais parasitas sendo da ordem Strongylida (34,21%), Enoplida e Strongylida (23,68%), apenas Enoplida (23,68%), Cyclophyllidea e Oxyurida (5,26%), apenas Ascaridida (5,26%), Enoplida, Strongylida e Ascaridida (5,26%), e Enoplida e Eucoccidiorida (2,63%). Das amostras positivas 55,26% foram de aves, sendo que ovos de Capillaria sp. foi a principal estrutura identificada, 39,47% de mamíferos apontando que a ordem Strongylida foi a mais prevalente e 5,27% de répteis. O estudo demonstrou que, dentre os parasitas encontrados, aqueles da ordem Strongylida foram os mais frequentes, sendo observada em monoinfecção ou infecção mista em 63,16% das amostras analisadas. Dos animais avaliados, as aves e mamíferos foram os que apresentaram maior quantidade de amostras positivas para endoparasitas. Diante disso, é importante a realização de pesquisas que permitem avaliar a fauna parasitária para que seja possível determinar as condições em que esses parasitas se tornam patogênicos aos animais cativos.

• Aves mamíferos répteis animais silvestres zoológico cativeiro endoparasitas análises parasitárias

Abstract in English:

The grey-breasted parakeet (Pyrrhura griseipectus) is an endangered psittacine species that have been affected by illegal trade and deforestation. Currently, this endemic species is only found in three areas in Ceará state, in Brazil. This study aimed to investigate the frequency and diversity of Enterobacteriaceae in wild adult grey-breasted parakeets and determine their susceptibility to antimicrobial agents. Cloacal swab samples were collected from 27 individuals and environmental swabs (drag swabs) from five nests used by these birds. Twenty-seven strains from nine species of Enterobacteriaceae were recovered from cloacal swabs, and the most prevalent bacteria strains were Hafnia alvei (22%) and Pantoea agglomerans (22%). From environmental nest samples, seven strains from three bacterial species were isolated, being the P. agglomerans the most frequent species (100%). Twenty-two of the 27 isolates (81.4%) exhibited antibiotic resistance, varying from one to eight of the 12 antimicrobials commonly used. Resistance to amoxicillin was the most prevalent (70.4%), followed by azithromycin (22.2%) and ceftriaxone (18.5%). None of the strains were resistant to gentamicin, tobramycin, ciprofloxacin or tetracycline. The H. alvei was the main species presenting multidrug resistance, including resistance against meropenem, which is an important finding. These results could provide interesting information on the health of these endangered wild grey-breasted parakeets. They could also indicate that the obtained isolates are part of a group of bacteria that are typical components of the enteric microbiota of birds, which present elevated rates of resistance to amoxicillin.

• Enterobacteria wild grey-breasted parakeets Pyrrhura griseipectus antimicrobial resistance conservation psittacine birds threatened species wildlife animals

Abstract in Portuguese:

O periquito-de-cara-suja (Pyrrhura griseipectus) é uma espécie de psitacídeo considerado pela IUCN como ameaçado de extinção, resultado do comércio ilegal e do desmatamento. Atualmente, essa espécie endêmica é encontrada apenas em três áreas no estado do Ceará, Brasil. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência e a diversidade de Enterobacteriaceae em periquitos de peito cinza adultos selvagens e determinar sua suscetibilidade a agentes antimicrobianos. Amostras de suabes cloacais foram coletadas de 27 indivíduos e de suabes ambientais (suabes de arrasto) de cinco ninhos utilizados por essas aves. Vinte e sete cepas de nove espécies de Enterobacteriaceae foram isoladas a partir de suabes cloacais, sendo as cepas bacterianas mais prevalentes Hafnia alvei (22%) e Pantoea agglomerans (22%). Das amostras ambientais de ninhos foram isoladas sete linhagens de três espécies bacterianas, sendo P. agglomerans a espécie mais frequente (100%). Vinte e dois dos 27 isolados (81,4%) exibiram resistência a antibióticos, variando de um a oito dos 12 antimicrobianos comumente usados. A resistência a amoxicilina foi a mais prevalente (70,4%), seguida por azitromicina (22,2%) e ceftriaxona (18,5%). Nenhuma das cepas era resistente à gentamicina, tobramicina, ciprofloxacina ou tetraciclina. H. alvei foi a principal espécie que apresentou resistência a múltiplas drogas e que também esteve associada a um outro achado relevante desta pesquisa, que foi a detecção de um caso de resistência ao meropenem. Esses dados fornecem informações relevantes sobre a saúde desses periquitos selvagens ameaçados e permite concluir que os isolados obtidos fazem parte de um grupo de bactérias que normalmente compõe a microbiota entérica das aves, sendo a amoxicilina envolvida em elevadas taxas de resistência.

• Enterobactérias periquitos-de-cara-suja Pyrrhura griseipectus resistência antimicrobiana conservação aves psitacídeos espécies ameaçadas animais selvagens

Abstract in English:

The Psittaciformes are among the most popular pets due to their intelligence, ability, and ease of maintenance in small environments. However, the absence of adequate environmental stimuli generated by confinement can predispose these animals to characteristic stress conditions, leaving them susceptible to the triggering of various diseases, among which those of bacterial origin stand out. The objective of this study was to carry out a survey of enterobacteria and evaluate the antimicrobial sensitivity profile of bacteria isolated from parrots from a pet shop in the city of Fortaleza, Ceará. Ninety-six samples were collected from four pet shops (which were classified as A, B, C and D), eight samples of local swabs from budgerigar (Melopsittacus undulatus), were collected from each establishment eight from cockatiels (Nymphicus hollandicus) and eight from lovebirds (Agapornis sp.). Isolation of enterobacteria is under the methodology used by Lopes et al. (2015) with modifications. The method used to study bacterial resistance was the Kirby-Bauer method, following the standards stipulated by the Clinical and Laboratory Standards Institute. Sixty-eight enterobacteria strains from ten different species, Proteus mirabilis, Citrobacter diversus, Pantoea agglomerans, Escherichia coli, Providencia stuartii, Hafnia alvei, Proteus vulgaris, Serratia liquefaciens, Enterobacter sakasakii and Citrobacter amalonaticus, were isolated. P. agglomerans was the bacterium with the highest frequency of isolates from pet shop parrots, making up 23.5% of the isolates; the second-most isolated strain was P. mirabilis with 17.7%. In this study, 79% of the isolated strains were resistant to at least one class of antimicrobials tested. Tetracycline proved to be the most resistant antimicrobial (44%), followed by polymyxin B (38%) and nalidixic acid (25%). Among the 68 strains, 19% did not show resistance to any of the classes of antimicrobials tested. The condition of multidrug resistance - resistance to ≥3 classes of antimicrobials - was observed in 18% of the isolated strains.

• Zoonotic bacteria antimicrobial resistance parrot pet shops Brazil birds bacteria antibiotic resistance wildlife animals

Abstract in Portuguese:

Os psittaciformes estão entre os animais de estimação mais populares devido sua inteligência, habilidade, além da facilidade de manutenção da espécie em pequenos ambientes. Contudo, a ausência de estímulos ambientais adequados gerados pelo confinamento, podem predispor esses animais a quadros característicos de estresse, deixando-os susceptíveis ao desencadeamento de várias doenças dentre elas se destacam as de origem bacteriana. O objetivo desse trabalho foi realizar uma pesquisa de enterobactérias e avaliar o perfil de sensibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de psitacídeos de pet shop da cidade de Fortaleza, Ceará. Foram coletadas 96 amostras de quatro pet shops (os quais foram classificados em A, B, C e D), sendo coletados de cada estabelecimento oito amostras de suabes clocais oriundos de periquitos australianos (Melopsittacus undulatus), oito de calopsitas (Nymphicus hollandicus) e oito de agapornis (Agapornis sp.). O isolamento de enterobactérias está de acordo com a metodologia utilizada por Lopes et al. (2015) com modificações. O método utilizado para o estudo de resistência bacteriana foi o de Kirby-Bauer, seguindo os padrões estipulados pela Clinical and Laboratory Standards Institute. Foi isolado um total de 68 cepas de enterobactérias, de dez espécies diferentes, Proteus mirabilis, Citrobacter diversus, Pantoea agglomerans, Escherichia coli, Providencia stuartii, Hafnia alvei, Proteus vulgaris, Serratia liquefaciens, Enterobacter sakasakii e Citrobacter amalonaticus. Pantoea agglomerans foi a bactéria com maior percentagem de frequência dos isolados de psitacídeos de pet shop, perfazendo um total de 23,5% dos isolados, a segunda cepa mais isolada foi Proteus mirabilis com 17,7%. Neste estudo 79% das cepas isoladas foram resistentes a pelo menos uma classe de antimicrobianos testados, tetraciclina demonstrou ser o antimicrobiano com maior resistência (44%), seguido da polimixina B (38%) e do ácido nalidíxico (25%). Dentre as 68 cepas isoladas, 19% não apresentaram resistência a qualquer uma das classes de antimicrobianos testadas. A condição de multirresistência, ou seja, resistência a ≥3 classes de antimicrobianos foi observado em 18% das cepas isoladas.

• Bactérias zoonóticas resistência antimicrobiana psitacídeos pet shops Brasil aves bactérias resistência a antibióticos animais selvagens

Abstract in English:

In Brazil, the illegal capture of wild animals is a crime that contributes to the extinction of species, besides causing environmental imbalance and suffering to the animals. Here, we undertook a quantitative survey of animals sent to the “Centro de Triagem de Animais Silvestres” (CETAS - Wild Animals Triage Centers) from units of Porto Seguro, Salvador, and Vitória da Conquista during 2009-2019. The 19,317, 34,460, and 43,874 specimens were registered in the units of Porto Seguro, Vitória da Conquista, and Salvador, respectively. The distribution of the totals by class included 80,948 (82.90%) birds, 12,007 (12.30%) reptiles, 4,661 (4.77%) mammals, and 35 arachnids (0.03%). The operations that generated registration at the CETAS were most frequently apprehensions (67,974; 69.67%), followed by voluntary surrender (13,367; 13.69%), rescues (12,803; 13.11%), and transfers (2,735; 2.67%). The animals came from 236 municipalities in the state of Bahia, with emphasis on the municipalities of Salvador, Vitória da Conquista, Feira de Santana, Lençóis, Jequié, and Paulo Afonso. The evaluation of the quantitative seizures by municipalities indicates that the BR-116 is one of the most representative routes for the illegal traffic of wild animals in the state of Bahia and the country.

• Wild animals apprehension routes CETAS

Abstract in Portuguese:

No Brasil a captura ilegal de animais silvestres é crime e contribui para a extinção das espécies, além de causar desequilíbrios ambientais e sofrimentos aos animais. Este trabalho apresenta quantitativos de animais recebidos e/ou armazenados nos Centros de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do estado da Bahia, no período de 2009-2019. Os totais de 19.317, 34.460 e 43.874 espécimes foram registrados nas unidades de Porto Seguro, Vitória da Conquista e Salvador, respectivamente. A distribuição dos totais por classe incluiu 80.948 (82,90%) aves, 12.007 (12,30%) répteis, 4.661 (4,77%) mamíferos e 35 aracnídeos. Quanto à natureza da operação que gerou o registro nos CETAS, as mais frequentes foram apreensão (67.974; 69,67%), entrega voluntária (13.367; 13,69%), resgate (12.803; 13,11%) e transferência (2.735; 2,67%). Os animais foram apreendidos em 236 municípios do estado da Bahia, com destaque para Salvador, Vitória da Conquista, Feira de Santana, Lençóis, Jequié e Paulo Afonso. A avaliação dos quantitativos das apreensões por municípios indica que a BR-116 é uma das rotas de escoamento mais representativa do tráfico ilegal de animais silvestres, no estado da Bahia e no país.

• Animais silvestres apreensão rotas CETAS